Морфогенез перицеллюлярного фиброза печени у больных хроническим вирусным гепатитом c, ассоциированным со стеатозом печени

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

ІПАіГіРЛРТіІЯ
ОРИГІНАЛЬНІ ДОСЛІДЖЕННЯ
УДК 616. 36−002. 17:[616. 36−002. 2−022. 6+616. 36−003. 826]-091.8 В.А. Туманский1, Ю.А. Шебеко1, Е.А. Громенко2, С.В. Фень1
Морфогенез перицеллюлярного фиброза печени у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени
'-Запорожский государственный медицинский университет,
2Запорожское областное патологоанатомическое бюро Ключевые слова: хронический вирусный гепатит С, стеатоз печени, фиброз, цирроз печени.
Изучение патоморфологических особенностей фиброза печени у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени, показало, что, в отличие от перисинусоидально-центролобулярного и портально-септального фиброза печени, характерного для вирусного гепатита С без стеатоза, у больных хроническим вирусным гепатитом С со стеатозом печени в зонах максимального стеатоза гепатоцитов и стеатокист вначале развивается очаговый перицеллюлярно-дольковый фиброз, который в дальнейшем прогрессирует в перицеллюлярный внутридольковый тяжелый фиброз печени.
Морфогенез перицелюлярного фіброзу печінки у хворих на хронічний вірусний гепатит С, асоційований зі стеатозом печінки
В. О. Туманський, Ю. О. Шебеко, О. О. Громенко, С.В. Фень
Вивчення патоморфологічних особливостей фіброзу печінки у хворих на хронічний вірусний гепатит, асоційований зі стеатозом печінки показало, що, на відміну від перисинусоїдально-центролобулярного і портально-септального фіброзу, притаманного хронічному вірусному гепатиті С без стеатозу, у хворих на хронічний вірусний гепатит С зі стеатозом печінки в зонах максимального стеатозу гепатоцитів і стеатокіст спочатку розвивається вогнищевий перицелюлярно-дольковий фіброз, який у подальшому прогресує в перицелюлярний внутрішньодольковий тяжкий фіброз печінки.
Ключові слова: хронічний вірусний гепатит С, стеатоз печінки, фіброз, цироз печінки.
Патологія. — 2012. — № 2 (25). — С. 33−35
Morphogenesis of pericellular liver fibrosis in patients with chronic viral hepatitis C associated with hepatic steatosis
V.A. Tumanskiy, YuA. Shebeko, E.A. Gromenko, S. VFen'-
The research of pathomorphological features of liver fibrosis in patients with chronic viral hepatitis C associated with hepatic steatosis has shown that as opposed to cases of perisinusoidal-central-lobular and portal-septal fibrosis, typical for chronic viral hepatitis C without steatosis, in patients with chronic viral hepatitis C with steatosis in areas of maximal hepatocyte steatosis and steatic cysts firstly focal pericellular-lobular fibrosis develops which then progresses into pericellular intralobular severe liver fibrosis.
Key words: chronic viral hepatitis C, hepatic steatosis, fibrosis, liver cirrhosis.
Pathologia. 2012- № 2 (25): 33−35
В настоящее время большинство исследователей избегают применения термина «стеагогепагоз» (жировой гепатоз), основанного на концепции гепатоза Р. Рессле (1930), как обменно-метаболическом повреждении гепатоцитов без воспалительных изменений в печени, так как в динамике жирового гепатоза выделяется три микроскопически идентифицируемые стадии: простой жировой инфильтрации печени (раннего стеатоза), жировой дистрофии и некроза гепатоцитов с лимфоцитарно-лейкоцитарной инфильтрацией печени (стадии стеатогепатита), стадия фиброза печени (В.В. Серов, М. А. Пальцев и др., 1998). По совокупности клинических и патоморфологических данных в последние годы выделяется неалкогольная жировая болезнь печени (первичный и вторичный неалкогольный стеатогепатит), алкогольный стеатогепатит и стеатоз печени, ассоциированный с ХВГ С (И. Дамианов, 2006-
А. Steven et al., 2009- В. Joung et al., 2o11).
Хронический вирусный гепатит С (ХВГ С) вместе с алкогольным и неалкогольным стеатогепатитом являются основными причинами развития фиброза печени и его прогрессирования в цирроз с такими смертельными осложнениями, как печеночно-клеточная недостаточность, кровотечение, гепатоцеллюлярная карцинома
© В. А. Туманский, Ю. А. Шебеко, Е. А. Громенко, С. В. Фень, 2012
(М. Биущак е! а1., 2007- М. А. Андрейчин и соавт., 2010).
Особый интерес с этиопатогенетических и клинических позиций представляет ХВГ С, ассоциированный со стеатозом печени, который гистологически диагностируется у 30−70% больных ХВГ С [7]. Доказано, что 3 генотип вируса гепатита С ассоциирован с развитием стеатогепатита, инсулинорезистентности и нарушением липидного обмена в печени [8,9], в свою очередь, прогрессирующий стеатоз печени в 50% случаев усугубляет течение вирусного гепатита [10,11], способствует развитию тяжелого фиброза и цирроза печени [12,13], повышает риск возникновения гепатоцеллюлярной карциномы, а также снижает эффективность антивирусной терапии [13,14].
В последние годы активно изучают патогенетические механизмы воздействия разных генотипов вируса гепатита С на прогрессию стеатоза печени, тяжелого фиброза и цирроза печени, гепатоцеллюлярной карциномы [8,9,14,15]. Тем не менее, проблема развития тяжелого фиброза и цирроза печени со смертельными осложнениями у больных ХВГ С, ассоциированным со стеатозом печени, требует дальнейшего глубокого изучения.
Цель работы
Изучить патоморфологические особенности фиброза
печени у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени.
Материалы и методы исследования
Проведено комплексное гистологическое, гистохимическое, иммуногистохимическое исследование тре-панобиоптатов печени 20 больных ХВГ С 23−68 лет, у которых при микроскопии диагностирован стеатоз печени и по клиническим данным исключено чрезмерное употребление алкоголя. Условным контролем были трепанобиоптаты печени 25 больных вирусным гепатитом С без стеатоза печени и трепанобиоптаты печени 5 пациентов, не страдавших ХВГ С и стеатозом печени. Ткань печени фиксировали в забуференном 10% формалине, заливали в парафин, на ротационном микротоме НМ 3600 изготавливали серийные гистологические срезы толщиной 3−4 мкм. В срезах ткани печени, окрашенных гематоксилином и эозином, по количеству внутридольковых очагов иммуноклеточного киллинга, количеству и протяженности перипортальных иммуно-клеточных ступенчатых некрозов оценивали иммуно-клеточную активность, а также диагностировали стеатоз печени по наличию стеатокист, гепатоцитов с мелко- и крупновакуольной жировой дистрофией. Степень стеатоза печени определяли по системе D.E. Kleiner (2005): S0 — жировая инфильтрация & lt-5% гепатоцитов в поле зрения, стеатоз отсутствует- S1 — жировая инфильтрация =5−33% гепатоцитов в поле зрения, слабый стеатоз- S2
— жировая инфильтрация =33−66% гепатоцитов в поле зрения, умеренный стеатоз- S3 — жировая инфильтрация & gt-66% гепатоцитов в поле зрения, тяжелый стеатоз [16]. Локализацию и распространенность фиброза печени оценивали в срезах гепатобиоптатов, окрашенных по методу Ван Гизон и трихром-Массон. В парафиновых срезах печени непрямым иммунопероксидазным методом с применением моноклональных антител и системы визуализации DAKO En Vision+ с диаминобензидином изучена экспрессия a-гладкомышечного актина (a-SMA) в активированных перисинусоидальных звездчатых клетках печени (ЗКП), коллагенов I и IV типа и CD68+ активированных макрофагов Купфера.
Результаты и их обсуждение
Проведенные исследования показали, что стеатоз печени при ХВГ С характеризуется значительной мелко-крупновакуольной дистрофией гепатоцитов в разных зонах печеночных долек, а также формированием мелких стеатокист в зонах максимального мелкокрупновезикулярного стеатоза гепатоцитов.
Известно, что вирус гепатита С способствует развитию стеатоза гепатоцитов, участвуя в регуляции липидного обмена печени на различных уровнях (A. Gordon et al., 2005- C.Y. Dai et al., 2008- TJ. Cross et al., 2009), однако пока не удается разграничить стеатоз, вызванный непосредственно вирусом гепатита С, и метаболический стеатоз, которым могут одновременно страдать больные ХВГ С, так как в таких ситуациях чаще всего у больных регистрируют инсулинорезистентность, гипергликемию, гиперлипидемию и другие метаболические нарушения. Все в совокупности приводит к увеличению уровня ли-пополисахаридов в крови, к избыточному накоплению свободных жирных кислот в гепатоцитах и к развитию оксидативного стресса [17]. Развитию оксидативного стресса также способствует вирус гепатита С, нарушая
опосредованный ИЬЛ-ІІ иммунный ответ [18]. Таким образом, нарастает мелко-крупновакуольный стеатоз гепатоцитов.
Установлено, что по мере нарастания от слабого (81) до умеренного (82) мелко-крупновакуольного стеатоза печеночных клеток в дольках печени у больных ХВГ С появляются конгломератные очаги иммуноклеточного киллинга нескольких гепатоцитов со значительным стеатозом, а также возрастает количество мелких стеато-кист (рис. 1, цв. вкладка 1). Наиболее вероятно, что тяжелый стеатоз гепатоцитов инициирует иммуноклеточный киллинг этих клеток. В ранее опубликованных работах [19,20] показано, что в очаге иммуноклеточного киллинга гепатоцит окружается СБ8+ Т-лимфоцитами-киллерами, одиночными МК-клетками и СБ68+ макрофагами, осуществляющими киллинг (уничтожение) гепатоцитов, погибающих путем апоптоза или некроза. Результаты гистохимических исследований доказали, что в участках конгломератного киллинга гепатоцитов в дольках формируются мелкие локусы фиброза (рис. 2, цв. вкладка 1).
Высокий уровень липополисахаридов в крови, стеатоз и усиление перекисного окисления липидов в гепатоци-тах активируют макрофаги Купфера. При иммуногисто-химическом анализе установлено, что к гепатоцитам со значительным мелко- и крупновакуольным стеатозом мигрируют перисинусоидальные СБ68+ макрофаги. Окружая поврежденные гепатоциты, макрофаги Купфера приобретают отросчатую форму, увеличивают объем цитоплазмы и отростков, что свидетельствует об их высокой фагоцитарной активности. Наиболее ярко этот процесс выражен в очагах формирования стеатокист (рис. 3, цв. вкладка 1).
Известно, что СБ68+ активированные макрофаги Куп -фера являются основными продуцентами тромбоцитар-ного фактора роста (РБвР)-предоминантного митогена для активированных а-8МЛ+ перисинусоидальных ЗКП и мощного фиброгенного цитокина ТвР-р1 [21,22]. Усиление стеатоза гепатоцитов и активация секреции фиброгенных цитокинов (ТвР-Р1, РБвБ, ангиотензин-ІІ, лептин, ІЬ1а, ІЬ1р, ТМБ-а и др.) гепатоцитами, лимфоцитами и новыми популяциями фиброгенных клеток печени приводит к увеличению общего количества активированных а-8МЛ+ перисинусоидальных ЗКП в дольках печени у больных ХВГ С, которые локализуются вокруг гепатоцитов со значительным стеатозом, а также вокруг стеатокист (рис. 4, цв. вкладка 1) [21−24]. Параллельные гистохимические и иммуногистохими-ческие исследования показали, что на этапе умеренного (82) мелко-крупновакуольного стеатоза печеночных клеток именно вокруг стеатокист увеличивается число фиброгенных а-8МЛ+ перисинусоидальных звездчатых клеток Ито, синтезирующих избыток коллагена и других молекул межклеточного матрикса, а также формируются очаги внутридолькового неравномерного фиброза с накоплением коллагена І и ІУ типа, идентифицируемого в микропрепаратах, окрашенных по Ван-Гизон и трехцветным методом Массона (рис. 5, цв. вкладка 2).
Результаты параллельного микроскопического и им-муногистохимического анализа экспрессии а-8МЛ и коллагена ІУ типа показали, что при тяжелом стеатозе гепатоцитов (83) у больных ХВГ С в биоптатах печени регистрируется значительное увеличение количества
активированных a-SMA+ перисинусоидальных звездчатых клеток вокруг гепатоцитов с выраженным стеатозом, что приводит к развитию тяжелого внутридолькового перицеллюлярного фиброза с избыточным накоплением вокруг пораженных клеток печени коллагена IV типа (рис. б, цв. вкладка 2). Активация синтеза a-SMA+ звездчатыми клетками коллагена и других молекул межклеточного матрикса приводит к развитию тяжелого и распространенного внутридолькового перицеллюлярно-перисинусоидального фиброза печени.
Проведенные ранее гистохимические и иммуногисто-химические исследования [25] показали, что у больных ХВГ С без стеатоза печени активируются иные механизмы фиброгенеза и развивается портально-септальный или перисинусоидально-центролобулярный фиброз печени.
Таким образом, у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени, развивается вначале очаговый перицеллюлярно-дольковый фиброз печени в очагах максимального стеатоза ге-патоцитов и появления мелких стеатокист, который в дальнейшем прогрессирует в субтотальный тяжелый вну-тридольковый перицеллюлярно-перисинусоидальный фиброз печени с портальной гипертензией.
Выводы
У больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным с умеренным стеатозом печени (S2), формируется внутридольковый очаговый фиброз в участках конгломератного киллинга гепатоцитов, а также в локусах максимального стеатоза гепатоцитов и образования мелких стеатокист.
На этапе тяжелого стеатоза гепатоцитов (S3) у больных ХВГ С регистрируется значительное увеличение количества активированных a-SMA+ перисинусоидальных звездчатых клеток вокруг гепатоцитов с выраженным стеатозом, и формируется субтотальный тяжелый внутридольковый перицеллюлярно-перисинусоидальный фиброз печени с портальной гипертензией.
Список литературы
1. Патологическая анатомия: курс лекций / [В.В. Серов, М. А. Пальцев, В. А. Варшавский и др. ]- под ред. В. В. Серова, М. А. Пальцева. — М.: Медицина, 1998. — 640 с.
2. Дамианов И. Секреты патологии [пер. с англ] / И. Дамианов.
— М.: ООО «Мед. информ. агентство», 2006. — 816 с.
3. Steven А. Core pathology / А. Steven, J. Love, I. Scott. — Third Ed. — MOSBY Elsevier, 2009. — 632 p.
4. Joung B. Wheaters Basic Pathology / B. Joung, W. Stevart, G. O’Dowd. — Fifth Ed. — CHURCHILL LIVINGSTONE Elsevier, 2011. — 337 p.
5. Вірусні гепатити і рак печінки / [М.А. Андрейчин, В.І. Дрижак, О. В. Рябоконь, В.С. Копча]. — Тернопіль: ТДМУ, 2010. — 188 с.
6. Duvnjak L. The metabolic syndrome — an ongoing story / L. Duvnjak, M. Duvnjak // J. Physiol. Pharmacol. — 2009. — Vol. 60, suppl. 7. — P. 19−24.
7. Perumalswami P. Steatosis and progression of fibrosis in untreated patients with chronic hepatitis C infection / P. Perumalswami, D.E. Kleiner, G. Lutchman [et al.] // Hepatology. — 2006. — Vol. 43, № 4, — P. 780−787.
S. Enjoji M. Metabolic Disorders and Steatosis in Patients with Chronic Hepatitis C: Metabolic Strategies for Antiviral
Treatments / M. Enjoji, M. Kohjima, K. Kotoh [et al.] // Int J Hepatol. — 2012. — Режим доступу: http: //www. ncbi. nlm. nih. gov/pmc/articles/PMC3373124/
9. Qiang G. Lipid Droplet Binding of Hepatitis C Virus Core Protein Genotype 3 / G. Qiang, R. Jhaveri // ISRN Gastroenterol. — 2012. — Режим доступу: http: //www. ncbi. nlm. nih. gov/pubmed/22 844 606
10. Lonardo A. Steatosis and hepatitis C virus: mechanisms and significance for hepatic and extrahepatic disease / A. Lonardo, L.E. Adinolfi, P. Loria [et al.] // Gastroenterology. — 2004. -Vol. 126, № 2. — P. 586−597.
11. PowellE.E. Steatosis: co-factor in other liver diseases. / E.E. Powell, J.R. Jonsson, A.D. Clouston // Hepatology. — 2005. -Vol. 42, № 1. — P. 5−13.
12. Cross T.J. The impact ofhepatic steatosis on the natural history of chronic hepatitis C infection / T.J. Cross, A. Quaglia, S. Hughes [et al.] // J Viral Hepat. — 2009. — Vol. 16, № 7. — P. 492−499.
13. Ripoli MImpact of HCV genetic differences on pathobiology of disease / M. Ripoli, V. Pazienza // Expert Rev Anti Infect Ther. — 2011. — Vol. 9, № 9. — P. 747−759.
14. Hui J.M. Insulin resistance is associated with chronic hepatitis C virus infection and fibrosis progression / J.M. Hui, A. Sud, G.C. Farrell [et al.] // Gastroenterology. — 2003. — Vol. 125. № 6. — P. 1695−1704.
1З. Jhaveri R. Domain 3 of hepatitis C virus core protein is sufficient for intracellular lipid accumulation // R. Jhaveri, G. Qiang, A.M. Diehl // J Infect Dis. — 2009. -Vol. 200, № 11. — P. 1781−1788.
16. Kleiner D.E. Decision and validation of a histological scoring system for nonalcoholic fatty liver disease / D.E. Kleiner, E.M. Brunt, M. van Natta [et al.] // Hepatology. — 2005. — Vol. 41.
— P. 1313−1321.
17. Степанов Ю. М. Стеатоз печени и неалкогольный стеато-гепатит: современный взгляд на патогенез, диагностику и лечение / Ю. М. Степанов, А. Ю. Филиппова // Здоров’я України. — 2004. — № 103. — Режим доступу: http: //health-ua. com/articles/977. html
18. Hepatitis C virus core and nonstructural proteins induce fibrogenic effects in hepatic stellate cells / R. Bataller, Y.H. Paik, J.N. Lindquist [et al.] // Gastroenterology. — 2004. -№ 126. — P. 529−540.
19. Туманский В. А. Иммуноклеточный киллинг: морфогенез и последствия для больных хроническим вирусным гепатитом / В. А. Туманский, М. А. Шишкин, Ю. А. Шебеко // Патологія. — 2008. — Т. 5, № 3 — С. 110−112.
20. Туманский В. А. Патогенно индуцированный апоптоз гепатоцитов при хроническом вирусном гепатите: молекулярные механизмы и микроскопическая диагностика /
В. А. Туманский, Ю. А. Шебеко // Патологія. — 2008. — Т. 5, № 3 — С. 29−34.
21. Bonner J.C. Regulation of PDGF and its receptors in fibrotic diseases / J.C. Bonner // Cytokine Growth Factor Rev. — 2004.
— Vol. 15, № 4. — P. 255−273.
22. Ghatak S. Oxidative stress and hepatic stellate cell activation are key events in arsenic induced liver fibrosis in mice /
S. Ghatak, A. Biswas, G.K. Dhali [et al.] // Toxicol. Appl. Pharmacol. — 2010. — Vol. 251, № 1. — Р. 59−69.
23. Gieling R.G. Fibrosis and cirrhosis reversibility — molecular mechanisms / R.G. Gieling, A.D. Burt, D.A. Mann // Clin. Liver Dis. — 2008. — Vol. 12, Iss. 4. — P. 915−937.
24. Fibroblasts derive from hepatocytes in liver fibrosis via epithelial to mesenchymal transition / M. Zeisberg, C. Yang, M. Martino [et al.] // J. Biol. Chem. — 2007. — Vol. 282. — P. 23 337−23 347.
2З. Шебеко Ю. А. Особенности морфогенеза и прогрессии фиброза и цирроза печени у больных хроническим вирусным гепатитом С: автореф. дис. … к. мед. паук: спец. 14. 03. 02 «Патологическая анатомия» / Ю. А. Шебеко — З., 2011. — 22 с.
Сведения об авторах:
Туманский В. А., д. мед. н., профессор, зав. каф. патологической анатомии и судебной медицины с основами права ЗГМУ Шебеко Ю. А., к. мед. н., ассистент каф. патологической анатомии и судебной медицины с основами права ЗГМУ Громенко Е. А., зав. патологоанатомическим отделением № 3 Запорожского областного патологоанатомического бюро.
Фень С. В., студент 6 курса 1 медицинского факультета ЗГМУ
Надійшла в редакцію 29. 08. 2012 р.
Рис. 1. Конгломератные очаги иммуноклеточного киллинга гепатоцитов и стеатокисты при ХВГ С и в2 стеатозе печени. Окраска гематоксилином-эозином. Ув. х400.
конгломератных очагов иммуноклеточного киллинга гепатоцитов при ХВГ С и Б2 стеатозе печени. Окраска по Ван-Гизон. Ув. х400.
к
.1 V
М
• & lt-# 1
і: $
¦С '-
і
КзЦ
}
.И & quot-. '- і
' І & lt-*'-• Т і # '- Л '
Г г Ч.
* ч Л і
VI. 'і м

[ '- /?_" — Т* - *
& lt- ! V
Рис. 3. Увеличение количества и размеров С068+ макрофагов в очаге формирования стеатокист. Апй-068. Ув. х800.
(Рис. 1−4 к статье В. А. Туманеного, Ю. А. Шебеко, Е. А. Громенко, С. В. Фень «Морфогенез перицеллюлярного фиброза печени у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени», с. 33−35)
Патологія, 2012, № 2 (25) Кольорова вкладка 1
Рис. 4. Концентрация активированных а-8МА+ перисинусо-идальных ЗКП вокруг гепатоцитов с выраженным стеатозом и стеатокист. АпК-а-БМА. Ув. х400.
Рис. 5. Очаговый перицеллюлярно-перисинусоидальный Рис. 6. Тяжелый внутридольковый перицеллюлярный фиброз
фиброз в зоне стеатокист при ХВГ С и S2 стеатозе печени. печени и значительное накопление коллагена IV типа вокруг
Окраска трихромным методом Массона. Ув. х400 гепатоцитов при ХВГ С и S3 стеатозе печени. Anti-Collagen
IV. Ув. х400.
(Рис. 5, 6 к статье В. А. Туманеного, Ю. А. Шебеко, Е. А. Громенко, С. В. Фень «Морфогенез перицеллюлярного фиброза печени у больных хроническим вирусным гепатитом С, ассоциированным со стеатозом печени», с. 33−35)
Рис. 1. Помірна експресія С0Х2 в ядрах поверхневих і ямкових шлункових епітеліоцитів (а), виражена експресія (б) в ядрах келихоподібних клітин і стовпчастих епітеліоцитів (стрілки) при хронічному атрофічному гастриті з неповною КМ (а) і з повною стадією КМ (б). Імуногістохімічне маркування СбХ2: а — х200, б — х400.
Рис. 2. Негативне маркування СОХ2 (стрілки) в осередках неповної КМ (а, б) та ділянці повної КМ (в), що межує з низькодиференційованою аденокарциномою. Імуногістохімічне маркування СОХ2: а, б — х400, в — хЮО.
(Рис. 1, 2 до статті С. В. Вернигородського, Л.В. Дегтярьової «Роль транскрипційного фактора СйХ2 у виникненні кишковоїметаплазіїшлунка», с. 36−39)
Патологія, 2012, № 2 (25) Кольорова вкладка 2

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой