Исследование цитокинового баланса при лимфопролиферативных заболеваниях

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 612. 122. 94−076. 5:616. 155. 392. 2
ИССЛЕДОВАНИЕ ЦИТОКИНОВОГО БАЛАНСА ПРИ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
Наталья Петровна ДОМНИКОВА12, Татьяна Юрьевна ДОЛГИХ1, Юлия Александровна ДЬЯЧКОВА2, Елена Евгеньевна ПЕТРУСЕНКО1, Татьяна Борисовна КУЗНЕЦОВА2, Евгений Владимирович ШОЛЕНБЕРГ1, Олег Вадимович РЕШЕТНИКОВ3, Светлана Леонидовна РЫЖИКОВА4
1 НИИ региональной патологии и патоморфологии СО РАМН 630 117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
2 ГБУЗ НСО Государственная Новосибирская областная клиническая больница 630 087, Новосибирск, ул. Немировича-Данченко, 130
3 НИИ терапии СО РАМН,
630 089, г. Новосибирск, ул. Бориса Богаткова, 175/1
4 ЗАО «Вектор-Бест»
630 117, г. Новосибирск-117, а/я 492
Уровень спонтанной и митогениндуцированной продукции про- и противовоспалительных цитокинов у 76 пациентов с хроническим лимфолейкозом, неходжкинскими лимфомами из малых лимфоцитов с опухолевым поражением костного мозга, множественной миеломой и диффузной В-крупноклеточной лимфомой исследован в динамике химиотерапии. Дебют или прогрессия заболевания сопровождаются повышением уровня ряда провоспалительных цитокинов, за исключением ИЛ-2, продукция которого понижена. В стадии ремиссии преимущественно снижен уровень и про- и противовоспалительных цитокинов. Продукция колониести-мулирующих факторов повышена как в дебюте или прогрессии, так и в ремиссии лимфопролиферативных заболеваний.
Ключевые слова: цитокины, хронический лимфолейкоз, неходжкинские лимфомы из малых лимфоцитов с поражением костного мозга, множественная миелома, диффузная В-крупноклеточная лимфома.
Цитокины — белковые или полипептидные продукты активированных клеток иммунной системы, которые определяют взаимосвязь клеток в динамике иммунного ответа, при гемопо-эзе и развитии воспаления [5]. Изменение продукции цитокинов особенно важно в патогенезе лимфопролиферативных заболеваний, так как субстратом патологического процесса в этом случае являются иммунокомпетентные клетки и
их предшественники — основные продуценты и потребители цитокинов.
Роль большинства цитокинов хорошо изучена при хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ), не-ходжкинских лимфомах из малых лимфоцитов (НХЛ из малых лимфоцитов), множественной миеломе (ММ) и диффузной В-крупноклеточ-ной лимфоме (ДВККЛ) [3, 9, 13]. В то же время состояние цитокиновой системы в динамике
Домникова Н. П. — д.м.н., проф., зав. лабораторией молекулярно-клеточных и иммуноморфологических основ онкогематологии, зав. гематологическим отделением с блоком асептических палат, е-mail: n_domnikova@mail. ru
Долгих Т. Ю. — старший научный сотрудник, e-mail: tatyana. yurevna. dolgikh@yandex. ru Дьячкова Ю. А. — врач гематологического отделения с блоком асептических палат, e-mail: dyachkova_yuliya@mail. ru
Петрусенко Е. Е. — старший научный сотрудник, e-mail: elena_petrusenko@list. ru
Кузнецова Т. Б. — врач гематологического отделения с блоком асептических палат, e-mail: tata1979k@mail. ru Шоленберг Е. В. — научный сотрудник, e-mail: tevton1350@rambler. ru Решетников О. В. — ведущий научный сотрудник, e-mail: reshetnikov_ov@mail. ru Рыжикова С. Л. — научный сотрудник, e-mail: e-mail: sv_ryzhikova@mail. ru
химиотерапии остается недостаточно исследованным, что касается в первую очередь колоние-стимулирующих факторов.
Кроме того, основная часть опубликованных результатов связана с изучением сывороточной концентрации цитокинов, отражающей иммунологическую реактивность организма в целом. Исследования, посвященные способности клеток крови к секреции цитокинов при лимфо-пролиферативных заболеваниях ex vivo, не многочисленны. Вместе с тем в последние годы появилась возможность проведения работ в этом направлении, используя метод дифференцированного определения спонтанной и митогенин-дуцированной продукции цитокинов. Определение уровней продукции цитокинов мононукле-арами периферической крови in vitro показывает функциональное состояние клеток. Спонтанная продукция цитокинов мононуклеарами в культуре свидетельствует, что клетки уже активированы in vivo. Индуцированный (различными стимуляторами, митогенами) синтез цитокинов отражает потенциальную, резервную способность клеток отвечать на антигенный стимул. Сниженная индуцированная продукция цитоки-нов in vitro может служить одним из признаков иммунодефицитного состояния [7].
Цель работы — изучение уровня спонтанной и митогениндуцированной продукции про- и противовоспалительных цитокинов при лим-фопролиферативных заболеваниях в фазе дебюта и прогрессии, а также ремиссии (полной или частичной), достигнутой в результате химиотерапии.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Обследовано 76 пациентов с лимфопро-лиферативными заболеваниями: 42 человека (27 мужчин, 15 женщин, средний возраст -58,25 ± 9,62 года) с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, 23 человека (10 мужчин, 13 женщин, средний возраст 59,70 ± 8,30 года) с ММ, 11 человек с ДВККЛ (6 мужчин, 5 женщин, средний возраст 52,0 ± 11,14 года), находившихся в 2011—2012 гг. на лечении в гематологическом отделении с блоком асептических палат ГБУЗ НСО Государственная Новосибирская областная клиническая больница. Пациенты с ХЛЛ имели В или С стадию по Binet, у всех пациентов с НХЛ из малых лимфоцитов отмечалось опухолевое поражение костного мозга и IV стадия- среди больных ДВККЛ доминировали III и IV стадии (в соответствии с классификацией, принятой в Ann Arbor (США) в 1971). У большинства больных ММ отмечалась II-III стадия заболевания [14].
Лечение больных ХЛЛ осуществлялось флу-дарабином в сочетании с циклофосфаном (FC) или в комбинации с циклофосфаном и ритукси-мабом (FCR). Для лечения больных НХЛ из малых лимфоцитов применялись курсы по схемам СОР (циклофосфан, винкристин, преднизолон), RCOP (ритуксимаб, циклофосфан, винкристин, преднизолон), CHOP (циклофосфан, доксоруби-цин, винкристин, преднизолон), RCHOP (ритук-симаб, циклофосфан, доксорубицин, винкрис-тин, преднизолон). Терапия пациентов с ММ осуществлялась по схеме VMP (велкейд, мел-фалан, преднизолон). Лечение больных ДВККЛ проводили по схемам CHOP и RCHOP.
Фаза дебюта или прогрессии (рецидива) заболевания выявлена у 29 (69,0%) больных ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, у 19 (82,6%) больных ММ, а также 6 (54,5%) пациентов с ДВККЛ. Частичная или полная ремиссия после проведенной химиотерапии отмечена у 13 (31,0%) пациентов с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, 4 (17,4%) пациентов с ММ и 5 (45,5%) больных ДВККЛ.
У всех пациентов исследовали спектр спонтанной и митогениндуцированной продукции про- и противовоспалительных цитокинов: ин-терферона-у (ИНФ-у), фактора некроза опухо-ли-а (ФНО-а), интерлейкина-1р (ИЛ-1Р), ин-терлейкина-2 (ИЛ-2), интерлейкина-4 (ИЛ-4), интерлейкина-6 (ИЛ-6), интерлейкина-8 (ИЛ-8), интерлейкина-10 (ИЛ-10), интерлейкина-17 (ИЛ-17), интерлейкина-18 (ИЛ-18), антагониста рецепторов интерлейкина-1 (ИЛ-1РА), моноци-тарного хемотаксического белка ^CP-!), гра-нулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ), гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ), сосудисто-эндотелиального фактора роста (VEGF), а также антител к интерферону-а (АТ к ИНФ-а) в динамике химиотерапии: до начала лечения и через 6−8 курсов (через 4−6 месяцев).
Для исследования спонтанной и митогенин-дуцированной продукции цитокинов клетками крови использовали набор реагентов «ЦИТО-КИН-СТИМУЛ-БЕСТ». Непосредственно после отбора из кубитальной вены 1 мл крови вносили во флакон, содержащий 4 мл поддерживающей среды (DMEM), гепарин (2,5 Ед/мл), гентами-цин (100 мкг/мл) и L-глютамин (0,6 мг/мл). Этот флакон использовали для изучения спонтанной продукции цитокинов. Для митогенной стимуляции 1 мл полученной разбавленной крови переносили во флакон со смесью поликлональных активаторов: липополисахарида, конканавалина А, фитогемагглютинина P и фитогемагглюти-нина М. Оба флакона инкубировали в течение
суток при 37 °C, затем клетки крови осаждали на центрифуге при 10 000 g в течение 3 мин, супернатант после отделения осадка замораживали и хранили при -40 °С до проведения количественного анализа цитокинов. Концентрацию цитокинов в исследуемых образцах оценивали с помощью соответствующих иммунофермент-ных наборов реагентов производства ЗАО «Век-тор-Бест» (Новосибирск). Концентрация измерялась в пг/мл.
Группу контроля по уровню спонтанной и митогениндуцированной продукции цитокинов клетками крови составил 51 условно-здоровый донор [8].
Результаты представлены в виде М ± о, где М — среднее арифметическое значение, о — стандартное отклонение. Различия считались достоверными при значении вероятности ошибки (р) & lt- 0,05. Проверку соответствия выборок анализируемых данных по спонтанной и митогенин-дуцированной продукции цитокинов при ХЛЛ, НХЛ из малых лимфоцитов, ММ и ДВККЛ нормальному закону распределения проводили по критерию Шапиро-Уилка. Сравнения средних значений различных выборок производили с помощью и-теста по методу Манна и Уитни (непараметрического теста), который применяется там, где выборки из переменных, принадлежащих к интервальной шкале, не подчиняются нормальному распределению.
Клинико-морфологические исследования выполнены с информированного согласия испытуемых и в соответствии с этическими нормами Хельсинкской Декларации (2000 г.). Программа исследования была рассмотрена и одобрена на заседании этического комитета ГБУЗ НСО «Государственная Новосибирская областная клиническая больница».
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ММ, а также ДВККЛ концентрация исследованных цитокинов: ИНФ-у, ФНО-а, ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-17, ИЛ-18, ИЛ-1РА, МСР-1, Г-КСФ, ГМ-КСФ, YEGF, а также АТ к ИНФ-а находится в широких пределах и не подчиняется закону нормального распределения.
Как в дебюте, так и в прогрессии лимфо-пролиферативных заболеваний выявлено выраженное увеличение спонтанной продукции ко-лониестимулирующих факторов по сравнению с группой контроля: Г-КСФ в 185,3 (р = 0,002), 85,2 (р = 0,047) и 31,2 раза (р = 0,002), ГМ-КСФ в 10,3 (р = 0,001), 10,0 (р = 0,003) и 8,9 раза
(р & lt- 0,001) при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ДВККЛ, а также ММ соответственно. У пациентов с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов оказалась повышенной митогениндуцированная продукция Г-КСФ в 1,9 раза (р = 0,045).
Обнаружено, что общим для исследуемых нозологий явился повышенный уровень продукции ИЛ-18: спонтанной (в 2,9 раза (р & lt- 0,001) при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, в 4,3 раза (р = 0,043) при ДВККЛ) и митогениндуци-рованной (в 2,5 раза (р & lt- 0,001) при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, в 3,7 раза (р = 0,035) при ДВККЛ). При М М спонтанная продукция ИЛ-18 оказалась увеличенной в 1,8 раза (р = 0,002), митогениндуцированная не отличалась от группы контроля (р = 0,055).
У пациентов с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, а также ДВККЛ в дебюте или прогрессии повышен уровень продукции VEGF: в первом случае — митогениндуцированной в 3,4 раза (р = 0,010), во втором случае — спонтанной в 2,6 раза (р = 0,005). Дебют или прогрессия ММ сопровождается увеличением спонтанной продукции ИЛ-8 в 1,4 раза (р = 0,027).
Помимо повышенного уровня цитокинов в дебюте или прогрессии лимфопролифератив-ных заболеваний отмечено снижение продукции ИЛ-2. Так, спонтанная продукция ИЛ-2 у пациентов с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов ниже по сравнению с группой контроля в 3,6 раза (р = 0,048), у пациентов с ММ — в 2,5 раза (р = 0,001), у больных ДВККЛ — в 8,5 раза (р & lt- 0,001). Митогениндуцированная продукция ИЛ-2 при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов снижена в 3 раза (р & lt- 0,001), при ММ — в 2,2 раза (р & lt- 0,001).
Обнаружено, что ремиссия лимфопролифе-ративных заболеваний сопровождается только снижением уровня цитокинов. Исключением явилось повышение спонтанной продукции ГМ-КСФ в 4,1 раза (р = 0,020) при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов.
В ремиссии ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов оказалась сниженной спонтанная продукция как провоспалительных цитокинов — ИЛ-8 в 1,2 раза (р = 0,030), ИЛ-6 в 5,8 раза (р = 0,016), ИЛ-2 в 6,5 раза (р = 0,025), ИЛ-17 в 236,1 раза (р & lt- 0,001), так и противовоспалительных — ИЛ-4 в 15,2 раза (р = 0,002) и ИЛ-10 в 47,1 раза (р & lt- & lt- 0,001), а также митогениндуцированная продукция ИЛ-10 в 1,2 раза (р = 0,02). У пациентов с ММ отмечен пониженный уровень спонтанной продукции противовоспалительных цито-кинов: ИЛ-4 в 91,2 раза (р & lt- 0,001) и ИЛ-1РА в 1,4 раза (р & lt- 0,001). При ДВККЛ выявлено снижение спонтанной продукции провоспалитель-
ного цитокина ИНФ-у в 9,0 раза (р & lt- 0,001), а также митогениндуцированной продукции про-воспалительных цитокинов: ФНО-а в 2,7 раза (р = 0,045), ИЛ-6 в 2,3 раза (р = 0,045), ИЛ-2 в 15,1 раза (р & lt- 0,001), и противовоспалительного цитокина ИЛ-4 в 232,3 раза (р = 0,002).
Спонтанная и митогениндуцированная продукция остальных цитокинов в дебюте или прогрессии, а также ремиссии лимфопролиферативных заболеваний была не изменена. Достоверной разницы по уровням исследованных цито-кинов между ХЛЛ, НХЛ из малых лимфоцитов, ММ и ДВККЛ как в дебюте или прогрессии, так и в ремиссии не обнаружено. Различия по уровню продукции провоспалительных, противовоспалительных цитокинов и колониестимулиру-ющих факторов между контрольной группой и группой пациентов с лимфопролиферативными заболеваниями в фазе дебюта или прогрессии, а
также между контрольной группой и пациентами в фазе ремиссии представлены в табл. 1, 2 и 3. Обсуждению подлежали только статистически значимые результаты.
Патогенетическая роль Г-КСФ и ГМ-КСФ при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ММ и ДВККЛ еще не определена. Однако известно, что при меланоме эти цитокины резко усиливают противоопухолевую активность макрофагов, что позволяет отнести ГМ-КСФ и Г-КСФ к факторам-ингибиторам роста опухоли [4]. В экспериментальных условиях продемонстрированы противоопухолевые свойства ГМ-КСФ: ex vivo данный цитокин усиливает активность естественных киллеров, которые распознают и убивают опухолевые клетки [21]- на мышиной модели рака антитело-опосредованная адресная доставка ГМ-КСФ в область неоваскуляризаии опухоли подавляет опухолевый рост и метаста-
Таблица 1
Уровень продукции провоспалительных цитокинов в дебюте или прогрессии и ремиссии лимфопролиферативных заболеваний, М ± а
Содержание цитокина, пг/мл Контрольная группа (n = 51) Пациенты в дебюте или прогрессии (n = 54) Пациенты в ремиссии (n = 22) Р
сИЛ-2 2,6 ± 4,8 0,8 ± 1,3 0,8 ± 1,3 р12 = 0,003 ри = 0,046
мИЛ-2 77,9 ± 87,2 47,8 ± 57,4 55,7 ± 62,6 р12 & lt- 0,001 ри = 0,001
сИЛ-6 695,9 ± 1827,2 252,6 ± 605,9 170,1 ± 297,6 р13 = 0,007
мИЛ-6 25 097,3 ± 17 027,9 20 223,3 ± 13 223,0 18 567,8 ± 9174,8
сИЛ-8 1979,5 ± 2357,8 3637,7 ± 5409,6 937,5 ± 1295,4
мИЛ-8 32 613,7 ± 18 904,1 35 270,0 ± 33 251,4 43 493,1 ± 16 345,3
сИЛ-17 4,4 ± 7,0 1,31 ± 3,0 0,3 ± 0,8 р13 & lt- 0,001
мИЛ-17 97,9 ± 126,7 95,6 ± 74,7 75,7 ± 64,7
сИЛ-18 51,1 ± 17,9 128,1 ± 162,3 94,5 ± 64,0 р12 & lt- 0,001
мИЛ-18 72,8 ± 28,3 113,7 ± 64,0 140,3 ± 79,8
сФНО-а 36,8 ± 73,4 48,2 ± 134,2 26,3 ± 39,7
мФНО-а 3866,3 ± 3308,3 2062,3 ± 1021,4 2438,3 ± 1450,4 р13 = 0,030
cVEGF 51,7 ± 35,5 61,5 ± 91,3 45,6 ± 60,4
мVEGF 34,0 ± 22,9 74,6 ± 84,4 124,8 ± 239,6
сИНФ-у 4,9 ± 8,3 47,2 ± 273,4 15,8 ± 28,8
мИНФ-у 2367,3 ± 2826,6 1974,1 ± 2074,3 3788,3 ± 3219,9
сИЛ-1 В 99,7 ± 266,6 181,5 ± 673,2 32,2 ± 43,8
мИЛ-1 В 2360,3 ± 2226,3 2795,5 ± 2989,8 1578,8 ± 1173,1
сМСР-1 нет данных 1320,1 ± 1660,7 866,6 ± 1097,7
мМСР-1 нет данных 4284,8 ± 3785,6 4505,2 ± 2786,9
Примечание. Здесь и в табл. 2, 3 обозначены достоверные отличия от величины соответствующего показателя пациентов контрольной группы: р12 — пациентов с заболеванием в фазе дебюта или прогрессии, р13 — пациентов с заболеванием в фазе ремиссии.
Таблица 2
Уровень продукции противоспалительных цитокинов в дебюте или прогрессии и ремиссии лимфопролиферативных заболеваний, М ± а
Содержание цитокина, пг/мл Контрольная группа 1 (п = 51) Пациенты в дебюте или прогрессии 2 (п = 54) Пациенты в ремиссии 3 (п = 22) р
сИЛ-4 0,03 ± 0,1 0,1 ± 0,3 0,04 ± 0,1
мИЛ-4 4,6 ± 11,5 4,4 ± 10,0 5,0 ± 11,3
сИЛ-10 15,6 ± 16,8 8,8 ± 22,4 11,8 ± 16,0 р13 & lt- 0,001
мИЛ-10 231,1 ± 187,7 92,5 ± 83,8 199,8 ± 181,0 р13 = 0,002
сИЛ-1РА 1971,4 ± 2477,1 1566,3 ± 2944,0 938,8 ± 1054,7
мИЛ-1РА 11 773,8 ± 7077,1 20 236,3 ± 10 060,5 20 101,9 ± 11 358,9
сАТ к ИНФ-а Нет данных 0,4 ± 1,3 0
мАТ к ИНФ-а Нет данных 0,4 ± 1,3 0
Таблица 3 Уровень продукции колониестимулирующих факторов в дебюте или прогрессии и ремиссии лимфопролиферативных заболеваний, М ± а
Содержание цитокина, пг/мл Контрольная группа 1 (п = 51) Пациенты в дебюте или прогрессии 2 (п = 54) Пациенты в ремиссии 3 (п = 22) р
сГ-КСФ 0,5 ± 1,1 54,8 ± 159,6 7,1 ± 10,5 р12 = 0,001
мГ-КСФ 441,0 ± 186,5 661,2 ± 731,5 591,6 ± 683,6
сГМ-КСФ 0,4 ± 0,6 3,7 ± 6,8 1,2 ± 2,0 р12 & lt- 0,001 р13 = 0,010
мГМ-КСФ 54,4 ± 33,8 105,8 ± 211,3 96,6 ± 130,9
зирование [18]. Вероятно, поэтому продукция этих колониестимулирующих факторов усилена в дебюте или прогрессии лимфопролиферативных заболеваний. Наличие противоопухолевой активности у ГМ-КСФ и Г-КСФ, а также ее механизмы при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ММ и ДВККЛ требует дальнейшего изучения.
Выявленное в нашей работе повышение спонтанной продукции ИЛ-18 при ММ, спонтанной и митогениндуцированной при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, а также ДВККЛ в фазе дебюта или прогрессии, возможно, связано с тем, что нарушение продукции данного цито-кина и/или его рецепторов опухолевыми клетками в некоторых случаях способствует росту опухоли, как показано при ХЛЛ [10]. В зарубежных исследованиях [11, 16] сывороточный уровень ИЛ-18 коррелирует с более тяжелыми стадиями заболевания, повышенным уровнем ангиогенных цитокинов при ММ, плохим прогнозом при ММ и ДВККЛ.
Обнаружено, что у пациентов с ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ДВККЛ в фазе дебюта или прогрессии уровень VEGF больше, чем в норме. Известно, что VEGF увеличивает продолжительность жизни опухолевых клеток, а
также стимулирует неоангиогенез, сопровождающийся угрозой метастазирования. В итоге прогрессирует опухоль, развивается резистентность к химиотерапии и уменьшается выживаемость [17]. В данном случае высокий уровень продукции VEGF связан с ростом злокачественной опухоли и метастазированием.
Увеличение спонтанной продукции ИЛ-8 у пациентов с ММ в дебюте или прогрессии заболевания связано с тем, что этот провоспа-лительный цитокин играет ключевую роль в неоангиогенезе и опухолевой прогрессии [19]. Так, в работе Кики I. й а1. [20] сывороточное содержание ИЛ-8 было повышено в дебюте ММ по сравнению с группой контроля.
Факт снижения спонтанной и митогенин-дуцированной продукции ИЛ-2 при ММ, ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, а также ДВККЛ в дебюте или прогрессии заболевания требует дальнейшего изучения. В то же время известно, что миеломные клетки продуцируют избыточное количество трансформирующего ростового фактора-р, который подавляет ИЛ-2-опосре-дованную Т-клеточную пролиферацию и, соответственно, противоопухолевый иммунитет [12].
Взаимоотношения между развивающейся опухолью и иммунной системой оцениваются неоднозначно. Считается, что в определенных обстоятельствах иммунная система не только не отторгает опухоль, но участвует в ее развитии. Так, изначально у пациента с онкологической патологией возникают негативные изменения в иммунной системе, вызванные расстройством обмена веществ — «метаболической иммуно-депрессией». При этом одним из ключевых патогенетических факторов развития этих изменений являются провоспалительные цитокины. По ходу опухолевой прогрессии организм все в большей степени использует универсальный вариант реакции — воспалительный тип ответа на новообразование [1].
Ремиссия лимфопролиферативных заболеваний, достигнутая в результате проведенной химиотерапии, сопровождается снижением продукции про- и противовоспалительных цитоки-нов. С одной стороны, это связано с применением преднизолона и цитостатиков, входящих в схемы лечения. Иммунодепрессивный эффект цитостатических препаратов в основном связан с подавлением кроветворения [6]. Влияние глюкокортикостероидов на иммунную систему опосредовано наличием специфических глю-кокортикоидных рецепторов на лимфоидных клетках. Под воздействием стероидов происходит снижение количества лимфоцитов в периферической крови. При этом глюкокортикосте-роиды вызывают апоптоз незрелых или активированных Т- и В-лимфоцитов, значительно уменьшают продукцию ИЛ-2, в результате чего происходит снижение ИЛ-2-зависимого фосфо-рилирования различных протеинов. Это приводит к подавлению пролиферации Т-клеток. Кроме того, глюкокортикостероиды подавляют Т-клеточную активацию посредством угнетения продукции ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-6 и других цитоки-нов. Поскольку глюкокортикостероиды подавляют синтез цитокинов и другими клетками, происходит снижение функции Т-хелперов, Т-супрессоров, цитотоксических Т-лимфоцитов и, в целом, иммунных реакций.
Выраженное действие оказывают глюкокор-тикостероиды на миграцию, секрецию и функциональную активность макрофагов и моноцитов. Учитывая то, что Т-хелперы, Т-супрессоры, цитотоксические Т-лимфоциты и макрофаги непосредственно участвуют в секреции цитокинов [15], очевидно, что это приводит к снижению продукции последних.
С другой стороны, снижение уровня спонтанной и митогениндуцированной продукции про- и противовоспалительных цитокинов в
ремиссии лимфопролиферативных заболеваний позволяет рассматривать данный факт как возможный дополнительный критерий оценки прогноза.
Повышенная продукция Г-КСФ и ГМ-КСФ при лимфопролиферативных заболеваниях в фазе частичной или полной ремиссии, вероятно, имеет компенсаторный характер в ответ на угнетение миелоидного ростка после проведенной химиотерапии. Известно, что выработка Г-КСФ и ГМ-КСФ происходит по принципу обратной связи и увеличивается, в частности, при нейтро-пении [2].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Изменения баланса цитокинов при ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ММ, а также ДВККЛ однотипны и обусловлены фазой заболевания: дебютом, прогрессией или ремиссией. Дебют или прогрессия лимфопролифератив-ных заболеваний сопровождается повышением уровня ряда провоспалительных цитокинов, за исключением ИЛ-2, продукция которого понижена.
На фоне химиотерапии в ремиссии лимфо-пролиферативных заболеваний наблюдается преимущественно снижение уровня провоспали-тельных и противовоспалительных цитокинов.
Уровень колониестимулирующих факторов повышен в дебюте или прогрессии ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов, ММ и ДВККЛ, а также в ремиссии ХЛЛ и НХЛ из малых лимфоцитов.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Антонов В. Г., Козлов В. К. Патогенез онкологических заболеваний: иммунные и биохимические феномены и механизмы. Внеклеточные и клеточные механизмы общей иммунодепрессии и иммунной резистентности // Цитокины и воспаление. 2004. 3. (1). 8−19.
2. Владимирская Е. Б. Механизмы кроветворения и лейкемогенеза. М., 2007. 150 с.
3. Жевак Т. Н., Чеснокова Н. П., Шелехова Т. В. Закономерности изменений цитокинового статуса при хроническом лимфолейкозе и их роль в патогенезе прогрессирующих форм заболевания // Саратовский науч. -мед. журн. 2012. 8. (2). 203−209.
4. Запорожан В. Н. Молекулярная генетика в клинической медицине: достижения и перспективы // Журн. АМН Украши. 2003. 9. (4). 638−648.
5. Козлов В. А., Борисов А. Г., Смирнова С. В., Савченко А. А. Практические аспекты диагностики и лечения иммунных нарушений. Новосибирск, 2009. 274 с.
6. Переводчикова Н. И. Руководство по химиотерапии опухолевых заболеваний. М., 2011. 512 с.
7. Рыжикова С. Л., Дружинина Ю. Г., Рябиче-ва Т.Г., Вараксин Н. А. Стандартизация методики определения продукции цитокинов клетками крови ex vivo // Клин. лаб. диагностика. 2011. (11). 49−53.
8. Рябичева Т. Г., Вараксин Н. А., Тимофеева Н. В. и др. Испытания иммуномодуляторов в системе ex vivo // Новости «Вектор-Бест». 2006. 4. (42). 12−14.
9. Серебряная Н. Б., Новик А. А., Волошин С. В., Новицкий А. В. Клиническое значение некоторых цитокинов при злокачественных неходжкинских лимфомах // Цитокины и воспаление. 2002. 1. (3). 21−26.
10. Airoldi I., Raffaghello L., Cocco C. Heterogeneous expression of interleukin-18 and its receptor in B-cell lymphoproliferative disorders deriving from naive, germinal center, and memory B lymphocytes // Clin. Cancer Res. 2004. 10. (1, Pt. 1). 144−154.
11. Alexandrakis M.G., Passam F.H., Sfiridaki K. et al. Interleukin-18 in multiple myeloma patients: serum levels in relation to response to treatment and survival // Leuk. Res. 2004. 28. (3). 259−266.
12. Campbell J.D., Cook G., Robertson S.E. et al. Suppression of IL-2-induced T cell proliferation and phosphorylation of STAT3 and STAT5 by tumor-derived TGF beta is reversed by IL-15 // J. Immunol. 2001. 167. 553−561.
13. Chauhan D., Hideshima T., Anderson K. Cy-tokines in multiple myeloma. Therapeutic implications // Cytokines in the Genesis and Treatment of Cancer. Part II. Totowa: Humana Press Inc., 2007. 181−197.
14. Durie B.G., Salmon S.E. A clinical staging system for multiple myeloma. Correlation of measured myeloma cell mass with presenting clinical features, response to treatment, and survival // Cancer. 1975. 36. (3). 842−854.
15. Franchimont D. Overview of the actions of glucocorticoids on the immune response: A good model to characterize new pathways of immunosuppression for new treatment strategies // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2004. 1024. 124−137.
16. Goto N., Tsurumi H., Kasahara S. Serum in-terleukin-18 level is associated with the outcome of patients with diffuse large B-cell lymphoma treated with CHOP or R-CHOP regimens // Eur. J. Haematol. 2011. 87. (3). 217−227.
17. Kaiser R., Dubovy P., Haninec P. Vascular endothelial growth factor // Cesk. Fisiol. 2011. 60. (2). 48−51.
18. Kaspar M., Trachsel E., Neri D. The antibody-mediated targeted delivery of interleukin-15 and GM-CSF to the tumor neovasculature inhibits tumor growth and metastasis // Cancer Res. 2007. 67. (10). 4940−4948.
19. Kline M., Donovan K., Welik L. et al. Cytokine and chemokine profiles in multiple myeloma- significance of stromal interaction and correlation of IL-8 production with disease progression // Leuk. Res. 2007. 31. (5). 591−598.
20. Kuku I., Bayraktar M.R., Kaya E. et al. Serum proinflammatory mediators at different periods of therapy in patients with multiple myeloma // Mediat. Inflam. 2005. 3. 171−174.
21. Penafuerte C., Bautista-Lopez N., Boulassei MR. et al. The human ortholog of granulocyte macrophage colony-stimulating factor and interleukin-2 fusion protein induces potent ex vivo natural killer cell activation and maturation // Cancer Res. 2010. 70. (14). 6106.
STUDY OF CYTOKINE BALANCE IN LYMPHOPROLIFERATIVE DISORDERS
Natalya Petrovna DOMNIKOVA122 Tatyana Yur'-evna DOLGIKH1, Yuliya Aleksandrovna D'-YACHKOVA2, Elena Evgen'-evna PETRUSENKO1, Tatyana Borisovna KUZNETSOVA2, Evgeniy Vladimirovich SHOLENBERG1, Oleg Vadimovich RESHETNIKOV3, Svetlana Leonidovna RYZHIKOVA4
1 Institute of Regional Pathology and Pathomorphology SB RAMS 630 117, Novosibirsk, Timakov str., 2
2 State Novosibirsk Regional Clinical Hospital 630 087, Novosibirsk, Nemirovich-Danchenko str., 130
3 Institute of Internal Medicine SB RAMS 630 089, Novosibirsk, Boris Bogatkov str., 175/1
4 Joint Stock Company «VECTOR-BEST»
630 117, VECTOR-BESTPO BOX492, Novosibirsk-117
Spontaneous and mitogen-stimulated production of pro- and anti-inflammatory cytokines in 76 patients with chronic lymphocytic leukemia, non-Hodgkin'-s lymphoma of small lymphocytes with tumor bone marrow, multiple myeloma and diffuse large B-cell lymphoma was investigated over the course of chemotherapy. The onset or progression is accompanied by increased level of several inflammatory cytokines, except for IL-2, which production is reduced. The level of pro- and anti-inflammatory cytokines is mainly reduced at remission. Production of colony-stimulating factors increased in onset or progression, as well as in remission of lymphoproliferative diseases.
Key words: ccytokines, chronic lymphocytic leukemia, non-Hodgkin'-s lymphoma of small lymphocytes with tumor bone marrow, multiple myeloma, diffuse large B-cell lymphoma.
Domnikova N.P. — doctor of medical sciences, professor, head of laboratory of molecular cellular and immunomorphological basis of oncohematology, head of hematology department with aseptic wards, e-mail: n_domnikova@mail. ru
Dolgikh T. Yu. — senior researcher, e-mail: tatyana. yurevna. dolgikh@yandex. ru
D'-yachkova Yu.A. — physician of hematology department with aseptic wards, e-mail: dyachkova_yuliya@mail. ru Petrusenko E.E. — senior researcher, e-mail: elena_petrusenko@list. ru
Kuznetsova T.B. — physician of hematology department with aseptic wards, e-mail: tata1979k@mail. ru Sholenberg E.V. — researcher, e-mail: tevton1350@rambler. ru Reshetnikov O.V. — leading researcher, e-mail: reshetnikov_ov@mail. ru Ryzhikova S.L. — researcher, e-mail: sv_ryzhikova@mail. ru

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой