Иммуногистохимическое исследование опухолей центральной нервной системы

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

Б. Б. Жетписбаев
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОПУХОЛЕЙ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ
АО «Республиканский научный центр нейрохирургии», г. Астана
Immunohistochemistry study is very important in diagnosis of tumors of central nervous system. This method provides the exactly defining of tumor histogenesis, nosological way of tumors, helps to identify the primary tumor to metastasis, identify the prognosis of tumor disease, malignant transformation of cells, the possibility of targeted therapy, identify the sensitivity of tumors to chemotherapeutic drugs and radiation therapy. In difficult cases for histological verification it is not recommended to define the diagnosis on a microscopic picture with ordinary light microscopy, because it can cause serious consequences for the patient.
Достижения современной онкологии, в том числе и нейроонкологии, во многом обусловлены современными методами исследования с помощью рентгеновской компьютерной томографии и магнитно-резонансной томографии. Рутинный метод гистологической верификации опухолей по-прежнему остается решающим для определения, как тактики (объем оперативного вмешательства), так и стратегии (прогноз, лучевая и иная терапия, повторные вмешательства и т. д.) в лечении этой группы больных. Тщательно собранный анамнез, возраст больного, локализация опухоли, ее КТ и МРТ отображение (число очагов, распространенность, кистозные и перифокальные изменения, отложения солей кальция), мнение нейрохирурга во время операции (консистенция, наличие некрозов, кровоизлияний, связь с окружающими тканями и т. д.) макроскопический вид удаленного материала и его микроскопическое строение в подавляющем большинстве случаев позволят установить адекватное патогистологическое заключение. К этой группе, составляющей до 85% всех наблюдений можно отнести большинство типических астроцитом, глиобластом с выраженными характерными признаками злокачественности, ряд типических олигодендроглиом, медуллобластом, «классических» клеточно-отростчатых эпенди-мом, выразительных ганглиоцитом и ганглиглиом, часть доброкачественных мезенхимальных опухолей, доброкачественных менингиом, аденомы гипофиза, краниофарингиомы и типические гер-миномы [1, 7, 8]. В небольшом количестве случаев (менее 15%) гистологическая верификация опухолевого процесса крайне затруднительна и не зависит от опыта исследователя. В эту группу входят — изоморфноклеточная глиобластома, лимфо-мы, примитивные нейроэктодермальные опухоли, в том числе разные варианты нейробластом, метастазы низкодифференцированного рака, папиллярная глионейрональная опухоль, глиосаркома,
атипическая тератоидно-рабдоидная опухоль, все варианты злокачественных сосудистых и мышечных образований, перинейромы, все варианты злокачественной опухоли периферического нервного ствола, плеоморфная ксантоастроцито-ма, центральная нейроцитома [1, 7, 8]. В связи с трудностью верификации вышеперечисленных опухолей на светооптическом уровне необходимо проведение иммуногистохимического метода исследования.
Иммуногистохимическое исследование (далее ИГХ) — метод микроскопического исследования тканей, обеспечивающий наиболее специфическое выявление в них искомых веществ и основанный на обработке срезов маркированными специфическими антителами к выявляемому веществу, которое в данной ситуации служит антигеном. Этот метод основан на реакции антиген-антитело. Термин «иммуногистохимия» включает в себя два корня — «иммуно», что имеет отношение к антителам, используемым в данном методе, и «гисто», обозначающий ткань. Впервые применение ИГХ на тканях, залитых в парафин, было осуществлено в 1974 году Taylor и коллегами.
В зависимости от способа определения антигена, различают прямой и непрямой метод ИГХ [2]. Прямой метод — подразумевает прямую реакцию меченых антител с антигенами ткани. Данная техника является быстрой, простой и осуществляется в один этап, но обладает низкой чувствительностью из-за небольшой амплификации сигнала, поэтому наиболее широкое применение получил непрямой метод. Непрямой метод подразумевает связывание первичных немеченых антител с желаемым антигеном, с последующим реагированием вторичных меченых антител с первичными антителами. Непрямой метод более чувствительный, чем прямой метод, из-за достижения амплификации сигнала. Модификациями непрямого метода являются метод PAP, ABC и SLAB.
При существовании различных методик ИГХ, вся процедура может быть разделена на 2 этапа: подготовка образцов и окрашивание. Подготовка включает в себя взятие материала, фиксацию, заключение тканей, приготовление слайдов, восстановление эпитопа, блокирование эндогенной пероксидазы и связывания с неспецифическими эпитопами. Окрашивание включает иммунодетекцию, контрастирующую окраску и заключение слайдов. Дальнейшая визуализация осуществляется с помощью обычного светового или флуоресцентного микроскопа в зависимости от используемых антител. Принципиальным отличием ИГХ от других методов иммунологической диагностики, использующих реакцию антиген-антитело, является структурная специфичность исследования. Это означает, что в реакции оценивается не только наличие сигнала (есть окрашивание или нет) и его сила (интенсивность окрашивания), но и пространственное распределение сигнала в гистологическом препарате (окрашивание ядра, цитоплазмы, мембран клеток и других структурных элементов).
В нейронкологии применение ИГХ крайне обязательно, так как данный метод позволяет определить гистогенез опухолей, нозологический вариант новообразования, выявить первичную опухоль по метастазу, определить прогноз опухолевого заболевания, злокачественную трансформацию клеток, возможность таргетной терапии, выявить чувствительность опухоли к химиопрепаратам и лучевой терапии [2].
Для диагностики первичных внутричерепных новообразований чаще всего используют следующие антитела: для всех глиом — глиальный фибриллярный кислый белок (GFAP) — для нейроэктодермальных опухолей — белок S 100- для нейрональных опухолей — нейрон-специфическая энолаза (NSE), белок нейрофиламентов (NF), антитело специфичное для нейробластом (NB84a) — общий лейкоцитарный антиген (LCA) — лимфомы- эпителиальный мембранный антиген (ЕМА) — опухоли сосудистых сплетений, аденомы гипофиза, менингиомы, краниофарингиомы- синаптофизин (Syn) — нейрональные и нейроэндокринные опухоли, нейробластома- хромогранин, А (Crom A) — ней-
роэндокринные опухоли- виментин (У1т) — мезенхимальные опухоли- десмин (Реэ) — мышечные опухоли- маркер клеточной пролиферации К1−67
— используется практически во всех случаях, позволяет прогнозировать темп роста опухоли и реакцию опухоли на проводимую химиотерапию, К1−67 так же является независимым прогностическим фактором в отношении рецидивирования у больных опухолевого процесса [3].
При определении метастатических опухолей ЦНС в большинстве случаев также необходимо применение ИГХ метода исследования, с использованием антител к различным тканеспецифичным антигенам. Наиболее достоверным является использование маркеров достаточно специфичных для эпителия (цитокератины, ЕМА, БЕР-Ер4), меланомы (Ме1ап А, НМБ45, тирозиназа), антигенов — группа цитокератинов (СК), виментин, десмин, мышечно-специфический актин (МБА), гладкомышечный актин (БМА), СР 31, СР 34, СР 45, СР 57, СР 99, СР 117, простат-специфичный антиген (РБА), раковый эмбриональный антиген (СЕА), тиреоидный фактор транскрипции (ТТР-1), антитела к рецепторам эстрогенов и прогестерона и ряд других [4, 5, 6, 7, 8]. При ИГХ исследовании следует учитывать, что цитокератины могут выявляться и в глиомах, эпендимомах и хориоидкар-циномах, а эпителиальный мембранный антиген в части злокачественных формах лимфом. По мнению А. Г. Коршунова, наиболее решающим маркером для этих целей является БЕР-Ер4 [4].
Таким образом, ИГХ исследование играет важнейшую роль в диагностике опухолей ЦНС. Данный метод позволяет с точностью определить гистогенез опухолей, нозологический вариант новообразования, выявить первичную опухоль по метастазу, определить прогноз опухолевого заболевания, злокачественную трансформацию клеток, возможность таргетной терапии, выявить чувствительность опухоли к химиопрепаратам и лучевой терапии. В сложных для гистологической верификации случаях не рекомендуется устанавливать диагноз по микроскопической картине при помощи обычной световой микроскопии, так как это может быть чревато серьезными последствиями для пациента.
ЛИТЕРАТУРА
1. 1. Мацко Д. Е. Соколова И.А. Роль 6.
иммуногистохимии в современной нейроонкологии. — Материалы конференции «Поленовские чтения». // СПб. 2006 г.
2. George L. Kumar, Lars Rudbeck Иммуногистохимические методы. // Перевод с 7. английского языка под редакцией Г. А. Франка и П. Г. Малькоса. — М., 2011 г.
3. Саркисян М. Д. Индекс пролиферативной
активности Ki 67 при злокачественных
опухолях. // Архив патологии, 2006 г.
4. Коршунов А. Г., Лахтеева С. В. 8.
Иммуногистохимическое изучение экспрессии маркеров в метастатических опухолях головного мозга. // Вест. новых. мед. технологий
— 1997, № 3.
5. Мацко Д. Е. Коршунов А.Г. Атлас опухолей ЦНС. //СПБ, 1998 г.
Коршунов А. Г., Лахтеева С. В.
Иммуногистохимическое изучение экспрессии тенасцина в метастатических опухолях головного мозга. // Вест. новых. мед. технологий
— 1997, № 3.
Коршунов А. Г. Иммуногистохимия в дифференциальной диагностике первичных и метастатических опухолей головного мозга. // Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей под реакцией С. В. Петров и Н. Т. Райхлин. — Казань, 2004 г, с 171−175. Мацко Д. Е. Иммуногистохимическая диагностика первичных и метастатических опухолей центральной нервной системы. // Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей под реакцией С. В. Петров и Н. Т. Райхлин. — Казань, 2012 г.
Т? ЖЫРЫМ
Иммуногистохимияльщ зерттеу ортальщ нерв жYйесiнщ ісігін диагностикалауда ма^ызды рел ат^арады. Аталтан адіс ісіктщ гистоге-незін, жа^адан калыптасудыщ нозологиялы^ нус^асын дэл аны^таута, метастаз бойынша бастап^ы ісікті ай^ындаута, ісік ауруы болжа-мын, жасушалардыщ затерлі трансформаци-ясын, таргетті терапия мYмкiндiгiн аны^таута,
ісіктердіи химиялык препараттарта жэне сэулел1 терапията сезімталдыFын айкындаута мYмкіндік береді. КYPделі гистологиялык верификация жатдайларында карапайым жарыкты микроскопия аркылы микроскопиялык кeрініс бойынша диагноз-ды белгтеуге ке^ес берілмейді, eйткені бул пациент Yшін со^ы кеселге ушырайтын салдарта экеп сотуы мYмкін.
РЕЗЮМЕ
Иммуногистохимическое исследование играет важнейшую роль в диагностике опухолей центральной нервной системы. Данный метод позволяет с точностью определить гистогенез опухоли, нозологический вариант новообразования, выявить первичную опухоль по метастазу, определить прогноз опухолевого заболевания, злокачественную трансформацию клеток, возможность
таргетной терапии, выявить чувствительность опухоли к химиопрепаратам и лучевой терапии. В сложных для гистологической верификации случаев не рекомендуется устанавливать диагноз по микроскопической картине при помощи обычной световой микроскопии, так как это может быть чревато серьезными последствиями для пациента.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой