Физиолого-биохимические свойства мутантов термофильной бактерии Bacilius Diastaticus, образующей альфу-амилазу

Тип работы:
Диссертация
Предмет:
Микробиология
Страниц:
276


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

В нашей стране, как и во всем мире, с каздым годом растет производство ферментных препаратов, синтезируемых микроорганизмами (Калунянц, 1982- Складнев, 1982- Aunstrup, 1981- Ducroo, 1982). Применение ферментных препаратов в пищевой, легкой, химической и других отраслях промышленности обеспечивает значительное ускорение технологических процессов, улучшает качество продуктов, увеличивает выход готовой продукции (Дюджюс и др., 1980- Ereleigh, 1981- Carr, 1982). Все большее практическое применение находят ферменты в сельском хозяйстве и в медицине (Селезнева, 1977- Aharonowitz et al., 1981).

С момента создания в стране в 1968 г. по решению ХЖ съезда КПСС микробиологической промышленности не сшилается задача получения высокоактивных штаммов микроорганизмов — продуцентов биологически активных веществ с помощью современных методов генетики и селекции. Об этом записано в решениях ХХУ и ХШ съездов КПСС.

Как известно, подавляющее большинство микроорганизмов — продуцентов ферментов, применяемых в промышленности, являются мезо-фильными формами. Тогда как термофильные организмы (бактерии, актиномицеты, плесневые грибы, растущие при 50−60°) как продуценты ферментов и особенно экзоферментов: амилаз, протеаз, гемицеллюлаз и литических ферментов представляют несомненный интерес. Такие микроорганизмы обладают высокой скоростью роста клеток и ускоренным биосинтезом ферментов. Высокие температуры выращивания предохраняют эти организмы от заражения посторонней микрофлорой. Ферменты термофилов обладают более высоким температурным оптимумом действия на субстрат и термостабильностью, что является ценным качеством для многих технологических процессов (Имшенецкий, 1943, 1944- Логинова и др., 1971, 19 736- Кутузова, 1982- Daniel, 1981).

— G

В последнее время в СССР и за рубежом уделяется большое внимание изучению термофильных микроорганизмов и их ферментов (Выборных, 1975- Закиров, 1983- Свистова, 1983- Щллина, 1983- Amelunxen, 1976, 1978- Buonocore, 1976- Klaushofer, 1981- Johri, 1982- Uchino, 1982- Suzuki, 1983). Ваяно, однако, не только выделение термофильных продуцентов из природных источников, но и получение у таких организмов высокоактивных мутантов* Число работ в этом направлении невелико (Гецдина и др., 1974а- Овчинникова, 1974- Rowe, 1973- Reiz er, 1974- Chell, 1975- Hartley, 1983). Поэтому актуальным является получение у термофилов штаммов с повышенным биосинтезом ферментов путем селекции с применением мутагенов и изучение физиологии полученных форм.

К моменту начала настоящей работы о термофильной бактерии Bacillus diaataticus было известно, что она выделена и описана А. А. Имшенецким с сотрудниками в 1942 г. Бактерия имеет температурный оптимум роста 60° и образует фермент (& iquest--амилазу. Фермент Вас. dias tat icus — термостабильный, относящийся к декстринирующим амилазам, расщепляет крахмал до Cjq-Cjq остатков в интервале температур 50−95° с оптимумом 75−80°. Фермент активен при pH 4,6−7,9 и имеет оптимум pH 5,8 (Имшенецкий, 1942, 1944- Кислухина, 1966а, 1968). & aacute--Амилаза Вас. diastaticus была рекомендована для применения в текстильной и спиртовой промышленности (Имшенецкий, 1943- Улезло, 1961- Максимова, 1973). Однако до последнего времени эта бактериальная культура в промышленных масштабах не применялась.

Настоящая работа посвящена получению под действием мутагенов штаммов термофильной бактерии вас. diastaticus с повышенным уровнем синтеза oL-амилазы и сравнительному изучению физиолого-биохими-ческих особенностей этих штаммов.

Задачи исследования были следующие:

I. Отобрать наиболее активный штамм в результате изучения естественной изменчивости Вас. diastatieus по биосинтезу оС-аш-лазн.

2. Методом ступенчатой селекции активного штамма с применением мутагенов физической и химической природы получить мутанты Вас. diastatieus с повышенным уровнем синтеза & laquo-¿--амилазы.

3. Провести сравнительное изучение физиолого-биохимических особенностей штаммов с разным уровнем синтеза & iquest-¿--амилазы.

4. Изучить условия регуляции биосинтеза фермента факторами внешней среды у активных мутантов.

Научная новизна работы заключается в том, что показана возможность получения у термофильной бактерии вас. diastatieus под действием мутагенных факторов мутантов, которые различаются по способности образовывать фермент сО-амилазу. Впервые детально изучены морфология, ультраструктура и физиолого-биохимические особенности высоко- и низкоактивных мутантов вас. diastatieus. Подробно изучен комплекс гидролитических ферментов у этих штаммов. Изучена регуляция биосинтеза & iquest-¿-«--амилазы у высоко- и низкоактивных мутантов с помощью индуктора ме тил-& lt-*, D-глюкозида. Впервые обнаружена и экспериментально подтверждена лизогенность всех изучаемых штаммов Вас. diastatieus. Дизогения термофильной бактерии цредставляет определенный теоретический интерес в пиане изучения взаимодействия клетки — хозяина и фага, затрагивающего изменение ряда фенотипических признаков.

Практическая ценность исследований состоит в том, что в результате ступенчатой селекции с применением мутагенов получены мутанты термофильной бактерии вас. diastatieus, превышающие исходную культуру по биосинтезу & iquest--амилазы на 52-G ($. Оптимизация соотава сред позволила увеличить амилолитическую активность наиболее продуктивных мутантов в 2,5−3 раза. Проведенные в полупроизводственных условиях испытания мутанта НЭНГ 6−10.8 подтвердили возможность получения активного препарата & laquo-¿--амилазы. На этот штамм получено авторское свидетельство, и он может быть рекомендован для промышленного получения фермента. 9 ~

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

— 169 -ВЫВОДЫ

1. Изучалась естественная и индуцированная мутагенами изменчивость термофильной бактерии Бас. diastaticus по биосинтезу об-ами-лазы. В результате изучения естественной изменчивости выявлена гетерогенность популяции по этому признаку: 75,5 $ клеток активны по биосинтезу & laquo-¿--амилазы, 2,9 $ - неактивны, остальные — низкоактивны. Показана возможность увеличения изменчивости вас. diastaticus по биосинтезу амилазы под действием мутагенов.

2. Получены методом ступенчатой селекции с применением мутагенных факторов: УФ-лучей, новоэмбихина, нитрозогуанидина, мутанты УФ 1−25. 21 и НЭНГ 6−10. 8, превышающие исходную культуру по амилоли-тической активности на 60,3 $ и 52,7 $ соответственно.

3. Проведено сравнительное изучение штаммов Bac. diastaticus, обладающих повышенным и пониженным уровнем синтеза & laquo-¿--амилазы. Установленно, что эти штаммы различаются по морфологии гигантских колоний, интенсивности спорообразования, потребностям в факторах роста, ультраструктуре клеток, уровню синтеза ряда гидролитических ферментов. Обнаружена лизогенность исходной культуры, высоко- и низкоактивных штаммов. Показано, что эти штаммы незначительно различаются между собой по содержанию ГЦ пар в ДНК и обладают высоким уровнем гомологии ДНК — ДНК с исходной культурой, что свидетельствует о родстве штаммов.

4. Показано, что наилучшими источниками углерода для биосинтеза с1-амилазы мутантами УФ 1−25. 21 и НЭНГ 6−10.8 являются мальтоза и крахмал. Наилучшими неорганическими источниками азота — аммоний хлористый и аммоний азотнокислый. Из органических источников азота лучшими были пептон и аминокислоты: метионин, орнитин, аспа-рагиновая кислота, фенилаланин. Витамины: тиамин, ПАБК и биотин, в которых нуждаются активные штаммы как в факторах роста, оказывают положительное влияние на биосинтез оС-амилазы. Фермент синтезиру

— 170 ется активными штаммами в ранней экспоненциальной стадии роста и достигает максимума к началу стационарной фазы. Дифференциальная скорость синтеза сС-амилазы у мутантов УФ 1−25. 21 и НЭНГ 6−10.8 в среднем в четыре раза выше, чем у родительского штамма 13. Синтез об-амилазы находится под контролем индукции и катаболитной репрессии.

5. Оптимизация сред методом математического планирования эксперимента позволила увеличить амилолитическую активность у штаммов УФ 1−25. 21 и НЭНГ 6−10.8 в 2,5 — 3 раза по сравнению с исходной культурой. Получены положительные результаты при проведении полупроизводственных испытаний штамма НЭНГ 6−10. 8, акт об этом прилагается. Показано, что длительное хранение штаммов вас. diastaticus без изменения физиологических особенностей возможно методом периодических пересевов культур или в лиофильно высушенном состоянии.

— 171

ПоказатьСвернуть

Содержание

ВВЕДШИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. ТЕРМОФМИЯ И ОСОБЕННОСТИ ТЕРМОФИЛЬНЫХ.

СП0Р00БРАЗШЦИХ БАКТЕРИЙ.

1.1. Систематическое положение термофильных спорооб-разующих бактерий.

1.2. Структурная организация и макромолекулы термофильных споро образующих бактерий.

1.3. Физиологические особенности термофильных споро-образующих бактерий.

1.4. Биосинтез??-амилазы у термофильных спорообразую-щих бактерий.

1.5. Фаги термофильных спорообразугащих бактерий.

Глава П. СЕЛЕКЦИЯ МИШОТГАНИШОВ-ПРОДВДЖОВ БИОЛОГИЧЕСКИ

АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ.

2.1. Естественная изменчивость микроорганизмов.

2.2. Изменчивость микроорганизмов, индуцированная мутагенами физической и химической природы.

2.2.1. Морфологические и биохимические изменения, возникающие под действием мутагенных факторов.

2.2.2. Механизм повреждающего действия мутагенных факторов и механизмы восстановления первичных повреждений.

2.2.3. Механизм становления мутаций.

2.3. Ступенчатый отбор продуцентов биологически активных веществ.

2.3.1. Выбор эффективного мутагена и оптимальной дозы.

2.3.2. Экспресс-методы отбора некоторых продуцентов ферментов.

Глава Ш. РЕГУЛЯЦИЯ СИНТЕЗА. И АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ.

ЭКС1ШР№М1ТМЬНАЯ ЧАСТЬ

Глава IУ. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1. Продуцент ot-амилазы и условия его культивирования.

4.2. Методы исследования.

Глава У. СЕЛЕКЦИЯ ТЕРМОФИЛЬНОЙ БАКТЕРИИ BACILLUS

DIASTATICUS, ОБРАЗУЮЩЕЙ (& iquest--АМИЛАЗУ.

5.1. Естественная изменчивость Вас. diastaticus по биосинтезу ^& iquest--амилазы.

5.2. Изменчивость Вас. diastaticus по биосинтезу & iquest-¿--амилазы, индуцированная мутагенными факторами

5.2.1. Изменчивость Вас. diastaticus по биосинтезу об-амилазы, индуцированная УФ-лучами.

5.2.2. Изменчивость Bacillus diastaticus по биосинтезу & iquest-¿--амилазы, индуцированная новоэмбихином.

5.2.3. Изменчивость мутанта Bacillus diastaticus НЭ 2 по амилолитической активности, индуцированная нитрозогуанидином.

5.3. Отбор мутантов Bacillus diastaticus, полученных под действием мутагенов, и изучение их стабильности в пассажах.

Глава УТ. ФИШОЛОГО-ШОШШЕСКНЕ ОСОБЕННОСТИ ПОЛУЧЕННЫХ

ШТАММОВ BACILLUS DIASTATICUS

6.1. Культуральные признаки.

6.1.1. Температурные границы роста.

6.1.2. Потребление углеводов и простых спиртов, рост на некоторых средах.

6.1.3. Генотипическая характеристика.

6.2. Потребности в факторах роста.

6.3. Биохимические особенности полученных штаммов.

6.4. Ультраструктура клеток.

6.5. Лизогенность термофильной бактерии Bacillus diastaticus

Глава УП. БИОСИНТЕЗ & iquest--АМИЛАЗЫ У МУТАНТОВ ТЕРМОФИЛЬНОЙ

БАКТЕРИЙ BACILLUS DIASTATICUS И ЕГО РЕШШВДЯ.

7.1. Влияние источников углерода на биосинтез < �����������������������������

����������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������

��������������������������������������������

�������������������������������

���������������������������������������

��������������������������������������������������

�������������������������������������������������

���������������������

�����������

Список литературы

1. Азизбекян P.P. Изменение наследственности бактерий путем фаговой конверсии. — В сб.: Микробиология, т. 3. Генетика микроорганизмов. Итоги науки и техники, ВИНИТИ АН СССР. М., 1974, с. 191−233.

2. Александров В. Я. моногр. Клетки, макромолекулы и температура, 1975, JI.: Наука. — 329 с.

3. Алешкин Г. И., Скавронская А. Г. Участие плазмид, повышающих и понижающих УФ-резистентность в УФ-индуцированном мутагенезе

4. Е. coli. В сб.: Х1У Медцунар. генетич. конгресс. Москва, 19*?8. Тез докл. 1ч., с. 9, с. 196.

5. Алешкин Г. И., Скавронская А. Г. а) Реверсия мутаторных и УФ-протекторных свойств плазмиды pGW 12, производной плазшды рКМ 101. В сб.: Структура и функции плазмид. Тез. докл. ГЛ., 1980, с. II-12.

6. Алешкин Г. И., Скавронская А. Г. б) УФ индуцированный мутагенез у терморезистентных ревертантов dna, А — штамма Escherichia coli, несущих плазмиду рКМ. — В сб.: Структура и функции плазмид. Тез. докл. М., 1980, с. 13−14.

7. Алешкин Г. И., Скавронская П. Г. Интегративная супрессия dna, А мутации е. coli плазмидами, влияющими на бактериальный мутагенез. -Молекул, генетика, микробиол. и вирусол., 1983, В 3, с. 3−9.

8. Алиханян С. И. кн. Селекция промышленных микроорганизмов. М.: Наука, 1968, с. 3−10, 174−205.

9. Алиханян С. И. Об основных принципах селекции микроорганизмов. В сб.: Генетические основы селекции микроорганизмов. — М.: Наука, 1969, с. 5−19.

10. Алиханян С. И., Ермакова Л. М., Ерохина Л. И. а) Получение- 172 мутантов Bacillus subtilis A-50 под действием нитрозогуанидина и JCR -191. Генетика, 1975, т. II, № 5, с. 90−95.

11. Алиханян С. И., Дебабов Б. Г., Крылов В. Н., Степанов А. И. б) Эндосимбиоз: его значение в эволюции и генетическом обмене у микроорганизмов. Генетика, 1975, т. II, № 11, с. I4I-I5I.

12. Андреев O.A., Кабоев O.K., Томилин Н. Б. Активность ферментов, узнающих тепловые повреждения ДНК (апуриновая эндонуклеаза и урацил-ДНК-гликозилаза) у психро-, мезо-, и термофильных бактерий. Биохимия, 1983, т. 48, в 3, с. 363−368.

13. Ашмарин И. П., Воробьев A.A. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962, с. 7−103.

14. Балицкая P.M., Казаринова Л. А. Синтез инозина мутантами Bacillus subtilis и их развитие на синтетических средах. При-кладн. биох. и микробиол., 1975, т. II, в 3, с. 397−405.

15. Бартошевич Ю. Э., Домрачева А. Г., Паничкина Т. Б. Мутагенное действие УФ-лучей и п-нитрозометилбиурета при селекции продуцента цефалоспорина С. В сб.: Применение химических мутагенов в защите среды от загрязнения в с. -х. практике. М., 1981, с. 69−71.

16. Бахматова И. В., Глемжа A.A., }1& pound-арикова Г. Г. 0 связи между морфологической изменчивостью Bacillus subtilis и биосинтезом гидролитических ферментов. Прикладн. биох. и микробиол., 1981, т. 17, в 3, с. 415−421.

17. Безленкин В. Г., Малиновский Ю. Ю., Король Б. А. Роль ДНК-мембранных взаимодействий в репарации повреждений ДНК у бактерий. В сб.: Повреждения и репарация — ДНК. Пущино, 1980, с. 3−16.- 173

18. Белякова Л. А., Лаврова JI.H., Кудрявцев Б. И. Хранение культур грибов. В сб.: Методы хранения коллекционных культурмикроорганизмов. М.: Наука, 1967, с. 7−54.

19. Бендецюш K.M., Яровенко В. Л., Павлова Е. С. Методы определения амилолитических активностей препаратов, применяемых в спиртовом производстве. ЦНИИ Пищепром. М., 1976, с. 5−36.

20. Бечина Е. М., Логинова Л. Г., Гернет Н. В. Отбор продуцентов амилолитических ферментов среди термофильных микроорганизмов. Прикладн. биох. и микробиол., 1982, т. 18, в 5, с. 640−647.

21. Билай Т. Н. Физиологические пути регуляции биосинтеза внеклеточных гидролаз термофильных грибов. В сб.: Регуляция микроб, метаболизма факторами внешней среды. Тез. докл. ФЕМО. Пущино, 1983, с. 147.

22. Бирюзова В. И. Монограф. Мембранные структуры микроорганизмов. М.: Наука, 1973, 136 с.

23. Близник K.M., Корогодин В. И. б) Закономерности формирования радиорас у дрожжевых организмов. Сообщение 5. Оценка вклада дыхательных мутантов в лучевое расообразование. Радиобиология, 1974, т. 14, в 3, с. 369−373.

24. Бреслер С. Е. 0 решенных и нерешенных проблемах мутагенеза и репарации. В сб.: Повреждение и репарация ДНК. Пущино, 1980, с. 16−25.

25. Бреслер С. Е. Рекомбинация у бактерш. Горячие точки и инициирующие ферменты. В кн.: Молекулярные основы генетических процессов. М.: Наука, 1981, с. 87−94.- 174

26. Бреслер С. Е. Эволюция и транспозоны. Генетика, 1983, т. 19, JS 2, с. I8I-I89.

27. Буяло О. Д., Головачева Р. С., Логинова Л. Г., Харатьян Е. Ф. Некоторые свойства цитоплаз матических мембран термофильных бактерий. Микробиология, 1973, т. 42, в 2, с. 280−285.

28. Буянова Н. И., Щипкова В. П., Губарь Е. В., Пехов А. П. Идентификация и изучение плазмид, участвующих в контроле патогенных свойств Е. coli, Б сб.: Структура и функции плазмид. Тез. докл. М., 1980, с. 45−47.

29. Выборных С. Н., Егоров Н. С. Изучение препарата протеоли-тических ферментов термофильного актиномицета Actinomyces therrao-vulgaris штамм Т-54. Прикладн. биох. и гшкробиол., 1975, т. 9, № 6, с. 829−833.

30. Габрилович И. 1/1. Основы бактериофагии. Шнек: Вышэйшая школа, 1973, с. 5−196.

31. Галанина Л. А., Бехтерева М. Н., Краинова О. А. 0 варианте Bacillus anthracoides, Микробиология, 1979, т. 48, в I, с. 161−164.

32. Гарина К. П. Использование физических и химических факторов для получения мутаций у продуцента флоримицина. Труды Моск. общ-ва испытателей природы, 1966, т. 22, с. 204−209.

33. Гендина С. Б. Использование УФ-лучей и этиленимина в селекции Aspergillus awamori, продуцирующего амшголитические ферменты. Труды Моск. общ-ва испытат. природа, 1966, т. 22, с. 235−242.

34. Гендина С. Б. Изменчивость активности цротеолитических ферментов у Aspergillus terricola, вызванная действием мутагенных факторов. Микробиология, 1971, т. 40, в 1, с. 88~92.

35. Гендина С. Б., Емцева Т. Е. Селекция Bacillus mesentericus ПБ продуцента цротеолитических ферментов. — Труды ВНИИ Синтез белок, 1972, в I, ферментн. отдел., с. 15−26.- 175

36. Гендина С. Б., Логинова Л. Г., Бурденко Л. Г., Егорова Л. А. а^ Мутанты термотолерантного1риба Asp. terreus продуценты цел-люлолитических ферментов. — Микробиология, 1974, т. 54, в 4, с. 701−705.

37. Гендина С. Б., Емцева Т. В. б) Мутации повышенной ферментативной активности у микроорганизмов, полученные с помощью физических и химических мутагенов. В сб.: Успехи химического мутагенеза в селекции. М.: Наука, 1974, с. 145−153.

38. Говард-Фландерс'П., Кассумо Е. ', Росс П. Биохимические аспекты Ree А*~зависимой генетической рекомбинации и рекомбинацион-ной репарации у Е. coli (). В сб.: Молекулярные основы генетических процессов. М.: Наука, 1981, с. 148−162.

39. Головачева P.C., Орешкин А. Е. Окисление фенола некоторыми штаммами Bacillus stearothermophilus. Микробиология, 1975, т. 44, в 3, с. 470−476.

40. Головлев Е. Л. Влияние лимитирования роста на метаболизм микроорганизмов. В сб.: Лимитирование и ингибирование микробиологических процессов. Пущино, 1980, с. 22−34.

41. Голубцова В. М., Щербакова Е. Я., Смирнов В. А. Селекция Aspergillus niger продуцента лимонной кислоты под влиянием-лучей и характеристика активных вариантов. Прикл. биох. и микро-биол., 1973, т. 9, в 4, с. 569−574.

42. Гольдфарб Д. М., Чернин Л. С. Плазмидно-хромосомные взаимодействия у Enterobacteriaceae. В сб.: Молекулярные основы генетических процессов. М.: Наука, 1981, с. 247−256.

43. Грамотина Л. И., Сучков Ю. Г., Розанова Г. Н. Продукция пес-тицинов на синтетических средах. Антибиотики, 1982, т. 27, № 8, с. 588−592.

44. Государственные стандарты СССР. ГОСТ 202 644–74- 20 263−74. Изд. Госкомстандартов Сов. Мин. СССР. М., 1974.- 176

45. Грачева И. М., Гернет М. В., Кузина В. М., Саловарова В. П. Влияние посевного материала на биосинтез целлюлолитических ферментов. Фермент, и спиртов, пром-ть, 1982, ^ 8, с. 31−33.

46. Гребешова Р. Н., Тулькес С. Г. Селекция Aspergillus usamii и использование различных мутагенных факторов. Труды Московского общ-ва испытателей природы, 1966, т. 22, с. 243−248.

47. Гужова Э. П., Логинова Л. Г. Термофильные бактерии, образующие активную амилазу. Микробиология, 1966, т. 35, в 3, с. 427−432.

48. Данилевич В. Н., Степаншин Ю. Т., Троицкий А. В., Федосеева В. Б. Новый класс мутаций плазмиды RP4, индуцирующих мукоидный характер роста клеток Escherichia coli K-I2. Генетика, 1982, т. 18, № 6, с. 896−905.

49. Даниленко И. И., Хохлов П. С., Соколова Г. Д. Роль липидов в чувствительности и изменчивости клеток штамма Candida tropicalis Д-2 при действии и-метил- и-нитро- яннитрозогуанидина. Изв. АН СССР, 1982, Б, № 5, с. 94−98.

50. Данилова М. В., Надирова И. М., Кудрявцев В. И. Лиофилизация бактерий. В сб.: Методы хранения коллекционных культур микроорганизмов. -М.: Наука, 1967, с. II9-I35.

51. Дараселия Г. Я. Изменчивость пигментообразования у Mycobacterium rubrum под действием химических мутагенов. Микробиология, 1982, т. 51, № 6, с. 968−972.

52. Дебабов В. Г. Современные селекционно-генетические методы получения промышленных микроорганизмов. Ж. Всес. хим. о-ва, 1982, т. 27, № 6, с. 630−634.

53. Дебабов В. Г. Возможные пути использования техники генной инженерии в микробиологической промышленности. Успехи микробиологии (Москва), 1983, № 18, с. 76−92.

54. Двадцатова Б. А. Селекция и физиология питания Aspergillusoryzae. Канд. дисс. M., 1961.

55. Дертингер Г., Юнг X. Кн. Молекулярная радиобиология. М.: Атомиздат, 1973, с. 215−221.

56. Дехтяренко Т. Д., Стефанишин Е. Е., Полищук Л. В., Ефременко-ва О.В., Анисова Л. Н., Красильникова О. Л. Дохлов А.С., Мацелюх Б. П. Обнаружение плазмидной ДНК у разных штаммов streptomyces griseus.- Микробиол. ж., 1982, т. 44, № 4, с. 3−8.

57. Дубинин Н. П., Шевченко В. А. а) Мутационный процесс в облучаемых природных популяциях.- В сб.: Молекулярные механизмы генетических процессов. -М.: Наука, 1976, с. 265−290.

58. Дубинин Н. П. б) Продленный мутагенез и проблемы репарации. -В сб.: Молекулярные механизмы генетических процессов. Мутагенез и репарации. М.: Наука, 1976, с. 3−20.

59. Егоров А. А., Бартошевич Ю. Э., Лебедь Э. С. Особенности метаболизма Penicillium chrysogenum в связи с вирусной инфекцией. -В сб.: Вирусы микроорганизмов. Тез. докл. Пущино, 1981, с. II5-II6.

60. Егорова Л. А. Развитие облигатно-термофильных бактерий при 55−70°. Микробиология, 1965, т. 34, в 6, с. 988−993.

61. Егорова Л. А., Цаплина И.А.' Влияние состава среды на рост и активность нейтральной протеиназы термофильной бактерии Baciiius brevis 224. -Микробиологическая промышленность, 1970,№ 2, с. 3−7.

62. Елинов Н. П., Пронина М. И., Заикина Н. А., Азизов Р. Г. Р1з-менчивость Streptomyces narbonensis, образующегор-1,3/1,4 глю-канглюкангидролазу, вызванная УФ-^лучами и митомицином С. Микробиол., 1982, т. 51, в 2, с. 318−323.

63. Емцева Т. В., Гендина С. Б., Коновалов С. А. а) Селекция Bacillus mesentericus П.Б. с помощью нитрозоалкиламинов. В сб.: Химические супермутагены в селекции. М.: Наука, 1975, с. 59−64.

64. Емцева Т. А. б) Влияние источников азота, углерода и добавок витаминов группы & quot-В"- на биосинтез щелочной протеазы различ- 178 ными штаммами Bacillus mesentericus и Bacillus subtilis. Приклады. биохим. и микробиол., 1975, т. II, № 3, с. 391−397.

65. Жазыков И. Ж. Взаимоотношение между Pseudomonas aeruginosa штамм PAT 2 и вирулентным фагом РК 30. Тр. ин-та микробиол. и вирусол. А Н Каз. ССР, 1982, т. 27, с. "- 246−253.

66. Жакоб Ф., Моно’К. Кн. Регуляторные механизмы клетки. М.: Мир, 1964, с. 278−307.

67. Зйестяников В. Д. Репарация ДНК и ее биологическое значение. Л.: Наука, 1979, с. 9-II6.

68. Завильгельский Г. Б. Разделение в пространстве первичного УФ-повреждения и мутационного сайта в ДНК бактериофага ФХ-174. -Докл. АН СССР, 1982, т. 264, & 3, с. 718−721.

69. Закиров М. З. Протеаза и линаза термофильных грибов. -В сб.: Термофильные микроорганизмы в природе и практике народи. х-ва. Тез. докл. М., 1983, с. 39−40.

70. Захаров И. А., Квитко К. В. Генетика микроорганизмов (введение в генетический анализ). Л.: ЛГУ, 1967, с. 3−231.

71. Захарова О. Д., Беляева Л. П., Агре’Н.С. а) Образование неактивных вариантов в ходе развития Streptomyces rimosus, продуцента окситетрациклина. В сб.: Проблемы изыскания и биотехнол. нов. антибиотиков. Всес. конф. Тез. докл. Пущино, 1982, с. 22.

72. Захарова Г. М., Бартошевич Ю. Э. б) Биохимические мутанты у продуцента антибиотика фузидина. В сб.: Проблемы изыскания и биотехнол. нов. антибиотиков. Тез. докл. Пущино, 1982, с. II.

73. Захарова Г. М., Бартошевич Э. Ю., Лебедь Э. С., Домрачева

74. А.Г., Паничкина Т. Б., Загустина Н. А. Мутагенез и метаболизм на модели продуцентов биологически активных веществ. В сб.: Мицелиаль-ные грибы (физиология, биохимия, биотехнология). Тез. докл. Пущино, 1983, с. 73−74.

75. Иванова B.B., Ерохина Л. И. Получение и характеристика мутантов Aspergillus niger и Aspergillus awamori с измененным уровнем синтеза глюкоамилазы. В сб.: Мицелиальные грибы (физиология, биохимия, биотехнология). Тез. докл. Пущине, 1983, с. 75−76.

76. Имшенецкий A.A., Солнцева Л. И., Кузюрина Л. А. Термофильные амилолитические бактерии. Микробиология, 1942, т. II, $ 1−2, 29−45.

77. Имшенецкий A.A., Солнцева Л. И., Броцкая С. З. Препарат амилазы термофильных бактерий (супербиолазы). Текстильная промышл. 1943, № 11−12, с. 11−12.

78. Имшенецкий A.A. а) Моногр.: Микробиологические процессы при высоких температурах. М. -Л.: Изд-во АН СССР, 1944, с. 34−150.

79. Имшенецкий A.A., Солнцева Л. И. б) Изучение препаратов амилазы из культур термофильных бактерий. Микробиология, 1944, т. 13, в I, с. 54−59.

80. Имшенецкий' A.A., Солнцева Л. И., Куранова Н. Ф. б) Экспериментальная изменчивость Aspergillus niger. П. Образование лимонной- 180 кислоты вариантами Asp. niger, полученными под действием УФ-лучей. Микробиология, i960, т. 29, в 3, с. 351−357.

81. Имшенецкий A.A. Теоретические основы селекции полезных форм микроорганизмов. Труды Ин-та Микробиологии А Н СССР, 1961, т. 10, с. 5−24.

82. Имшенецкий A.A., Касаткина И. Д., Авервух S.K., Тушщына P.C., Иванова A.A., Шерстюк И. А. Получение протеолитических ферментов Bacillus mesentericus и их применение для регенерации триацетатной кинопленки. Микробиология, 1964, т. 33, в 4, с. 719−726.

83. Имшенецкий A.A., Кузюрина Л. А. Изменчивость Aspergillus niger, вызванная комбинированным действием ЭИ и УФ-лучей. -Микробиология, 1966, т. 35, в 5, с. 812−816.

84. Имшенецкий A.A. ,' Касаткина И. Д., Желтова Е. Т. 0 питательных средах, повышающих синтез протеаз у Aspergillus terricola и его мутантов. Микробиология, 1971, т. 40, в I, 18−21.

85. Имшенецкий A.A., Лысенко С. В., Удовенко В. Ф., Бутенко А. М. Длительное воздействие глубокого вакуума на микроорганизмы. -Микробиология, 1973, т. 42, в 5, с. 836−838.

86. Имшенецкий A.A. Селекция микроорганизмов и научно-технический прогресс. -Успехи современной генетики, 1974, в 5, с. 60−73.

87. Имшенецкий A.A., Касаткина И. Д., Броцкая С. З., Желтова Е. Т. 0 селекции активных рас Aspergillus terricola продуцента террилитина. — В сб.: Ферменты медицинского назначения. — Л.: Медицина, 1975, с. 16−25.

88. Имшенецкий A.A., Солнцева Л. И., Касаткина И. Д., Желтова Е. Т., Афанасьева Л. Н. Прямой отбор вариантов Aspergillus terricola с различной токсичностью на культуре фибробластов. Микробиология, 1977, т. 46, в 5, с. 828−834.

89. Имшенецкий A.A., Ширшова Г. А., Никитин Л. Е. Естественнаяизменчивость Actinomyces lavendulae продуцента холестеринокси-дазы. — Микробиология, 1982, т. 51, в 3, с. 487−489.

90. Калинина Л. М., Минсентова С.Р." Индукция мутагенной репарации в клетках Escherichia coli при действии бихромата калия. -Докл. АН СССР, 1983, т. 268, te 3, с. 720−722.

91. Калунянц К. А. Ферментные комплексы. Ж. Всес. хим. об-ва 1982, т. 27, № 6, с. 673−675.

92. Каплан A.M., Яненко И. Н. Транспозиция генов Escherichia coli, опосредствованная бактериофагом Ми на многокопийную плазмиду RGK. В сб.: Вирусы микроорганизмов. Тез. докл. Пущино, 1981, с. II.

93. Карлина Н. Н. Выживаемость и характеристика роста лиофили-зированных водородных бактерий и перспектива их использования в производстве кормовых белковых препаратов. В сб.: Микробные препараты и их применение в с/х. Кишинев, 1981, с. 133−150.

94. Карпухина С. Я. Исследование особенностей. -амилазы термофильных и мезофильных бактерий. Дисс. МТИПП. М., 1969.

95. Касаткина И. Д. К физиологической характеристике гладких и складчатых форм Penicillium chrysogenum. Микробиология, 1952, т. 21, в 5, с. 548−554.

96. Касаткина И. Д. Об изменчивости Bacillus mesentericus. Микробиология, 1956, т. 25, в 2, с. 156−163.

97. Касаткина И. Д., ЗИелтова Е. Т. Селекция аконидиалышх рас Aspergillus flavus, образующих протеолитические ферменты. Изв. АН СССР. Сер. Биологическая, 1967, В I, с. 128−133.

98. Касаткина И. Д. 0 методах отбора микроорганизмов продуцентов гидролаз на плотных средах. — В сб.: Биосинтез ферментов микроорганизмов и применение их в нар. х-ве. Тез. докл. М., 1968, с. 10-Ц.- 182

99. Касаткина И. Д., Имшенецкий А. А., Броцкая С. З., Желто-ва Е. Т. Мутанты Aspergillus terricola, образующие протеазы с фиб-ринолитическим действием. Микробиология, 1969, т. 38, в 5, с. 766−771.

100. Кислухина О. В. а) Получение очищенных препаратов амилазы Bacillus diastaticus. Прикл. биохим. и микробиол., 1966, т. 2, в I, с. 58−62.

101. Кислухина О. В. б) Сравнительная характеристика некоторых бактериальных амилаз. Прикладн. биох. и микробиол., 1966, т. 2, в 5, 544−549.

102. Кислухина О. В. Получение очищенных препаратов амилазы из глубинной культуры Bacillus diastaticus. Прикл. биох. и микробиол., 1968, т. 4, в 2, с. I88-I9I.

103. Кислухина О. В. Строениё бактериальной амилазы и ее устойчивость к внешним воздействиям. Микробиол. промншл., 1971, в 3, с. 3−9. 108." Клаус Р., Хейс У. Сборник методик по генетике микроорганизмов. М.: Медицина, 1970, с. 7−244.

104. Козлов Ю. И., Мошенцева В. Н., Шашко С. В., Янковский Н. К., Дебабов В. Г. Исследование нестабильности штаммов Escherichia coli, содержащих гибридные плазмиды с ферментами треонинового оперона. -Генетика, 1982, т. 18, № 10, с. I6I3-I6I9.

105. Колесник Л. В. Локализация бензилпеницилина и морфологическая характеристика вирусов Penicillium chrysogenum. В сб.: Вирусы микроорганизмов. Тез. докл. Пущино, 1981, с. 71−72.

106. Коломыцкая Т. Ф., Губанова Л. Л., Индуцирование термофильных мутантов дрожжей Saocharorayces cerevisiae. В сб.: Микробиология — народному хозяйству. Новосибирск: Наука, IS74, в 27, с. 63−70.- 183

107. Корогодин В. И., Близник К. М., Капульцевич Ю. Г. Закономерности формирования радиорас у дрожжевых организмов. Сообщ. 7. Оценка частоты митотической рекомбинации в клонах, вырастающих из облученных клеток. Радиобиология, 1974, т. 14, в 5, с. 681−685.

108. Корогодина Ю. В., Корогодин В. И. Закономерности формирования радиорас у дрожжевых организмов. Сообщ. 6. Оценка мутабельно-сти клонов, вырастающих из облученных клеток. Радиобиология, 1974, т. 14, в 4, с. 494−500.

109. Кривисский А. С. Вопросы генетики микроорганизмов в трудах академика Г. А. Надсона и его школы. Генетика, 1975, т. II, $ 10, с. 173−175.

110. Крылов В. Н. Исследование Mu-подобных бактериофагов, специфичных для Pseudomonas aeruginosa: результаты и перспективы. -В сб.: Бактериофаги. Пущино, 1982, с. 63−76.

111. Кузнецов В. Д. а) Изучение, изменчивости актиномицетов -продуцёнтов антибиотиков и других биологически активных веществ. Антибиотики, 1972, т. 17, № 7, с. 669−671.

112. Кузнецов В. Д., Янгулова И. В. Изменчивость Actinomyces antibioticus 961 продуцента олеандомицина. — Антибиотики, 1972, т. 17, № 4, с. 291−295.

113. Кузнецов В. Д., Филиппова С. Н. а) Изменчивость Actinomyces oiivobrunnens продуцента актиномицина. — Антибиотики, 1974, т. 19, В 3, с. 201−205.

114. Кузнецов В. Д., Бушуева О. А., Брызгалова Л. С. б) Изменчивость Actinomyces reseoius продуцента линкомицина. — Антибиотики, 1974, т. 19, Я 4, с. 3II-3I5.

115. Кузю< ��������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������

�����������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

���������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������

��������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������

������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

�����������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������

�������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������������������������������������������������������������������������������

Заполнить форму текущей работой