Предикторы воспаления при ревматоидном артрите

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 616. 72−002. 77−097−078:57. 083. 3
ПРЕДИКТОРЫ ВОСПАЛЕНИЯ ПРИ РЕВМАТОИДНОМ АРТРИТЕ
Каримова Г. Ф., Кабилова А. М., Исламгалеева З. М. ,
Хусаинова Л. Н., Мингазетдинова Л. Н.
ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России,
Уфа, e-mail: rektorat@bashgmu. ru
В статье приведены результаты обследования больныж ревматоидным артритом. Изучены показатели иммунной системы — субпопуляция лимфоцитов, xемокины моноцитов / макрофагов, определены основные пути иммунного реагирования и предикторы воспаления. Результаты исследования показали, что с нарастанием активности процесса и аутоиммунного воспаления при ревматоидном артрите развивается дисбаланс иммунной системы со значимым нарастанием цитотоксическиx лимфоцитов СД4+, на фоне снижения CD3+
Т — лимфоцитов, повышение уровня иммуноглобулина G. Отмечено, что формирование иммунного ответа идет по двум путям: Th1 клеточном и Th2 гуморальном. Однако с нарастанием активности РА определяется понижение активации Th1 пути, что свидетельствует о формировании Th2 пути иммунного ответа, где высоко значимо повышаются показатели цитокиновой сети — интерлейкин 1р (IL-1 р) и моноцитарно^емотакси-ческий протеин (MCP-1). По мере нарастания активности ревматоидного артрита IL-1 р и MCP-1 становятся основными предикторами аутоиммунного воспаления, определяя xронизацию процесса.
Ключевые слова: ревматоидный артрит, лимфоциты, цитокины, хемокины
INFLAMMATORY PREDICTORS IN RHEUMATOID ARTHRITIS
Karimova G.F., Kabilova A.M., Islamgaleyeva Z.M., Khusainova L.N. ,
Mingazetdinova L.N.
Bashkir Stae Medical University, Ufa, e-mail: rektorat@bashgmu. ru
В статье приведены результаты обследования больные ревматоидным артритом. Изучены показатели иммунной системы — субпопуляция лимфоцитов, xемокины моноцитов / макрофагов, определены основные пути иммунного реагирования и предикторы воспаления. Результаты исследования показали, что с нарастанием активности процесса и аутоиммунного воспаления при ревматоидном артрите развивается дисбаланс иммунной системы со значимым нарастанием цитотоксическиx лимфоцитов СД4+, на фоне снижения CD3+ Т — лимфоцитов, повышение уровня иммуноглобулина G. Отмечено, что формирование иммунного ответа, идет по двум путям: Th1 клеточного и Th2 гуморального. Однако с нарастанием активности РА определяется понижение активации Th1 пути, что свидетельствует о формировании Th2 пути иммунного ответа, где высоко значимо повышаются показатели цитокиновой сети — интерлейкин 1р (IL-1 р) и моноцитарно^емотакси-ческий протеин (MCP-1). По мере нарастания активности ревматоидного артрита IL-1 р и MCP-1 становятся основными предикторами аутоиммунного воспаления, определяя xронизацию процесса.
Keywords: rheumatoid arthritis, lymphocytes, cytokines, chemokines
Ревматоидный артрит (РА) относится к числу наиболее распространенных и тяжелых хронических воспалительных заболеваний, которое приводит к быстрой инвалидизации, сокращению продолжительности жизни [2, 3]. Это гетерогенное с точки зрения патогенеза заболевание, где дефекты клеточного иммунореагирования и гиперпродукция фактора некроза опухоли, а (ТОТ-а) являются важным, но далеко не единственным механизмом воспаления и тканевой деструкции [1, 4, 5].
Данные экспериментальных исследований свидетельствуют о фундаментальной роли В- лимфоцитов в иммунопатогенезе РА, где В-лимфоциты участвуют в активации СД4+ Т клеток по ТЪ-1 типу в синовиальной ткани, обладают способностью взаимодействовать с иммунными комплексами и «презентировать» широкий спектр аутоантигенов [7].
В связи с этим уточнение предикторов воспаления у больных РА остается акту-
альным в течение заболевания и выборе терапии.
Цель исследования — изучить характер воспаления у больных ревматоидным артритом в комплексной оценке субпопуляции лимфоцитов и моноцитарно/макрофа-гального фактора сыворотки крови.
Материалы и методы исследования
Под наблюдением находилось 56 больных, из них 42 (75%) женщины (средний возраст — 38,7 ± 4,03 лет, 14 (25%) мужчин (средний возраст — 43,2 ± 1,98 лет).
Все больные поступали в период обострения заболевания. Контрольную группу составили 18 здоровых доноров, сопоставимых с исследуемой группой по полу и возрасту.
Диагноз заболевания ставился на основании клинической картины и верифицировался при функциональных и лабораторных методах исследования (Д8К, 1983 г.).
Все пациенты на момент госпитализации были обследованы клиническими и иммунологическими методами и дали письменное согласие на исследование. Иммунологическое исследование включало определение субпопуляций лимфоцитов (СД4+,
СД8+, СД16+, СД25+, СД95+, HLA- DR+) с использованием моноклональных антител, сывороточных иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG) методом радиальной иммунодиффузии в геле по Mancini (1965), уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) по P. Falck (1979). Цитокиновый статус определяли по экспрессии провоспалительных цитокинов (TNF-a, IL-1 в, интерферон гамма — IFN-Y) при помощи иммуноферментного анализа в плазме крови с использованием тест-систем ООО «Вектор — Бест (г. С. -Петербург). Уровень иммуноферментов (моно-цитарно-хемотаксического протеина — MCP-1 и колониестимулирующего фактора — G-CSF) исследовали иммуноферментным методом трехфазного иммуно-ферментного анализа с использованием тест-систем ЗАО «Вектор — бест (Новосибирская область).
Статистическую обработку данных исследования проводили с помощью программного обеспечения STATISTICA for Windows (версии 6. 0), при множественных сравнениях учитывали соответствующую поправку (Гланс С., 1999- Реброва О. Ю., 2002). Сравнение количественных признаков в груп-
пах проводилось по критериям Крускала-Уоллиса, по ранговому критерию множественного сравнения и Манна-Уитни.
Результаты исследования и их обсуждение
Анализ субпопуляций лимфоцитов периферической крови выявил изменения у больных РА. Так, у больных с минимальной активностью РА субпопуляционные структуры не выходили за статистически значимые изменения и были близки к кон -трольной группе, в группе больных с умеренной активностью были уже значимые изменения со снижением СД3+ и повышением СД 4+ лимфоцитов (51,6 ± 0,5% и 42,5 ± 0,3%, р & lt- 0,05) при контроле (68,1 ± 1,4 и 39,7 ± 1,2% соответственно) при нарастании отношения СБ4+/СБ8+ до 1,7 ± 0,04 (в контроле 1,4 ± 0,04) (рисунок).
IK
Ист.
II ст.
I III ст.
лимфоциты CD4+ CD8+ HLA-DR CD25+ CD95+
Содержание лимфоцитов у больных ревматоидным артритом.
Примечание: I — минимальная активность РА- II — умеренная активность РА-
III — высокая активность РА- К — контрольная группа- достоверность различий * - р & lt- 0,05
У больных РА формирование иммунного ответа идет по двум путям: клеточного в виде выраженного увеличения Т-лимфоцитов (СБ4+) на фоне снижения СБ3+ Т лимфоцитов и гуморального с повышением уровня иммуноглобулина О (до 19,3 ± 2,3 и 26,0 ± 2,4 ед. соответственно активности при контроле 15,4 ± 1,4 ед.).
В целом снижение Т-лимфоцитов с цитотоксичностью (СБ3+, СБ8+) при высокой активности РА характеризует понижение активации ТЬ 1 (клеточного пути) с нарастанием гуморального (В-звена) пути иммунитета по мере повышения активности. Корреляционный анализ выявил множество прямых статистически значимых связей между основными субпопуляциями
лимфоцитов, показателями Т-клеточного и В-лимфоцитарного иммунитета, что свидетельствует о формировании ТЬ 2 (гуморального) пути и способствует развитию хронического воспаления. Так, НЬЛ-БЯ коррелирует с СБ8+, СБ16+ (г = 0,61-
г = 0,68 соответственно), СБ25+ с СБ4+, СБ16+ (г = 0,67- г = 0,73 соответственно), а ДО с СБ25 (г = 0,56), ЦИК — с СБ3+ (г = 0,63).
Была выявлена обратная связь показателей В-звена к антителам почечного антигена (АПА) (СБ3+, г = -0,59), что подтверждает формирование ТЬ2 (гуморального) пути иммунитета.
Нами также была изучена цитокиновая сеть как показатель, регулирующий функ-
циональное состояние клеток фагоцитарного звена иммунитета.
Исследование показателей способности клеток крови к продукции провоспали-тельных цитокинов (ТОТ-а, 1Ь-1 в, 1РК-У). участвующих в реакции воспаления, показало их повышение во всех группах больных.
Уровень интерлейкина 1 в (1Ь-1 в) высоко значимо превышал его значения в контрольной группе и составил для больных высокой активности 87,6 ± 5,34 пг/мл (в контроле — 11,6 ± 0,67 пг/млр & lt- 0,01) или был выше в 8 раз (табл. 1).
Также высоко значимо нарастал уровень экспрессии ТОБ-а 71,20 ± 5,62 пг/мл при высокой активности, до 43,54 ± 3,86 пг/мл -при умеренной активности, и до 18,10 ± 1,28 пг/мл при минимальной активности (в группе контроля 7,6 ± 0,89 пг/мл, р & lt- 0,01). Выявлена прямая корреляционная связь уровня ТОТ-а с активностью процесса (г = 0,48), болевым синдромом (г = 0,32). Полученные нами высокие показатели ТОТ-а и 1Ь-1 в у больных РА свидетельствуют о глубоких нарушениях цитокино-вого статуса у этих больных, что согласуется с данными других исследований [1, 6, 7].
Таблица 1
Уровень экспрессии цитокинов у больных ревматоидным артритом
Показатели IL-1 в пг/мл TNF-a пг/мл IFN-Y пг/мл
Контроль п = 16 11,6 і 0,67 7,6 і 0,89 39,6 і 6,74
РА I ст. активн. п = 8 22,4 і 4,68* 18,10 і І. 28* 48,2 і 4,48
РА II ст. активн. п = 26 47,2 і 7,63* 43,54 і 3,86** 62,0 і 4,50*
РА III ст. активн. п = 22 87,6 і 5,34** 71,20 і 5,62** 54,7 і
Примечание. Значения достоверны с группой контроля: * - р & lt- 0,05- ** - р & lt- 0,01- изучение хемокинов моноцитов/макрофагов МСР — 1 и в — С8Б в группе больных РА и сопоставление с результатами группы контроля представлено в табл. 2.
Установлен большой разброс показате- контрольной группы показало значимое лей МСР-1 в группе больных РА. Сопостав- увеличение сывороточного уровня хемоки-ление данных больных РА с показателями на МСР-1.
Таблица 2
Показатели цитокинов фагоцитоза и ангиогенеза у больных ревматоидным артритом
Показатели P Mean Confid 95 Confid + 95% Media Minim Maxim Q1 Q2
Больные п = 42 0,001 MCP — і пг/мл
318,36 175,6 679,3 298,64 52,65 489,10 148,20 371,50
Здоровые п = 16 143,83 46,1 240,2 109,79 -10,19 236,24 40,51 163,82
Больные п = 42 0,025 G-CSF пг/мл
26,51 12,15 38,87 18,67 1,99 148,30 8,32 33,27
Здоровые п = 16 7,13 -0,33 14,60 5,20 -10,19 46,14 -0,11 13,32
Примечание. Достоверность различий между группами с поправкой Kruskal-WaШs.
Наибольшие показатели отмечались у больных РА по содержанию МСР-1 и составили 298,64 ± 16,53 пг/мл, превышая контрольную группу (109,79 ± 36,06 пг/мл) в 2,5 раза, разброс результатов составил 52,65 и 489,10 пг/мл (в контроле — 10,19 и 236,24 пг/мл).
Исследование содержания фактора в-С8Б как показателя ангиогенеза определило его повышение в группе больных РА до 18,67 ± 3,58 пг/мл (при контроле 5,20 ± 1,16 пг/мл, р = 0,025), что подтверждало включение сосудистого русла и капиллярной сети в течение заболевания.
С целью определения направленности формирования иммунного ответа у больных РА была исследована продукция 1РК-У и 1Ь-1 в (табл. 3).
Отмечено увеличение 1БК-У значимо во 2 группе с тенденцией к повышению в 1 и 3 группах, но одновременно и более значимо нарастали показтели 1Ь-1 в до 87,6 ± 9,21 пг/мл (р & lt- 0,01) при высокой активности и до 23,5−46,5 пг/мл в группах с минимальной и умеренной активностью, превышая контроль в 2 и 4 раза.
Таблица 3
Продукция цитокинов клетками крови у больных ревматоидным артритом
Показатели Исследуемые группы
контроль 1 группа 2 группа 3 группа
IFN-Y, пг/мл 32,6 ± 6,74 48,2 ± 4,48 62,0 ± 4,5* 54,7 ± 5,4
IL-1 в, пг/мл 11,6 ± 2,30 23,5 ± 2,41* 46,5 ± 4,8** 87,6 ± 9,21**
Примечания: различия в группах статистически значимы относительно контроля: * -р & lt- 0,05- ** -р & lt- 0,01-
1 группа — больные РА минимальной активности-
2 группа — больные РА умеренной активности-
3 группа — больные РА высокой активности.
Полученные данные позволяют утверждать, что происходит активация Th1 пути иммунного ответа (IFN-Y), но нарастает активность Th2 (увеличение IL-1 в) с активностью заболевания.
В целом у больных РА иммунная защита характеризуется активацией врожденных факторов иммунитета с привлечением клеток фагоцитарного звена, формированием иммунного ответа вначале по Th1 пути (IFN-Y) и активацией гуморальной защиты по мере нарастания активности РА с нарастанием аутоиммунного воспаления. Предиктором воспаления при РА определены IL-1 в и MCP-1, которые опосредуют степень активности процесса.
Таким образом, данные настоящего исследования показывают пути иммунного реагирования при РА, где уже при минимальной активности начинают вовлекаться факторы воспаления как IL-1 в, THF-a и MCP-1.
По мере нарастания активности РА IL-1 в, MCP-1 становятся основными предикторами аутоиммунного воспаления с вовлечением Th2 пути иммунного реагирования, приводят к прогрессированию заболевания, утрате функции суставов.
Список литературы
1. Насонов Е. Л. Фармакотерапия ревматоидного артрита — взгляд 21 века. // Клиническая медицина. — 2005. -№ 6. — С. 8−12.
2. Насонов Е. Л. Новые направления терапии ревматоидного артрита: перспективы применения моноклональных антител к В — лимфоцитам. // Рус. Мед. Журнал. — 2006. -№ 14(25). — С. 1778−1782.
3. Gabriel S.E. The epidemiology of rheumatoid arthritis. // Rheum. DIS. Clin. North. Amer. — 2001. — № 27. — P. 269−281.
4. Ferestein G.S. The T — cell cometh A interplay between adaptive immunity and cytokine networks is rheumatoid arthritis // Y. Clin Ynvest. — 2004. — № 114. — P. 47174.
5. Scott D. L., Kingsley G.H. Tumor inhibitors for rheumatoid arthritis // New Engl. Y. Med. — 2006. — № 355. -P. 704−712.
6. Kotzin B.L. The role of B cells in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. // Y. Rheumato C. — 2005. — № 1. -P. 216−218.
7. Zhand Z., Bridges S.L. Pathogenesis of rheumatoid arthritis: role of B lymphocytes. // Rheum. Dis. Clin. North. Am. — 2001. — № 27. — P. 335−353.
References
1. Nasonov E.L. Farmakoterapija revmatoidnogo artrita -vzgljad 21 veka // Klinicheskaja medicina 2005. no. 6. pp. 8−12.
2. Nasonov E.L. Novye napravlenija terapii revmatoidnogo artrita: perspektivy primenenija monoklonal’nyh antitel k V — limfocitam // Rus. Med. Zhurnal 2006. no. 14(25). pp. 1778−1782.
3. Gabriel S.E. The epidemiology of rheumatoid arthritis // Rheum. DIS. Clin. North. Amer. 2001. no. 27. pp. 269−281.
4. Ferestein G.S. The T — cell cometh interplay between adaptive immunity and cytokine networks is rheumatoid arthritis // Y. Clin Ynvest. 2004. no. 114. pp. 471−474.
5. Scott D. L., Kingsley G.H. Tumor inhibitors for rheumatoid arthritis // New Engl. Y. Med 2006. no. 355. pp. 704−712.
6. Kotzin B.L. The role of B cells in the pathogenesis of rheumatoid arthritis. // Y. Rheumato C. 2005. no. 1. pp. 216−218.
7. Zhand Z., Bridges S.L. Pathogenesis of rheumatoid arthritis: role of B lymphocytes. // Rheum. Dis. Clin. North. Am. 2001. no. 27. pp. 335−353.
Рецензенты:
Никуличева В. И., д.м.н., профессор кафедры терапии и семейной медицины БГМУ, г. Уфа-
Сахаутдинова Г. М., д.м.н., профессор кафедры поликлинической терапии БГМУ, г. Уфа.
Работа поступила в редакцию 12. 04. 2013.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой