Иммуногистохимическое изучение иннервации сосудистых сплетений боковых желудочков головного мозга человека

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

10. Dukor P., Bianco C., Nussenzweig V Tissue localization of lymphocytes bearing a membrane receptor for antigen-antibody-complement complexes // Proceedings of the National Academy of Sciences. — 1970. — V 67. — № 2. — P. 991−997.
11. Furuoka H., Ito H., Hamada M., Suva T., Saton H., Itacura Ch. Immu-nocytochemical Component of Endocrine Cells in Pancreaslslets of Horses // Jpn. J. Vet. Sci. — 1989. — № 51 (1). — P. 35−43.
12. Jaffe E.S., Shevach E.M., Sussman E.H., Frank M., Green I., Berard C.W. Membrane receptor sites for the identification of lymphoreticular cells in benign and malignant conditions // Br. J. Cancer. — 1975. — № 31. — Suppl. II. — P. 107.
13. Jo'-nsson A. -C. Regulatory peptides in the pancreas of two species of elasmobranchs and in the Brockmann bodies of four teleost species // Cell Tissue Res. — 1991. — № 266. — P. 163−172.
14. John H. Youson, Azza A. Al-Mahrouki. Ontogenetic and Phylogenetic Development of the Endocrine Pancreas (Islet Organ) // Fishes Department of Zoology and Division of Life Sciences. University of Toronto at Scarborough, Scarborough. Ontario M1C 1A4 Canada Accepted. General and Comparative Endocrinology. — 1999. — № 116. — P. 303−335.
15. Leonard J.V. Sharks of the world an annotated and illustrated catalogue of shark species known to date FAO // Species Catalogue for Fishery Purposes. — 2001. — № 1. — Vol. 200 100. — Rome, Italy. FAO. — P. 175−176.
16. Shields D., Blobel G. Cell-free synthesis of fish preproinsulin, and processing by heterologous mammalian microsomal membranes // Department of Cell Biology, Rockefeller University. New York. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1977. — Vol. 74. — № 5. — P. 2059−2063.
17. White T.T., Magee D.F. Perfusion of the Dog Pancreas with Bile Without Production of Pancreatitis // Annals of Surgery. — 1960. — P. 245−250.
18. Yang H., Wright, J.R., Jr. A method for mass harvesting islets (Brockmann bodies) from teleost fish // Cell Transpl. — 1995. — № 4. — P. 621−628.
ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ ИННЕРВАЦИИ СОСУДИСТЫХ СПЛЕТЕНИЙ БОКОВЫХ ЖЕЛУДОЧКОВ ГОЛОВНОГО МОЗГА ЧЕЛОВЕКА
© Юнеман О. А. *
Научно-исследовательский институт Морфологии человека РАМН, г. Москва
В работе представлены данные по изучению иннервации сосудистых сплетений боковых желудочков головного мозга человека. Были использованы антитела к нейрон-специфическому В-Ш тубулину, нейрон-специфической энолазе, основному белку миелина, синапсину, си-наптофизину, рецептору фактора роста нервов, NCAM и S-100. С по-
* Аспирант лаборатории Развития нервной системы.
мощью данных маркеров не удалось выявить нервы сосудов и собственные нервы сплетения, что дает основания предполагать существование другого пути регуляции состояния водно-солевого баланса головного мозга человека.
Впервые нервы сплетений были описаны Benedict в 1874 г. Он нашел, что нервы сплетения являются волокнами блуждающего нерва. Считается, что нервы сосудов сосудистых сплетений частично происходят от симпатических сплетений сонных и позвоночных артерий, частично от ветвей III, V, IX, X, XI и XII черепномозговых нервов. В сосудистых сплетениях имеются нервы сосудов и собственные нервы. Как и в мягкой мозговой оболочке, нервы сосудов обладают сложной морфологической структурой концевых аппаратов. В соединительной ткани стромы обнаружены волокна собственных нервов [5]. По другим данным в иннервации сосудистых сплетений принимают участие III, VI, IX, X и XI пары черепномозговых нервов [1].
Исследователи выделяют несколько этапов развития нервного аппарата сосудистых сплетений третьего и четвертого желудочков:
— этап внутриутробного развития с постепенным увеличением концентрации холин- и адренергических проводников-
— этап снижения концентрации нервных проводников на 1 году жизни, что связано с опережающим развитием сосудов-
— этап активного созревания от 2 года до 34 лет- на этом этапе концентрация волокон достигает предельных количественных параметров-
— этап стабилизации, в течение которого снижение или повышение концентрации не носят достоверного характера (то 34 до 54 лет) —
— этап снижения концентрации (достоверно отмечается на 6 десятке лет).
Нет качественных онтогенетических различий в формировании нервного аппарата сосудистых сплетений третьего и четвертого желудочков. Имеются количественные различия: показана большая концентрация хо-лин- и адренергических волокон на сплетениях третьего желудочка по сравнению со плетением четвертого желудочка [4].
По данным Дария нервный аппарат сосудистых сплетений боковых желудочков появляется на 3−4 месяце внутриутробного развития. Отмечены периоды более быстрого и более медленного роста нервных элементов [2]. После рождения параллельно с быстрым развитием сосудистых сплетений идет нев-ротизация всей массы органов и сосудов. В зрелом возрасте в сплетениях человека выявлен хорошо развитый нервный аппарат. Нервы могут встречаться под базальной мембраной, вблизи кровеносных сосудов и в стенках сосудов. Повсеместно встречаются миелиновые и безмиеэлиновые нервные волокна [3].
Материалы и методы. Работа проводилась на аутопсийном материале. Были исследованы сосудистые сплетения боковых желудочков 70 человек в возрасте от 38 до 80 лет. Был проведен гистологический анализ ткани, для чего были сделаны серийные срезы вдоль продольной плоскости сплетения и
каждый десятый срез покрашен по методу Маллори. Также были поставлены иммуногистохимические реакции с использованием следующих антител.
Таблица 1
Использованные антитела
Иантитела Разведение Производитель
Нейрон-специфический B-III тубулин (Neuronspecific B-III tubulin), кроличьи поликлональные 1: 1000, 1: 2000 Abcam
Нейрон-специфическая энолаза (Neuronspecific enolase), кроличьи поликлональные 1: 300, 1: 400 Abcam
Нейрон-специфическая энолаза (Neuronspecific enolase), мышиные моноклональные Ready to use Lab Vision
Рецептор к фактору роста нервов (Nerve growth factor receptor), мышиные моноклональные Ready to use Lab Vision
Основной белок миелина (Basic myelin protein), мышиные моноклональные Ready to use Lab Vision
Синапсин I (Synapsin I), кроличьи поликлональные 1: 200, 1: 400 Epitomics
Синаптофизин (Synaptophysin), кроличьи поликлональные 1: 200, 1: 400 Epitomics
NCAM, мышиные моноклональные 1: 500, 1: 1000 Abcam
S-100, кроличьи поликлональные 1: 300 Abcam
Для визуализации первых антител использовался набор Ultra Vision Detection System (Thermo Scientific). В качестве позитивного контроля к бета-Ш тубулину, нейрон-специфической энолазе, основному белку миэли-на, NCAM, NGFR и S-100 использовался мозг взрослого человека, к си-напсину I и синаптофизину — мозг песчанки.
В результате проведенных исследований не удалось обнаружить ни нервов сосудов, ни собственных нервов сплетений. Бета-III тубулин, нейрон-специфическая энолаза, основной белок миэлина и синапсин I выявлены не были. Не были также обнаружены рецепторы к фактору роста нервов, что соответствует данным Ross и Altar, Burton с соавторами, которые не обнаружили рецепторы к фактору роста нервов и Trk (тирозин ки-назе) в сосудистых сплетениях [6, 7].
Рис. 1. 8−100. а — в эпителии сосудистого сплетения, х 40- б — в строме сосудистого сплетения, х 40- в — негативный контроль, х 40
8−100 и NCAM были выявлены в цитоплазме клеток эпителия сосудистого сплетения (рис 1 а, 2 а). Это подтверждает данные о том, что эпителий сосудистого сплетения является произвоодным нейроэктодермы. Оба маркера и синаптофизин окрашивали также некоторые клетки в сосудах и строме
сплетения (рис. 1 б, 2 а, 3 а, б). По размерам, морфологической организации и локализации эти клетки соответствуют мастоцитам (тучным клеткам).
Полученные данные свидетельствуют о том, что у человека отсутствует нервная регуляция деятельности сосудистого сплетения и, соответственно, существует другой путь регуляции состояния водно-солевого баланса головного мозга.
Рис. 2. NCAM. а — в эпителии и строме сосудистого сплетения, х 40- б — негативный контроль, х 20
а б в
Рис. 3. Синаптофизин, а — в сосудах сплетения, х 40- б — в сосудах и строме сплетения, х 40- в — негативный контроль, х 20
Список литературы:
1. Автандилов Г. Г. Сосудистые сплетения головного мозга (морфология, функция, патология). — Нальчик, 1962. — 144 с.
2. Дарий А. А. Сосудистые сплетения боковых желудочков головного мозга человека и их иннервация на этапах онтогенеза: дисс. … канд. мед. наук. — Симферополь, 1988.
3. Дарий А. А. Взаимоотношения тканевых структур в сосудистых сплетениях третьего и четвертого желудочка головного мозга // Ктшчна та экспериментальна патолопя. — 2010. — Т. IX. — № 4 (34). — С. 27−31.
4. Иваненко М. Г. Иннервация сосудистых сплетений 3-го и 4-го желудочков головного мозга человека: дисс. … канд. мед. наук. — Владивосток, 1988.
5. Фридман А. П. Основы ликворологии. — Л., 1971. — 646 с.
6. Altar C.A., Burton L.E., Bennet G. L., Dugich-Djordjevich M. Recombinant human nerve growth factor is biologically active and labels novel high-affinity binding sites in rat brain // Neurobiology. — 1991. — Vol. 88. — P. 281−285.
7. Ross A.H. Identification of tyrosine kinase Trk as a nerve growth factor receptor // Cell regulation. — 1991. — Vol. 2. — Р. 685−690.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой