Зависимость уровня тиреотропного и тиреоидных гормонов от заболеваний щитовидной железы

Тип работы:
Дипломная
Предмет:
Биология


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

«Новгородский государственный университет имени Ярослава Мудрого»

Институт сельского хозяйства и природных ресурсов

Кафедра биологии и биологической химии

Выпускная квалификационная работа

ЗАВИСИМОСТЬ УРОВНЯ ТИРЕОТРОПНОГО И ТИРЕОИДНЫХ ГОРМОНОВ ОТ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЩИТОВИДНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Руководитель: Ю.В. Марьяновская

Студент гр. Саушова Д. В.

«8» июня 2011 г.

Содержание

Введение

1. Щитовидная железа

2. Гормоны щитовидной железы

2.1 Строение тиреоидных гормонов

2.2 Синтез тиреоидных гормонов

2.2.1 Синтез йодида

2.2.2 Концентрирование йодида

2.2.3 Окисление йодида

2.2.4 Йодирование тирозина

2.2.5 Гидролиз тиреоглобулина

2.3 Запасание и секреция тиреоидных гормонов

2.4 Транспорт гормонов щитовидной железы

2.5 Влияние веществ на синтез тиреоидных гормонов

2.5.1 Йод

2.5.2 Тиоцианты

2.5.3 Хлорорганические соединения

2.5.4 Селен

2.5.5 Кобальт

2.5.6 Медь

2.5.7 Цинк

2.5.8 Железо

2.5.9 Марганец

2.5. 10 Токсические микроэлементы

2.6 Регуляция синтеза и высвобождения гормонов щитовидной железы

3. Тиреотропный гормон

3.1 Строение тиреотропного гормона

3.2 Синтез тиреотропного гормона

3.3 Функции тиреотропного гормона в организме

4. Механизм действия тиреоидных гормонов

4.1 Эффекты недостаточности тиреоидных гормонов

4.2 Эффекты избытка тиреоидных гормонов

5. Заболевания щитовидной железы

5.1 Гипотиреоз

5.2 Гипертиреоз

5.3 Профилактика заболеваний щитовидной железы

6. Методы определения

6.1 Определение уровней Т3, Т4 и ТТГ

7. Анализ результатов

Выводы

Заключение

Библиографический список использованных источников

Введение

Человек — неотъемлемая часть живой природы. Химический состав его организма, как и всех других форм жизни, формируется на базе элементов, представленных на нашей планете. Изучение биологического значения химических элементов земной коры было начато более ста лет назад В. И. Вернадским, который впервые отметил, что гетерохимические процессы и эволюция элементарного химического состава населяющих нашу планету живых организмов являются сопряженными процессами [3].

Щитовидная железа — один из органов эндокринной системы. Она выделяет в кровоток несколько гормонов. К ним относятся: тироксин (Т4), трийодтиронин (Т3) и кальцитонин.

Для образования тироксина (Т4) и трийодтиронина (Т3) клетки щитовидной железы (тиреоциты) захватывают из кровотока молекулы йода, и посредством специфических ферментных систем включают йод в состав молекулы гормона. Поэтому достаточное поступление йода в организм является очень важным. В случае нехватки йода возможно нарушение образования гормонов щитовидной железы. Кроме того, возможно врожденное нарушение синтеза гормонов щитовидной железы по причине дефекта ферментных систем, участвующих в захвате йода и образовании гормонов. Этот дефект также ведет к нехватке этих жизненно важных гормонов в организме [15].

Известно, что более половины территорий Российской Федерации относятся к йоддефицитным регионам (по содержанию йода в воде и почве), с различной степенью выраженности йодного обеспечения [6]. Новгородская область является одним из таких районам.

Важность проблемы не вызывает сомнений. Интерес врачей и исследователей к заболеваниям щитовидной железы определяется: во — первых, высокой их распространенностью среди населения, во — вторых, значимость проблемы обусловлена широким спектром тиреоидной патологии. На сегодняшний день описано несколько десятков заболеваний щитовидной железы. Следует также указать, что проблемы, связанные с нарушением работы щитовидной железы, могут встречаться во всех возрастных группах. Более того, большинство заболеваний оказывает существенное отрицательное влияние на здоровье человека.

Такое широкое и значимое влияние заболеваний щитовидной железы на организм человека обусловлено важной ролью гормонов, выделяемых щитовидной железой. Изменения функционального состояния щитовидной железы могут сказываться на сердечно — сосудистой, центральной нервной и костно-мышечной системе, репродуктивной функции, желудочно-кишечном тракте и т. д. В детском возрасте нарушения работы щитовидной железы приводят к снижению интеллектуального развития, задержке физического развития или, напротив, способствуют ускорению роста, провоцируют сложности полового созревания.

Развитие некоторых заболеваний щитовидной железы достаточно легко предупредить. К данной группе тиреоидной патологии относятся, прежде всего, заболевания щитовидной железы, в основе которых лежит дефицит йода: эндемический зоб, узловые образования щитовидной железы. Поэтому широкое распространение в обществе знаний о методах профилактики заболеваний щитовидной железы должно приводить к снижению частоты этих заболеваний.

Огромный интерес для понимания особенностей возникновения, диагностики и лечения заболеваний щитовидной железы представляют знания о механизме регуляции работы щитовидной железы. Функционирование щитовидной железы находится под контролем другого органа эндокринной системы — гипофиза. В его переднем отделе, так называемом аденогипофизе, секретируется тиреотропный гормон. Тиреотропный гормон, или сокращенно ТТГ (такую аббревиатуру вы можете видеть в бланке анализа из гормональной лаборатории) вызывает усиление выработки и секреции в кровоток гормонов щитовидной железы.

В целом, процесс регуляции работы щитовидной железы выглядит следующим образом: снижение выработки и содержания тироксина (Т4) в крови улавливается гипоталамусом и гипофизом, и ведет к повышению выработки релизинг-фактора гипоталамуса и далее ТТГ гипофизом. В свою очередь, повышение уровня ТТГ активирует работу щитовидной железы — в итоге количество тироксина в крови нормализуется. Противоположный процесс происходит при повышенном содержании тиреоидных гормонов в крови и также ведет к нормализации уровня этих гормонов в организме.

Таким образом, ТТГ является главным регулятором работы щитовидной железы. Важно отметить, что гипофиз очень чутко реагирует на любые, даже незначительные, колебания уровня тиреоидных гормонов. Следовательно, анализ содержания ТТГ позволяет, в большинстве случаев, предельно четко определять функцию щитовидной железы. Исследование уровня ТТГ также позволяет следить за ходом лечения заболевания щитовидной железы [11].

Нарушения тиреоидной физиологии могут включать изменения роста щитовидной железы либо диффузного, либо узлового характера, тогда как продукция тиреоидных гормонов остается нормальной [16]. Таким образом, для иллюстрации эффектов тиреоидных гормонов и патофизических механизмов секреции тиреоидных гормонов будут рассмотрены только гипотиреоз и гипертиреоз.

Целью данной выпускной квалификационной работы является подтверждение зависимости уровня тиреотропного и тиреоидных гормонов от заболеваний щитовидной железы.

Прежде чем начать исследования, была изучена теоретическая составляющая данного вопроса. Материал в большей степени рассматривался со стороны биохимических процессов, нежели со стороны медицины.

Для достижения цели, нами были поставлены следующие задачи:

1. Подтвердить на практике зависимость уровня тиреотропного и тиреоидных гормонов в плазме крови от заболеваний щитовидной железы;

2. Изучить уровень заболеваемости гипотиреозом и гипертиреозом;

3. Выявить распространенность заболеваний щитовидной железы в зависимости от возраста. Выделить группы риска.

4. Выявить существует ли зависимость заболеваний щитовидной железы от пола;

5. Подтвердить или опровергнуть теоретический факт о независимости уровня тиреотропного гормона от объема щитовидной железы.

Обработка данных проводилась на базе поликлиники № 4 ЦГКБ. Предметом исследования служил биологический материал, в виде плазмы крови пациентов, используемый в иммуноферментном анализе определения уровня тиреотропного и тиреоидных гормонов.

Первоначально необходимо было изучить и освоить методику определения уровня ТТГ и гормонов щитовидной железы. Затем выполнить статистическую обработку амбулаторных карт пациентов с заболеваниями щитовидной железы — гипотиреоза и гипертиреоза.

Практическая значимость выполнения данной работы состоит в том, что полученные статистические данные могут быть использованы врачами эндокринологами и терапевтами при мониторинге, лечении и профилактике заболеваний.

Благодарим за высококвалифицированную помощь: заведующую клинокобиологической лаборатории Е. К. Ишейскую, врача — лаборанта Н. П. Заботину, врачей эндокринологов: Я. И. Пекину и М. М. Меринову, врача терапевта Л. А. Горчицыну, а так же сотрудников сети библиотек НовГу.

1. Щитовидная железа

Щитовидная железа является самой крупной эндокринной железой человеческого организма, имеющей только внутрисекреторную функцию. Ее масса у взрослого человека в среднем составляет 20 г. Название щитовидной железы происходит от прилежащего щитовидного хряща гортани. Щитовидная железа состоит из двух долей и перешейка, располагающихся на передней поверхности трахеи и по ее бокам (рис. 1)[8].

Рис. 1. Щитовидная железа [8]: 1 — правая доля; 2 — перешеек; 3 — левая доля; 4 — пирамидальная доля;

Щитовидная железа является самой большой железой человеческого организма. Она обладает тремя уникальными свойствами:

1. Щитовидная железа расположена снаружи тела и поэтому доступна для физикального исследования;

2. Для синтеза гормонов щитовидной железе необходим неорганический йод, который поступает извне;

3. Щитовидная железа обладает способностью запасать свои гормоны в тиреоглобулина. При полном выключении функций щитовидной железы этого запаса гормонов достаточно, чтобы поддерживать эутиреоз в течение 10−14 дней.

Вес железы колеблется от 10 до 20 г. Объем железы у женщин не превышает 18 мл, у мужчин 25 мл [5].

Щитовидная железа поглощает 10−20% от общего количества йода, поступившего в организм путём активного его извлечения из плазмы крови, против химического и электрического градиентов [21]. Железа обильно снабжается кровью по верхним и нижним тиреоидным артериям, отходящим соответственно от наружных сонных и подключичных артерий.

Щитовидная железа состоит из клеток разных видов: фолликулярных и парафолликулярных (рис. 2.).

Рис. 2. Строение щитовидной железы [6]

щитовидный железа гормон метаболизм

1 — спавший (неактивный) фолликул; 2 — тироциты (фолликулярные клетки); 3 — парафолликулярные клетки; 4 — коллоид; 5 — активный фолликул.

Парафолликулярных гораздо меньше; они рассеяны между фолликулами и отличаются от основной массы фолликулярных клеток по происхождению, функции и механизмам регуляции, образуя как бы другую железу. Фолликулярные клетки составляют паренхиму железы, при этом формируют в железе многочисленные микроскопические фолликулы, каждый из которых состоит из центральной полости, заполненной коллоидом (главной составляющей которого является белок тиреоглобулин) и окруженной одним слоем кубовидных эпителиальных клеток.

Средний диаметр фолликулов около 50 мкм. При повышении активности щитовидной железы эти клетки приобретают цилиндрическую форму, пролиферируют и вдаются в полость коллоида, которая соответственно уменьшается. При снижении тиреоидной активности происходят обратные изменения: клетки уплощаются, а коллоидная полость увеличивается. Фолликулярные клетки обращены своими вершинами в просвет фолликула (коллоидную полость), а своими основаниями прилежат к базальной мембране капилляров. В цитоплазме фолликулярных клеток обнаруживается множество включений, самыми заметными среди которых являются капли коллоида, достигающие в диаметре 2 мкм. Ядра обычно расположены ближе к основанию клеток. Фолликулы щитовидной железы собранны в конгломераты, окруженные сетью кровеносных сосудов, клетками и волокнами соединительной ткани, плазматическими и тучными клетками. Эти конгломераты образуют различного размера дольки. Под электронным микроскопом на вершине фолликулярных клеток видны содержащие тончайшие канальцы микроворсинки, проникающие в полость фолликула. Именно ворсинки путем пино- или эндоцитоза переносят капли коллоида из полости фолликула в цитоплазму клеток. Помимо, коллоидных капель, в цитоплазме фолликулярных клеток видны электронно-плотные тельца (лизосомы). Часть из них сливается с коллоидными каплями, образуя, так называемые, фаголизосомы. В них происходит протеолиз коллоида с высвобождением тиреоидных гормонов.

Собственно тиреоидными гормонами принято считать лишь продукты секреции фолликулярных клеток — йодированные тиронины: тетрайодтиронин, или тироксин (Т4), и трийодтиронин (Т3). Физиологические эффекты тиреоидных гормонов столь многообразны, что их недостаток или избыток сказывается практически на всех системах органов и процессах жизнедеятельности [6, 8]. У человека снижение биосинтеза гормонов щитовидной железы приводит к задержке физического и психического развития, а так же к нарушению дифференцировки скелета и центральной нервной системы [3].

2. Гормоны щитовидной железы

2.1 Строение тиреоидных гормонов

В основе структуры тиреоидных гормонов лежит тирониновое ядро, которое состоит из двух конденсированных молекул L-тирозина. Химическая природа гормонов фолликулярной части щитовидной железы выяснена в деталях сравнительно давно. Важнейшая структурная характеристика гормонально-активных производных тиронина — наличие в их молекуле 3 или 4 атомов йода. Таковы трийодтиронин (3,5,3`-трийодтиронин, Т3) и тироксин (3,5,3`, 5`-тетрайодтиронин, Т4) — гормоны фолликулярных клеток щитовидной железы позвоночных, осуществляющие регуляцию энергообмена, синтеза белка и развития организма [3].

Рис. 3 Структура гормонов щитовидной железы [2] (слева направо): тиронин; тироксин; трийодтиронин; дийодтиронин.

Кроме того, образуются йодированные предшественники, моно- и дийодтирозины, не обладающие биологической активностью.

По химической структуре тиреоидные гормоны относятся к производным аминокислот, а именно тиронина. По физическому действию являются гормонами — исполнителями, действуя непосредственно на обменные процессы в клетках и тканях — мишенях [6].

Считается установленным, что все йодсодержащие гормоны, отличающиеся друг от друга содержанием йода, являются производными L-тиронина, который синтезируется в организме из аминокислоты L-тирозина.

Последовательность реакций, связанных с синтезом гормонов щитовидной железы, была расшифрована при помощи радиоактивного йода [16, 18]. Было показано, что введенный меченый йод прежде всего обнаруживается в молекуле монойодтирозина, затем — дийодтирозина и только потом — тироксина [2].

В настоящее время еще полностью не изучены ферментные системы, катализирующие промежуточные стадии синтеза этих гормонов, и природа фермента, участвующего в превращении йодидов в свободный йод, необходимый для йодирования 115 остатков тирозина в молекуле тиреоглобулина [16].

2.2 Синтез тиреоидных гормонов

2.2. 1 Синтез йодида

Для нормального синтеза тиреоидных гормонов необходим адекватный захват йода, так как тиреоидные гормоны являются единственными соединениями организма, содержащими йод в своей структуре [21].

Йод, открытый почти 200 лет назад, относится к категории незаменимых для организма человека элементов, являясь облигатным компонентом для синтеза тиреоидных гормонов (ТГ) — тироксина (Т4) и трийодтиронина (Т3). В организм человека йод поступает с пищей, водой и воздухом. Суточная потребность в йоде зависит от возраста (табл. 1).

Таблица.1 Возрастные нормы, потребления йода в сутки [22]

Возрастные периоды

Потребность в йоде, мкг/сут

Дети от 0 до 5

90

От 6 до 12

120

От 12 лет и старше

150

Беременные и женщины, кормящие грудью

200

В регионах, расположенных около моря, содержание йода в воздухе может достигать 50 мкг в 1 м³, в морской рыбе и морепродуктах -- от 40 до 300 мкг на 100 г, меньше в продуктах животного происхождения (от 7 до 20 мкг на 100 г продукта). Наименьшее количество йода содержится в продуктах растительного происхождения. В процессе хранения и тепловой кулинарной обработки содержание йода быстро падает.

Более половины территорий Российской Федерации относятся к йоддефицитным регионам (по содержанию йода в воде и почве) с различной степенью выраженности йодного обеспечения. Кроме природной недостаточности к дефициту йода (ДИ) в организме могут привести следующие состояния:

1) заболевания, приводящие к нарушению всасывания йода в кишечнике (кишечные инфекции и паразитарные заболевания, синдром мальабсорбции, заболевания поджелудочной железы, желчного пузыря и печени, муковисцидоз);

2) генетически детерминированные тиреопатии, инфильтрация щитовидной железы при гистиоцитозах, саркоидозе;

3) повышенная потребность в йоде в подростковом возрасте, в период беременности и лактации;

4) наличие гиповитаминозов, гипо- и дисмикроэлементозов;

5) поступление йода в недоступной для всасывания форме;

6) воздействие медикаментозных препаратов и других факторов окружающей среды химической и физической природы, в том числе и радиационное воздействие [22].

Йодид, удаляемый из сыворотки щитовидной железой, возвращается в циркуляцию в виде йодтиронинов (тиреоидных гормонов), чей йод возвращается в основном во внеклеточную жидкости после периферического дейодирования. Пул йодированных гормонов включает находящиеся в циркулярном русле, а так же тиреоидные гормоны в тканях. Самым большим пулом обладает щитовидная железа, которая содержит 8000 мкг (рис. 4).

Рис. 4. Обмен йода у здорового человека [6].

Пул щитовидной железы характеризуется очень медленным оборотом, приблизительно 1% в сутки. На рисунке изображены нормальные пути метаболизма йода в состоянии равновесия йода. Стрелки указывают суточный переход из одного компартмента в дугой. Цифры в скобках указывают размеры пулов [21].

2.2.2 Концентрирование йодида

Щитовидная железа обладает способностью концентрировать иодид (I-) против высокого электрохимического градиента. Это требующий энергии процесс, связанный с АТФазы Na+/K+ — насосом. Отношение количества йодида в щитовидной железе к йодиду сыворотки отражает активность этого насоса. Она регулируется в первую очередь тиреотропином (ТТГ).

Очень малые количества йодида поступают в щитовидную железу также путем диффузии. Внутриклеточный I-, не включающийся в монойодтирозин и дийодтирозин с помощью этого механизма может и покинуть железу [13].

2.2.3 Окисление йодида

Поступивший в щитовидную железу йод посредством активного транспорта активируется. Этот процесс, необходимый для получения йодорганических соединений, протекает при помощи фермента йодид — пероксидазы и пероксида водорода в качестве окисляющего агента [9]:

2 I + Н2О2 + 2Н+ 2I+ + 2H2O

Тиреопероксидаза представляет собой тетрамерный белок с молекулярной массой 60 кД, требующий перекись водорода в качестве окисляющего агента. Н2О2 образуется НАДФ — зависимым ферментом, сходным с цитохром-с-редуктазой. Ряд соединений тормозит окисление I- и, следовательно, его дальнейшее включение в МИТ и ДИТ. Среди них наибольшее значение имеют соединения группы тиомочевины: тиомочевина, тиоурацил, пропилтиоурацил, метимазол. Эти соединения применяются в качестве антитиреодных препаратов в силу их способности подавлять на данном этапе биосинтез гормонов щитовидной железы [13]. Синтез тиреоидных гормонов в клетках щитовидной железы изображен на рисунке 5. Далее в тексте следует описание этого процесса. Йодид поступает в щитовидную железу благодаря действию насоса и путем пассивной диффузии.

2.2. 4 Йодирование тирозина

Окисленный йод реагирует с тирозильными остатками тиреоглобулина. Тиреоглобулин состоит из двух субъединиц. Он содержит 115 остатков тирозина, каждый из которых представляет собой потенциальный сайт йодирования. Около 70% йодида в тиреоглобулине присутствует в составе неактивных предшественников — монойодтирозина (МИТ) и дийодтирозина (ДИТ), 30% - в йодтиронильных остатках, тироксине и трийодтиронине [8].

Тиреоглобулин синтезируется в базальной части клетки на рибосомах шероховатого эндоплазматического ретикулума, где происходит формирование вторичной и третичной структуры, включая процессы гликозилирования. Из цистерн эндоплазматического ретикулума тиреоглобулин поступает в аппарат Гольджи, включается в состав секреторных гранул и секретируется во внеклеточный коллоид, где происходит йодирование остатков тирозина и образование йодтиронинов.

Секреция тиреоглобулина в просвет фолликула происходит путем экзоцитоза. Йодирование тиреоглобулина и образование йодтиронинов осуществляется в несколько этапов.

Как тироксин (Т4), так и трийодтиронин (Т3) образуются на тиреоглобулине за счет реакции присоединения, включающей два дийодтирозиновых или монойодтирозиновый и дийодтирозиновый остатки соответственно. Эта реакция присоединения осуществляется отдельно от йодирования и также катализируется тиреопероксидазой.

Рис. 5. Схема метаболизма йодида в тиреоидном фолликуле [21].

Для эффективного присоединения, как полагают, важна специфическая третичная структура тиреоглобулина, так как нарушение его нативной структуры или замена тиреоглобулина другими белками ведет к очень низким уровням образования Т4 [21].

2.2. 5 Гидролиз тиреоглобулина

Тиреоглобулин представляет сбой форму хранения Т4 и Т3 в коллоиде и при нормальной функции щитовидной железы обеспечивает поступление этих гормонов в кровь на протяжении нескольких недель. После стимуляции щитовидной железы тиреотропином (или цAMФ) уже за несколько минут заметно увеличится число микроворсинок на апикальной мембране. Происходит захват тиреоглобулина, а последующий пиноцитоз обеспечивает его перенос обратно в фолликулярную клетку. Затем он вновь поступает в клетку и движется в направлении от апикальной к базальной ее части, гидролизируясь при этом с образованием активных гормонов Т3 и Т4. Все описанные процессы усиливаются тиреотропином: этот гормон (или цAMФ) стимулирует и транскрипцию тиреоглобулинового гена [8].

Фагосомы сливаются с лизосомами с образованием фаголизосом, в которых различные кислые протеазы и пептидазы гидролизуют тиреоглобулин на аминокислоты, включая йодтиронины. Т4 и Т3 высвобождаются в кровь из базальной части клетки, вероятно, путем облегченной диффузии. Отношение Т43 в крови ниже, чем в тиреоглобулине, откуда следует, что в щитовидной железе должно иметь место избирательное дейодирование Т4. Ежедневная секреция гормонального йода щитовидной железой составляет 50 мкг. Большая часть йодида в тиреоглобулине не входит в состав йодтиронинов: около 70% его приходится на неактивные соединения МИТ и ДИТ. Эти аминокислоты высвобождаются при гидролизе тиреоглобулина, а йодид отщепляется от них присутствующей в системе НАД PH-зависимой дейодиназой, которая обнаруживается также в почках и печени. Йодид, выделяющийся из МИТ и ДИТ, образует внутри щитовидной железы существенный пул, отличный от I-, поступающего из крови [8]. На каждой молекуле тиреоглобулина образуется только 3−4 молекулы Т4, и для его образования предпочтительны только определенные тирозины. Щитовидная железа в норме продуцирует больше Т4, чем Т3, при условии если захват йода адекватный, соотношение Т4 к Т3 в нормальном тиреоглобулине составляет 15:1 [21].

Щитовидная железа — единственный эндокринный орган, в котором происходит двунаправленное перемещение продуктов, предназначенных для секреции в кровь. Синтезируемый и содержащий связанные йодтиронины тиреоглобулин вначале пересекает апикальную мембрану клеток, откладываясь в коллоидной полости фолликула, а затем вновь поступает в клетки и перемещается к базальной их мембране, по дороге высвобождая йодтиронины, которые и выделяются в кровь [8]. Гидролиз тиреоглобулина стимулируется тиреотропином, но тормозится I-; последний эффект используется, применяя KI для лечения гипертиреоза [13].

2.3 Запасание и секреция тиреоидных гормонов

В отличие от большинства эндокринных желез, которые не запасают существенных количеств гормона, щитовидная железа содержит запасы тиреоидных гормонов на несколько недель в виде пула тиреоглобулина. Для секреции Т4 и Т3 тироглобулин должен быть гидролизован. Это отщепление йодтиронинов от тиреоглобулина осуществляется протеазами лизосом в клетке фолликула. В ответ на стимуляцию ТТГ на апикальной поверхности фолликулярных клеток образуются капли коллоида за счет эндоцитоза коллоида, прилегающего к полости. Для слияния с каплями коллоида лизосомы мигрируют с базальной поверхности фолликулярной клетки и высвобождают свои гидролитические ферменты. При гидролизе тиреоглобулина, очевидно, высвобождаются все йодированные аминокислоты в свободной форме. Йодид, высвобождаемый из монойодтирозина и дийодтирозина, впоследствии доступен для реутилизации в щитовидной железе. Свободный Т4 и Т3 диффундируют из клетки в циркулярное русло [21].

Катаболизм же гормонов щитовидной железы протекает по двум направлениям: распад гормонов с высвобождением йода (в виде йодидов) и дезаминирование (отщепление аминогруппы) боковой цепи гормонов. Продукты обмена или неизмененные гормоны экскретируются почками или кишечником. Возможно, что некоторая часть неизмененного тироксина, поступая через печень и желчь в кишечник, вновь всасывается, пополняя резервы гормонов в организме [2].

2.4 Транспорт гормонов щитовидной железы

От половины до двух третей Т4 и Т3 присутствуют в организме вне щитовидной железы, при чем большая их часть находится в крови в связанной форме в комплексе с двумя белками: тироксин-связывающим глобулином (ТСГ) и тироксин-связывающим преальбумином (ТСПА). В количественном отношении большее значение имеет ТСГ, который представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 50 кД. Он связывает Т4 иТ3 со сродством в 100 раз превышающим сродство ТСПА. При нормальных условиях ТСГ нековалентно связывает почти весь Т4 и весь Т3, содержащийся в плазме (табл. 2).

Таблица 2. Сравнение содержания Т4 и Т3 в сыворотке

Гормон

общее содержание гомона (мкг%)

свободный гормон

период полужизни в крови t½ (дни)

в % от общего содержания

в молях

Т4

8

0,03

3,0 *10-11

7,5

Т3

0,15

0,3

0,6*10-11

1

Биологическая активность гормонов обуславливается небольшой несвязанной фракцией [13]. Только около 0,03% Т4 и 0,3% Т3 находятся в свободной форме или диализуются в исследованиях in vitro. Тироксин связывается с сывороточными связывающими белками прочнее, чем Т3, что ведет к более низкой скорости метаболического клиренса и более длинному периоду полужизни в сыворотке (табл. 2)[21].

Связанные и свободные формы гормонов находятся в динамическом равновесии. Это означает, что любое уменьшение концентрации свободного гормона в крови автоматически уменьшает связывание, и наоборот.

Поскольку способность проникать в клетки, взаимодействовать со специфическими рецепторами оказывать биологические эффекты обладают лишь свободные гормоны, понятно, что не только сама щитовидная железа, но и белки плазмы служат источником доступных для клеток свободных гормонов, т. е. играет важнейшую роль в поддержании «тиреоидного статуса» организма.

Свободные йодтиронины относительно легко проникают сквозь мембрану клеток. Внутриклеточные эффекты тиреоидных гормонов тесно связаны с процессами их метаболизма (в первую очередь с механизмами дейодирования). Тироксин может подвергаться дейодированию в различные соединения, сохраняющие йод в своей структуре, пока не превратиться в полностью лишенный йода тиронин. Самым важным из таких превращений является конверсия Т4 в более активный Т3 [8]. Секреция Т3 нормальной щитовидной железой определяет лишь 10 — 20% внетиреоидного количества этого гормона, а остальное его количество образуется в результате конверсии Т4 в периферических тканях, которая осуществляется с участием фермента 5`-дейодиназы [12]. Конверсия Т4 происходит путем монодейодирования наружного тирозильного кольца до Т3. Дейодиназы обладают как субстратной, так и тканевой специфичностью. В настоящее время это считается важным механизмом, посредством которого сами клетки регулируют количество активного гормона в своем ближайшем окружении, поскольку Т3 в пересчете на 1 моль гораздо активнее Т4.

Дейодиназы вовлечены в активацию и инактивацию тиреоидных гормонов. Существует различные виды дейодиназ. Все они в своем активном центре имеют необычную аминокислоту селеноцистеин и могут использовать структуру, образованную в результате вставки последовательности селеноцистеина для введения селеноцистеина по кодону UAG, который обычно является стоп-кодоном.

В периферических тканях (мышцы, печень, почки, сердечная мышца, щитовидная железа) находится энзим 1, 5`-дейодиназа, который дейодирует тироксин, отщепляя от него одну молекулу йода в положении 1,5`, и превращает его в трийодтиронин. Функция 1, 5`-дейодиназы состоит в поддержании нормального уровня Т3 в сыворотке крови. В щитовидной железе 1, 5`-дейодиназа дейодирует моно- и дийодтирозины при гидролизе тиреоглобулина в тиреоидных клетках. Активность 1, 5`-дейодиназа увеличивается при гипотиреозе, и, таким образом, концентрация Т3 в сыворотке крови поддерживается в пределах нормы при низком уровне Т4.

В мозгу и гипофизе находится 2, 5`-дейодиназа. роль этого энзима состоит в поддержании нормального внутриклеточного количества Т3 в мозгу и гипофизе. Уменьшение в сыворотке крови тироксина ведет к повышению активности 2, 5`-дейодиназы в мозгу, которая в большем количестве превращает Т4 в Т3. Напротив, при повышении концентрации Т4 в сыворотке крови уменьшается активность 2, 5`-дейодиназы и образование внутриклеточного Т3 в мозгу. Предполагают, что 2, 5`-дейодиназа является монитором, посредством которого гипоталамус и гипофиз поддерживают нормальный уровень тироксина в сыворотке крови [5].

Существование механизма клеточной конверсии Т4 в Т3 позволяет считать тироксин прогормоном, а трийодтиронин истинным гормоном. Однако и сам Т4 способен давать ряд эффектов, обладая, по-видимому, собственными рецепторами в некоторых клетках-мишенях. Периферические ткани могут превращать Т4 не только в более активный Т3, но и в практически лишенный активности реверсивный Т3 (рТ3), в котором атом йода отсутствует во внутреннем кольце молекулы (рис. 6) [8].

Рис. 6. Образование трийодтиронина и реверсного трийодтиронина из тироксина [21].

Регуляторы переключения конверсии с активного Т3 на неактивный рТ3 точно неизвестны, но основное имеет, по-видимому, обеспечение организма энергией. При голодании, например, когда необходимо сохранять энергию, преобладает конверсия Т4 в рТ3. [6]

2. 5 Влияние веществ на синтез тиреоидных гормонов

В настоящее время считается, что влияния на синтез различных веществ имеет смешанный характер. Этот тезис доказывается в статье Р. В. Кубасова, Е. Д. Кубасовой «Современные представления о роли факторов внешней среды и дисбаланса биоэлементов в формировании эндемического зоба». Далее исследованы факторы, влияющие на синтез тиреоидных гормонов.

2.5. 1 Йод

Йод, открытый почти 200 лет назад, относится к категории незаменимых для организма человека элементов, являясь облигатным компонентом для синтеза тиреоидных гормонов — тироксина и трийодтиронина. Иодиды и другие неорганические соединения йода депонируются в соединительной ткани, однако только в щитовидной железе иодиды окисляются до состояния более высокой валентности [22].

Йод входит в структуру тироксина. Организм человека не может синтезировать йод, поэтому получать его он может исключительно с продуктами питания, а так же с водой и воздухом. Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) рекомендует следующие нормы суточного потребления йода: для детей — 90−120 мкг, для взрослых — 150−200 мкг. Больше йода требуется беременным и кормящим женщинам [19].

Дефицит йода проявляется снижением функциональной активности щитовидной железы, выражающейся недостаточным производством тиреоидных гормонов. В этих условиях включается один из механизмов адаптации щитовидной железы -- усиление процесса захвата йода и увеличение синтеза тиреоидных гормонов за счет повышения уровня тиреотропного гормона (ТТГ). Усиленный метаболизм и синтез тироксина в ответ на повышение уровня ТТГ способствуют ускорению оборота йода в организме, что позволяет обходиться значительно меньшим его количеством.

Более того, если в процессе нормального функционирования щитовидной железы преимущественно синтезируется тироксин, то в условиях йодного дефицита изменяется соотношение в синтезе Т4 и Т3 и щитовидная железа переходит к более активному синтезу Т3, обладающего большей гормональной активностью, тем самым уменьшая расход йода. Параллельно происходят процессы внетиреоидного дейодирования Т4 в Т3, все это позволяет успешно адаптироваться к условиям легкого дефицита [22].

Следует помнить еще об одном компенсаторном механизме -- эффекте Вольфа -- Чайкова: для сохранения эутиреоидного состояния при избыточном поступлении йода в организм щитовидная железа блокирует синтез тиреоидных гормонов на этапе дейодирования Т4 в Т3.

2. 5. 2 Тиоцианты

Низкие концентрации тиоцианата угнетают транспорт йодида, увеличивая при этом скорость его выхода из щитовидной железы. Высокие же концентрации резко ускоряют выход йодида и угнетают его поступление в железу; тиоцианат ингибирует включение йодида в тиреоглобулин, поскольку конкурирует с йодидом на уровне тиреоидной пероксидазы.

2.5. 3 Хлорорганические соединения

4-хлоррезорцинол и 3-хлор-4-гидроксибензойная кислота — ингибируют тиреоидную пероксидазу и органификацию йодида в щитовидной железе. В организм человека эти вещества попадают в следствии хлорирования воды. Наиболее токсичным из хлорорганических соединений является 2,3,7,8 — тетрахлордибензо-р-диоксин, который обладает способностью увеличивать массу щитовидной железы и снижать уровень Т4 крови.

2.5. 4 Селен

Селен в организм человека поступает в виде селеноцистеина, селенометионина и селеноглутатиона. Селен в виде селеноцистеина входит в состав фермента дейодиназы, участвующего в превращении в периферических тканях прогормона тироксина в активный гормон трийодтиронин. При его недостаточности происходит дисбаланс тиреоидных гормонов, проявляющийся в накоплении тироксина с одновременным снижением количества Т3 в щитовидной железе. С другой стороны, избыток селена приводит к блокировке конверсии Т4. По данным Института питания РАМН, более чем у 80% населения России обеспеченность селеном ниже оптимальной [10].

2. 5. 5 Кобальт

Кобальт входит в состав молекулы цианокобаламина; он активно участвует в образовании гормонов щитовидной железы. Кобальт усиливает синтезирующую способность, в результате чего синтез тиреоидных гормонов может нормализоваться, даже при недостаточном поступлении йода в организм. Доказано, что он тормозит энзиматические реакции синтеза тироксина, угнетает активность тирозиниодиназы, регулирующей йодирование тирозина, а также цитохромоксидазы, участвующей в окислении йодида в йодат.

2. 5. 6 Медь

Медь участвует в гидроксилировании и окислении тирозина. Медь, в качестве металлоферментов, принимает участие процессе перевода неорганического йода в органические соединения. Играет большую роль в обеспечении тиреоидного синтеза. При дефиците меди изменяется плотность коллоида щитовидной железы, а также снижается активность йодиназы, участвующей в присоединении йода к тирозину.

Установлено, что высокие концентрации одного микроэлемента могут привести к ингибированию абсорбции другого. Особенно данное явление выражено при взаимодействии меди с двухвалентными катионами, например с цинком.

2. 5. 7 Цинк

Цинк относится к эссенциальным микроэлементам, он обладает антиоксидантными свойствами. Он входит в состав ДНК- тиреоидсвязывающего белка ядерного рецептора Т3. При дефиците цинка наблюдается снижение концентрации тиреоидных гормонов на 30%.

2. 5. 8 Железо

Тиреопероксидаза, содержащая в своей структуре гемовое железо, прочно связана с мембранами эндоплазматической сети тироцитов щитовидной железы. Дефицит железа может приводить к снижению активности тиреопероксидазы, участвующей в биосинтезе йодтиронинов. Даже при достаточно употреблении йода, но при дефиците железа, наблюдается образование эндемического зоба.

2. 5. 9 Марганец

Марганец является физиологическим антогонистом меди, кобальта, магния. Его избыток приводит к гиперплазии через увеличение объема функциональной ткани. Предполагают, что марганец способствует вымыванию йода из почвы, свидетельством чего является пониженное содержание йода в продуктах.

2. 5. 10 Токсические микроэлементы

Имеются сведения о влиянии ртути на йодную недостаточность. Ртуть может вступать в соединение с йодом, тем самым быть причиной образования зоба.

Свинец оказывает прямое действие на щитовидную железу — вызывает блокирование синтеза тиреоидных гормонов, влияя на ее ферментативную систему [10].

2.6 Регуляция синтеза и высвобождения гормонов щитовидной железы

Сигнал, запускающий синтез тиреоидных гормонов, формируется в гипоталамусе в виде тиреолиберина, который, воздействуя на гипофиз, стимулирует синтез и секрецию тиреотропина. Последний взаимодействует с рецепторами на поверхности клеток щитовидной железы и опосредованно, через вторичные посредники, стимулирует синтез ряда белков, в том числе тиреоглобулин [9]. Данный процесс отражает схема на рисунке 7 (см. ниже).

Главные компоненты, составляющие петлю обратной отрицательной связи, — это Т4, Т3, тиреотропин и тиреолиберин. Так же выше описывалась регуляция конверсии Т4 в Т3 в периферических тканях.

Тироксин и трийодтиронин тормозят свой собственный синтез по механизму обратной связи. Медиатором этого процесса может служить Т3, поскольку Т4 превращается в гипофизе в Т3. На том уровне обратная связь ингибирует высвобождение тиреотропина. Т3 (или, возможно, Т4) может подавлять высвобождение тиролиберина гипоталамусом. Стимулом для повышенной секреции тиролиберина и тиреотропина служит снижение содержания тиреоидных гормонов в крови. Однако даже при полной блокаде биосинтеза тиреоидных гормонов не происходит немедленного усиления высвобождения тиролиберина и тиреотропина. Щитовидная железа содержит запас ранее образованного гормона, обеспечивающий его «поставку» в течение нескольких недель [13].

Рис. 7. Регуляция биосинтеза гормонов щитовидной железы по принципу обратной связи

Сплошными линиями и «+» обозначены пути стимуляции, пунктирными линиями и знаком «-» — ингибиторные зоны; СС — соматостатин; ТРГ — тиреотропин-релизинг-гормон; ТТГ — тиреотропный гормон.

Все вышесказанное подтверждает, щитовидная железа является классическим примером гипофиззависимых эндокринных желез, функционирование которой регулируется механизмом отрицательной обратной связи. Процесс биосинтеза тиреоглобулина и выделение тиреоидных гормонов находятся под контролем тиреотропного гормона (ТТГ). В свою очередь тиреоидные гормоны, преимущественно Т3, оказывают ингибирующее воздействие на уровень ТТГ.

3. Тиреотропный гормон

3. 1 Строение тиреотропного гормона

Тиреотропный гормон гипофиза — димерный белок, состоящий из двух неодинаковых гликопротеидных субъединиц [14]. Первичная структура тиреотропного гормона была расшифрована в 1971 г., а вскоре были идентифицированы и его высшие структуры. Тиротропин с молекулярной массой 30 кД синтезируется в тиреотрофных клетках передней доли гипофиза. В отличие от пептидных гормонов гипофиза, представленных в основном одной полипептидной цепью, тиреотропный гормон (ТТГ, тиротропин) является сложным гликопротеином и содержит, кроме того б- и в- субъединицы, которые в отдельности биологической активностью не обладают.

Полностью расшифрована первичная структура б- и в-субъединиц тиротропина быка, овцы и человека: б-субъединица, содержащая 96 аминокислотных остатков, имеет одинаковую аминокислотную последовательность во всех изученных ТТГ и во всех лютеинизирующих гормонах гипофиза, т. е весьма консервативна и почти не имеет межвидовых различий; в-субъединица тиротропина человека, содержащая 112 аминокислотных остатков, отличается от аналогичного полипептида в ТТГ крупного рогатого скота аминокислотными остатками и отсутствием С-концевого метионина. в-субъединица обеспечивает взаимодействие гормона с рецептором. Вместе с тем свободная в-субъединица неактивна и проявляет биологическую активность только в комплексе с б-субъединицей. По мнению ряда авторов, б-субъединицей является не только активатором, но и протектором в-субъединицы от действия протеиназ [2, 9, 21].

3. 2 Синтез тиреотропного гормона

Образование ТТГ контролируется гормонами гипоталамуса тиреолиберином и тиреостатином. Тиреолиберин является трипептидом, состоящим из глутаминовой кислоты, гистидина и пролина. Этот гормон стимулирует секрецию ТТГ в кровяное русло. Его так же называют тиреотропин релизинг — гормон (ТРГ). Он достигает переднего гипофиза через гипоталамо — гипофизарную портальную циркуляцию. ТРГ, очевидно, секретируется эпизодически, так как идентифицирована пульсация секреции ТТГ. Тиреостатин блокирует секрецию ТТГ, а так же снижает уровень cAMP в гипофизе. Кроме того, регуляторами синтеза ТТГ являются гормоны щитовидной железы по принципу отрицательной обратной связи, происходит снижении транскрипции генов б- и в-субъединиц ТТГ, а так же гормона ТРГ. В дополнение к тиреотропному релизинг — гормону и тиреоидным гормонам другие вещества гипоталамического происхождения играют некоторую роль в регуляции секреции тиреотропного гормона. К ним относятся соматостатин, нейротрансмиттер дофамин и глюкокортикоиды [9, 21] (рис. 8)

Рис. 8. Регуляция секреции тиреотропного гормона (ТТГ) гипофизом: положительные эффекты тиреотропина релизин-гормона (ТРГ) гипоталамуса и негативные эффекты циркулирующих Т3 и Т4 [21].

Пик секреции ТТГ отмечается в часы, непосредственно предшествующие сну, с последующим снижением в течение ночи.

3.3 Функции тиреотропного гормона в организме

Основная биологическая функция тиреотропина — стимуляция синтеза и секреции йодтиронинов (Т4 и Т3) в щитовидной железе. ТТГ стимулирует рост эпителиальных клеток фолликул щитовидной железы, усиливает синтез в них кислых мукополисахаридов и накопление их в коллоиде [14]. Воздействуя по мембранно — опосредованному механизму на клетки щитовидной железы, он стимулирует образование тиреоглобулина — предшественника тиреоидных гормонов. ТТГ усиливает захват и активный перенос йодидов из крови в щитовидную железу, йодирование тирозиновых радикалов в молекуле тиреоглобулина, пиноцитоз тиреоглобулина в коллоид щитовидной железы, активирует процесс разжижения коллоида, захват коллоидных капель и тиреоглобулина и высвобождение йодтиронинов в кровь. ТТГ является активатором всех фаз секреторного цикла тироцитов, но прежде всего способствует резорбции тиреоглобулина, отщеплению от него Т4 и Т3 и выделению гормонов в кровь. Так же ТТГ оказывает влияние на пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов с преобладанием свойств индуктора иммунной толерантности в норме и превалированием свойств сенергиста ростового фактора лимфоцитов при сформированном Th1 — типе иммунного ответа, т. е. является функциональным аналогом ИЛ — 2, но с более выраженным иммуномодулирующим и иммунорегуляторным действием.

Тиреотропин оказывает на щитовидную железу два типа эффектов. Одни проявляются быстро (в течение нескольких минут) и включает стимуляцию всех стадий синтеза йодтиронинов. Проявление других требует нескольких дней. К ним относят стимуляцию синтеза белков, фосфолипидов, нуклеиновых кислот, увеличение количества и размеров тиреоидных клеток [9, 21, 23].

4. Механизм действия тиреоидных гормонов

Биологическое действие гормонов щитовидной железы распространяются на множество физиологических функций организма.

Функции трийодтиронина и тироксина:

1. Стимуляция обменных процессов: усиление расщепления белков, жиров, углеводов; усиление окислительных процессов; термогенез; активация пищеварительных процессов, повышение продуктивности.

2. Регуляция роста, развития, дифференцировки тканей. Метаморфоз. Формирование костей. Рост волосяного покрова. Развитие нервной ткани и стимуляция нервных процессов.

3. Усиление сердечной деятельности, повышение чувствительности сердца к влиянию симпатической нервной системы.

Симпатическая нервная система усиливает активность щитовидной железы, парасимпатическая угнетает. Физиологическая гипофункция щитовидной железы: во время сна. Физиологическая гиперфункция железы: во время беременности и лактации [15]. В частности, гормоны регулируют скорость основного обмена, роста и дифференцировку тканей, обмена белков, углеводов и липидов, водно-электролитный обмен, деятельность центральной нервной системы, пищеварительного тракта, гемопоэз, функцию сердечнососудистой системы, потребность в витаминах, сопротивляемость организма инфекциям [2, 22].

В эмбриональном периоде тиреоидные гормоны оказывают исключительное влияние на формирование основных структур мозга, отвечающих за моторные функции и интеллектуальные возможности человека, а также способствуют созреванию «улитки» слухового анализатора [22].

Хотя существуют некоторые доказательства в поддержку действия тиреоидных гормонов на уровне клеточной поверхности и митохондрий, большинство характерных для тиреоидных гормонов биологических эффектов, как считается, опосредуется взаимодействием Т3 со специфическими рецепторами. Механизм действия тиреоидных гормонов очень похож на действие стероидных гормонов в том, что гормон связывается с ядерным рецептором, в результате чего изменяется транскрипция специфических информационных РНК [9, 21].

Тиреоидные гормоны так же как и стероидные, легко диффундируют через липидную клеточную мембрану и связываются внутриклеточными белками. По другим данным, тиреоидные гормоны взаимодействуют сначала с рецептором на плазматической мембране и лишь после этого попадают в цитоплазму, где комплексируются с белками, образуя внутриклеточный пул тиреоидных гормонов. Биологическое действие в основном осуществляется Т3, который связывается с цитоплазматическим рецептором. Механизм действия тиреоидных гормонов иллюстрируется схемой, изображенной на рисунке 9.

Рис. 9. Механизм действия тиреоидных гормонов

МБ- мембрана клетки; Р — рецептор мембраны; МЯ — мембрана ядра; РЦ — цитоплазматический рецептор; РЯ — рецептор ядра; ЭС — эндоплазматическая сеть; М — митохондрия.

Тироидцитоплазматический комплекс сначала диссоциирует, а затем Т3 непосредственно связывается рецепторами ядра, обладающими к нему высокой аффинностью. Кроме того, высокоаффинные рецепторы к Т3 обнаруживаются и в митохондриях. Считается, что калоригенное действие тиреотропных гормонов осуществляется в митохондриях посредством генерации новой АТФ, для образования которой используется аденозиндифосфат (АДФ).

Тиреотропные гормоны регулируют синтез белка на уровне транскрипции, и это их действие, обнаруживается через 12 — 24 ч, может быть блокировано введение ингибиторов синтеза РНК. Помимо внутриклеточного действия, тиреоидные гормоны стимулируют транспорт глюкозы и аминокислот через клеточную мембрану, непосредственно влияя на активность некоторых локализованных в ней ферментов.

Таким образом, специфическое действие гормонов проявляется лишь после компенсирования его с соответствующим рецептором. Рецептор после опознавания и связывания гормона генерирует физические или химические сигналы, которые вызывают последовательную цепь пострецепторных взаимодействий, заканчивающихся проявлением специфического биологического эффекта гормона. Отсюда следует, что биологическое действие гормона зависит не только от его содержания в крови, но и от количества и функционального состояния рецепторов, а так же от уровня функционирования пострецепторного механизма [1].

В отличие от рецепторов стероидных гормонов, которые не могут прочно заякориваться в ядре перед связыванием гормона (и таким образом обнаруживаются в цитозольных фракциях после разрушения клеток), рецепторы тиреоидных гормонов прочно связанны с кислыми негистоновыми ядерными белками. Высокая гидрофобность Т3 и Т4 является основанием для действия их по цитозольному механизму. Оказалось, что рецепторы тиреоидных гормонов в основном находятся в ядре и образованные гормон-рецепторные комплексы, взаимодействуя с ДНК, изменяют функциональную активность некоторых участков генома. Результатом действия Т3 и является индукция процессов транскрипции и, как следствие, биосинтез белков. Эти молекулярные механизмы лежат в основе влияния тиреоидных гормонов на многие обменные процессы в организме. В ответ на тиреоидные гормоны растет количество рецепторов, а не их сродство. Этот ядерный рецептор тиреоидных гормонов обладает низкой емкостью (приблизительно 1 пмоль/мг ДНК) и высоким сродством к Т3 около (10-10 М). Сродство рецептора к Т4 примерно в 15 раз меньше [9, 21].

Главная метаболическая функция гормонов щитовидной железы состоит в повышении поглощения кислорода. Эффект наблюдается во всех органах, кроме мозга, ретикулоэндотелиальной системы и гонад. Особое внимание привлекают к себе митохондрии, в которых Т4 вызывает морфологические изменения и разобщает окислительное фосфорилирование. Эти эффекты требуют больших количеств гормона и, почти наверняка, не имеет места в физиологических условиях. Тиреоидные гормоны индуцируют митохондриальную б-глицеро-фосфатдегидрогеназу, что, возможно, связано с их действием на поглощение О2.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой