Изучение химического состава, противовоспалительного действия и токсичности Бузульника сибирского

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

Лекарственные растения
© ДУМА, А М, М9НХБА АТАР А., АМАРСАНАА Б., АЛТАНЧИМЭГ Д., НАРАНТУЯА С., МЯГМАР Л. -УДК 615. 322:633. 88. 03+615. 015.1 1
ИЗУЧЕНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА, ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО ДЕЙСТВИЯ И ТОКСИЧНОСТИ БУЗУЛЬНИКА СИБИРСКОГО
М. Думаа, А, Мвпхбаатар, Б. Амарсапаа, Д. Алтапчимэг, С. Нараптуяа, А, Мягмар.
(Институт общей и химической А Н Монголии, Улан-Батор, директор -д.х.н. Б. Пурэвсурэн, лаборатория природных соединений, зав. — лауреат Гос. премии, к.х.н. Я. Жамъянсан, Монгольский Государственный Медицинский Институт, ректор — проф. Ц. Лхагвасурэн, кафедра фармакологии, зав. -проф. Л. Мягмар)
Резюме. Изучен химический состав Бузульника сибирского произрастающего в Монголии. Ус-
тановлено противовоспалительное действие и сухого экстракта.
В Монголии произрастает 6 видов бузульника. Бузульник сибирский представляет собой многолетнее травянистое растение, широко распространенное в Монголии на сырых и болотистых прибережных лугах, в ивняках и ерниках, в сырых лиственничных лесах и на опушках в верхней части лесного пояса Прихувсугула, Хангая, Хэнтий и Монгол Даурии [ 1 ]. В этой работе мы провели исследования лишь одного вида Бузульника сибирского (Ligularia sibirica (L.) Cass.). Ранее были изучены и выделены биологически активные соединения, такие как эфирное масло, стероид, сапонин, флавоноид, которые содержатся в надземной части Бузульника сибирского [2]. Известно, что растения семейства сложноцветные (Composi-teae) обычно содержат нирролизидиновые алкалоиды. Изучение нирролизидиновых алкалоидов (ПА) Бузульника сибирского произрастающего в Монголии ранее не проводилось. Бузульник сибирский использовался в Монгольской и Тибетской традиционной медицине как противовоспалительное средство, при лечении легких и хронических тонзиллитов и туберкулёза [3,4].
Целью нашей работы явилось изучение состава нирролизидинового алкалоида содержащегося в надземной части Бузульника сибирского нроиз-• растающего в Монголии, а также определение токсичности и противовоспалительного действия водного раствора данного растения.
Материалы и методы
Материал, послуживший для исследования ПА был собран в августе 2001 года в окрестности Бугат сомона Булганского аймака. Пользуясь обычным методом из надземной части этого растения выделили сумму алкалоидов [5,6,7,8]. При исследовании суммы алкалоидов методом газожидкостной хроматографии было обнаружено присутствие 8−10 веществ с временем удерживания 4,0−28,87 мин. Далее методом жидкостной-хроматографии (150×3см силикагель 60, 0,04-
0,063 мм, Merck Darmstadt, Germany) системой
токсичность водного раствора, полученного из
растворителей дихлорметан-метанол (80: 20) выделено всего 38 фракций. Из 36-ой фракции нам удалось выделить 4 нирролизидиновых алкалоидов. с составом соответствующим формуле СюНрОзЫ и с молекулярной массой 199.
Эти алкалоиды были идентифицированы нами с известными алкалоидами туссилажин (1), изо-туссилажин (2), туссилажинин (3) и изотуссила-жинин (4).
Далее мы исходя из опыта Монгольской и Тибетской медицины поставили цель изучить влияние водного раствора бузульника на развитие экснерментального острого воспалительного процесса.
Опыты проведены на 27 белых мышах обоего пола массой 25,0−29,0 г прошедших двухнедельный карантин и, находившихся на обычном рационе питания. Животные были разделены на 3 группы, но 9. Мышам опытной группы вводили внутрибрюшинно водный раствор бузульника сибирского в эффективной химиотерапевтической дозе 22,7 мг/кг.
Через 30 минут после введения водного раствора Бузульника сибирского у обоих групп животных воспроизводили острую воспалительную реакцию субнлантарным введением овоальбуми-на в левую заднюю лапу, но методике МаПт [6].
Выраженность отечной реакции оценивали онкометрически при помощи нлетисмометра иВ 7140 (ШО Ва811с, Италия) через 30, 60, 120 мин после индукции воспаления.
Водный раствор. Бузульника сибирского вводили в течение 5 дней. Во всех опытах животные контрольных групп получали дистиллированную воду и 2% раствор амидопирина соответственно объему и способу введения изучаемых препаратов. Для всех полученных данных определяли среднее арифметическое значение (. М) и ошибку средней арифметической (т). Статическая обработка результатов выполнена с использованием ?-критерия Стьюдента.
Рис. 1. Газо-жидкостная хромагарамма суммы алкалоидов Бузудьника сдаирского.
Острая токсичность препарата Бузудьника сибирского изучали в опытах на 36 белых мышах в разных дозах при внутрибрюшинном введении, начиная с доз, не вызывающих заметных изменений в поведении животных, до доз, вызывающих летальный исход у всех мышей. На основании полученных результатов определялась средняя смертельная доза (ГБэо) но методу Г. Н. Першина [8].
Результаты и обсуждение Из надземной части Бузудьника сибирского произрастающего в Монголии выделены 4 ПА с составом соответствующей формуле С10Н1703М С помощью методов газ хроматографии с комбинацией с масс спектром (ОС-МБ) установлены что эти алкалоиды являются известными иод названием туссидажин (1), изотуссидажин (2), туссида-
жинин (3), изотуссидажинине (4) и ранее найдены в природе.
О
II
, С-ОСНз
. ОН
ах-
О
II
, с-осн3
. СНз
он
«С-ОСНз
., он -N-^7 чсн3
Таблица 13. Табпищ 14.
Показатели противовоспалительного действия Бузульника сибирского
Препарат Средние величины выраженности отека лапы до- и после влияния раствора Бузульника, мкл
До Через У г часа Через 1 час Через 2 часа
1 0,28+0,04 0,30+0,01 0,27+0,03 0,24+0,01
2 0,22−0,02 0,31+0,02 0,21−0,03 0,20−0,03
3 0,24−0,00 0,30+0,01 0,21−0,03 0,22−0,01
Л 4 0,26+0,02 0,31+0,02 0,25+0,01 0,24+0,01
Н 5 0,26+0,02 0,30+0,01 0,25+0,01 0,25+0,01
С 0 6 0,21−0,03 0,26−0,03 0,25+0,01 0,20−0,03
7 0,25+0,01 0,27−0,02 0,25+0,01 0,23−0,00
8 0,23−0,01 0,31+0,02 0,24−0,00 0,21−0,02
9 0,20−0,04 0,30+0. 01 0,25+0,01 0,20−0,03
I х. 2,15 2,66 2,18 2,10
М+т 0,24+0,0246 0,29+0,0177 0,24+0,0184 0,23+0,020
1 0,28+0,04 0,31−0,00 0,25−0,02 0,25−0,01
2 0,23−0,01 0,26−0,05 0,31+0,04 0,24−0,02
О 3 0,23−0,01 0,38+0,07 0,33+0,06 0,27+0,01
4 0,30+0,06 0,35+0,04 0,30+0,03 0,30+0,04
н 5 0,31+0,07 0,39+0,08 0,30+0,03 0,32+0,05
о 6 0,26+0,02 0,27−0. 04 0,23−0,04 0,24−0,02
ч 7 0,23−0,01 0,26−0,05 0,23−0,04 0,25−0,01
8 0,24−0,00 0. 26−0. 05 0,26−0,01 0,26−0,00
9 0,23−0,01 0,30−0,01 0,25−0,02 0,24−0,02
I X, 2,21 2,78 2,43 2,36
М+т 0,24+0,033 0,31+0. 048 0,27+0,032 0,26+0,026
1 0,17−0,07 0,51+0,02 0,43+0. 03 0,38+0,02
2 0,38−0,14 0,66+0,17 0,52+0,012 0,46+0,10
8 3 0,21−0,03 0,46−0,03 0,34−0,06 0,30−0,06
о 4 0,17−0,07 0,41−0,08 0,30−0,10 0,27−0,09
К 5 0,25+0,01 0,44−0,05 0,43+0,03 0,40+0,04
& lt-51 6 0,22−0,02 0,50+0. 01 0,47+0,07 0,31−0,05
о. 7 0,29+0,05 0,47−0,02 0,39−0,01 0,33−0,03
о4 8 0,19−0,05 0,54+0,05 0,33−0,07 0,43+0,07
9 0,35+0,12 0,43−0,06 0,41+0,01 0,37+0,01
Б X, 2,23 4,42 3,62 3,25
М+т 0,24+0,03 0,49+0,04 0,40+0,02 0,36+0,03
Далее мы исследовали влияние водного раствора препарата Бузульника на развитие экспериментального острого воспалительного процесса. Результаты исследования приведены в таблице 1.
|? Опытная Н Контроль? Амидопирина |
30 мин
60 мин
120 мин
Рис. 2. Противосналительное действие Бузульника сибирского.
Изучали токсичность препарата Бузульника сибирского в опытах на 36 белых мышах с массой 25−29 г, разделенных на 6 групп, но 6 животных. Острую токсичность у них вызвали внутрибрю-шинным введением препарата Бузульника сибирского в виде водного раствора в разных дозах. При внутрибрюшинном введении препарата в дозе 0,5 г/кг у некоторых мышей развивалась одышка, замедление движения. Токсические явления исчезали через час. После введения испытуемого препарата в дозе 0,75 г/кг, сразу после инъекции у всех мышей наблюдались одышка, через 7 минут появились судороги. При проведении эксперимента одна из 6 мышей погибла, у остальных наблюдаемые токсические явления исчезли через 14 часов. Третья группа, получившая в дозе 1,0 г/кг Бузульника сибирского отмечались также патологические признаки. У двоих из них наблюдалась гибель через 12 часов, остальные 3 восстановились до нормального состояния. При внутрибрюшинном введении препарата белым
мышам в дозе 2,5 г/кг через 3−5 минут развивалось общее угнетение, переходящее в коматозное состояние, при этом все животные погибли.
Таблица 2.
Показатели токсичности водного раствора Бузульника сибирского
Номер групп 1 2 3 4 5 6
Дозы препарата, г/кг 0,5 0,75 1,0 1,5 2,0 2,5
Число гибели 0/6 1/5 2/4 4/2 5/1 6/0
Гибель, в % 0 16,6 33,3 50,6 83,3 100
А+Ь 1,25 1,75 2,5 3,5 4,5
т-п 16,6 16,7 33,3 16,7 16,7
(а+Ь)(т-п) 20,75 29,23 83,25 58,45 75,15
LDi0 —
X (° + ~ „)
200
20,75 + 29,23 + 83,25,+58,45 + 75,15 266,83
= 1,334
200 200 Средняя смертельная (ЬВ50) доза при расчете, но методу Г. Н. Першина составила 1,334г/кг.
При фармакологических исследованиях водного раствора препарата Бузульника сибирского через 20 минут после введения оваальбумина в область конечности, у мышей можно было наблюдать экссудативный воспалительный процесс. На 30-ой минуте, в 1-ый и 2-ой час эксперимента
мы измеряли величину отёка (табл.1.). Как видно из таблицы, спустя 30 минут после опыта величина лапки увеличилась по сравнению с исходной на 82,8%. При дальнейшем наблюдении отёк с 1-го часа начал уменьшаться и снизился на 21,2% от максимальной величины, на 2-ом часу — на 31,2%.
При исследовании контрольной группы мышей, которым вводилась дистиллированная вода, на 30-ой минуте увеличился объем конечностей за счет отека на 25,4%, на 1-ом часу-71,2%, на 2-ом-отёк снизился и составлял 53,4%.
При исследовании сравнительной группы мышей, которым вводили 2% р-р амидопирин отёк снизился у них на 30-ой минуте на 84,0%, через час — на 63,0%, на 2-ом часу — на 12,6% в дозе 22,7 мг/кг и на 18,5% уменьшил воспалительную реакцию через 60 мин после индукции воспаления, однако эффект был непродолжителен и уменьшился до 15,4% ко 2-му часу.
Таким образом, установлено, что препарат Бузульника сибирского, произрастающий в Монголии оказывает слабое противовоспалительное действие на модели острого воспаления. Из этого следует, что эксперимент следует продолжить с увеличенными дозами.
Полученный результат токсичности в эксперименте Ь05о=1,334гр/Кг свидетельствует о том, что водный раствор Бузульника сибирского является мало токсичным препаратом.
THE STUDY OF CHEMICAL COMPOSITION OF LIGULARIA SIBIRICA (L.) CASS., GROWING IN MONGOLIA AND ITS ANTI-INFLAMMATORY ACTIVITY AND TOXICITY
M. Dumaa, A. Munkhbaatar, D. Altanchimeg, S. Narantuya. L. Myagmar
(Mongolian Institute of Chemistry and Chemical Technology)
Four pyrrolizidine alkaloids (PA) have been isolated from overground part ofLigularia sibirica (L.) Cass, of family Compositeae and it has been identified as a Tussilagine (I), Isotussilagine (II), Tussilaginine (III), Isotussilaginine (IV).
Moreover, Ligularia sibirica (L.) Cass, showed low anti-inflammatory influence on the model of acute proliferative inflammation and it'-s LD50= 1,3 3 4 g/kg. which confirmed that this species relates to the less toxic
plants.
Литература
1. Грубов М. И. Определитель сосудистых растений в Монголии. — Ленинград, 1982. — С. 254−256.
2. Ligaa U. & quot-Medicinal plants of Mongolia used in Mongolian traditional medicine& quot- KBA Press, S. Korea, 1996. — P. 273−274.
3. Boldsaikhan B“ Oyuntsetseg Ts. & quot-Dictionary of root elements for food and medicinal raco materials& quot- Ulaanbaatar, 2000. — P. 48, 154.
4. Хайдав Т., Чойжамц Д. & quot-Улсын нэр томъёоны комиссии мэдээ& quot- Улаанбаатар, 1965.
5. Mattocks. A.R. & quot-Chemistry and toxicology of pirrol-izidine alkaloids& quot- - 1964. — P. 317.
6. Roeder. E., Wiedenfeld. H» Yost, E. -y. Arch. Pharm. (Wienhemi). — 1984. — P. 317:403.
7. Bartkowski B. Schmetterlingspheromone mit Dihy-dropyiTolizin-struktur und Analitik von Otonecinalka-loiden. Dissertation, Bonn, 1996. — P. 54.
8. Беленский M. J1. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. — Jl. :1963. — С. 163.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой