Эффективность терапии клеточным продуктом острого инфаркта миокарда у крыс линии Wistar по данным биоэлектрической активности миокарда

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 616. 127−005. 8
ЭФФЕКТ^НОСТЬ ТЕРАПИИ КЛЕТОЧНЫМ ПРОДУКТОМ ОСТРОГО ИНФАРКТА МИОКАРДА У КРЫС ЛИНИИ WISTAR ПО ДАННЫМ БИОЭЛЕКТРИЧЕСКОЙ АКТтНОСТИ МИОКАРДА
1,2Лыков А.П., 1Кабаков А^., 1,2Повещеико О^., 1,2Боидареико Н.А., 1,2Повещеико А.Ф., 1Казаков О.B., 1,2Никоиорова Ю.B., 1,2Коиеиков B. ^
1ФГБУ «НИИКЭЛ» СО РАМН, Новосибирск-
2ФГБУ «ННИИПК им. акад. А.Е. Мешалкина» МЗ РФ, Новосибирск, e-mail: aplykov2@mail. ru
В работе исследована клиническая эффективность терапии клеточным продуктом (костномозговые-мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки — КM-MMCК, кондиционная среда от КM-MMCК) при экспериментальном остром инфаркте миокарда у крыс линии Wistar по данным мониторинга биоэлектрической активности миокарда. Показано, что введение интрамиокардиально вокруг зоны некроза миокарда клеточного продукта приводит к улучшению функциональной активности поврежденного при остром инфаркте миокарда кардиомиоцитов.
Ключевые слова: инфаркт миокарда, клеточный продукт, биоэлектрическая активность миокарда
EFFICIENCY OF THERAPY BY THE CELLULAR PRODUCT OF THE SHARP MYOCARDIAL INFARCTION AT RATS OF THE WISTAR LINE ACCORDING TO BIOELECTRIC ACTIVITY OF THE MYOCARDIUM uLykov A.P., 1Kabakov A.V., 1'2Poveshchenko O.V., 1'2Bondarenko N.A., 1'2Poveshchenko A.F., 1Kazakov O.V., 1'2Nikonoriva Y.V.,Konenkov V.I.
1Institute Clinical and Experimental Lymphology SB RAMS, Novosibirsk-
2FSBINNRI Circulation Pathology of E.N. Meshalkin MHRF, Novosibirsk, e-mail: aplykov2@mail. ru
We have studied the clinical efficacy of cellular therapy product (bone marrow multipotent mesenchymal stromal-cell — BM-MMSC, conditioned medium from BM-MMSC) in experimental acute myocardial infarction in Wistar rats according to the monitoring of bioelectric activity of the myocardium. It is shown that intramyocardial administration of myocardial necrosis around the cell product leads to improved functional activity damaged in acute myocardial infarction cardiomyocytes.
Keywords: myocardial infarction, cellular product, the bioelectrical activity of the myocardium
Сердечно-сосудистые заболевания, существенная роль отводится биологически
в частности острый инфаркт миокарда активным продуктам, секретируемых KM-
^M), являются основной причиной смерт- MMCK [7]. Однако не исследован клиниче-
ности во всем мире [5]. Недостаток капил- ский эффект введения кондиционной среды
лярной сети и перфузии после перенесенно- от KM-MMCK при ИM. Поэтому, целью ис-
го ИM приводят к апоптозу эндотелиоцитов, следования стало сравнительное изучение
что свою очередь ведет к увеличению зоны эффекта клеточного продукта при экспери-
инфаркта и дисфункции левого желудочка ментальном инфаркте миокарда у крыс ли-
[7]. Более того, ИM ведет к невосполнимой нии Wistar.
утрате части кардиомиоцитов и формирова-
Материалы и методы исследования
нию рубца, что также является пусковыми
факторами формирования сердечной недо- Эксперименты на лабораторных животных про-
статочности [7]. Таким образом, терапев- ведены в тоотаегстаии с «Принтам работ с ишоль-
тическии ангиогенез становится важной стратегией лечения сосудистой недостаточности при ИМ. Костномозговые мульти-
зованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12. 08. 1977 г. № 755) и с соблюдением принципов Хельсинской декларации ВМА (2000). Эксперимент
потенгаые мезенХималЬнЫе стромальные выполнен на 16 крысах-самках линии Wistar с массой
клетки (КМ-ММСК) ЭТО Эффекгивный кле- 300 г. Животные содержались на стандартной лабора-
точный продукт для терапии ИМ, о чем сви- торной диете и имели свободный доступ к воде. Ин-
детельствуют экспериментальные данные фаркт миокарда моделировался перевязкой левой пена животных и клинические исследования редней нисходящей коронарной артерии с отступом
у человека [3−7]. В основе терапевтическо- на 2−3 мм от основания ушка лигатурой под наркозом
го эффекта трансплантации КМ-ММСК Слетал в дше 3 шУет- Вибран С А., франция и Кси-
лазин в дозе 8 мг/кг- ЗАО «Нита-Фарм», Россия —
лежит регенерация миокарда, ангиогенез, апоптоз миокардиоцитов и подавление кардиального ремоделирования [4−7]. Показа-
внутрибрюшинно) и искусственной вентиляции легких с помощью аппарата искусственной вентиляции легких «Вита-1″. Оперативный доступ осуществляли
н° что в процессах регенерации миокарда, но методике [2]. Об успешной неревязке артерии су-
дили по изменению цвета миокарда и по отсутствию видимой перфузии ниже места перевязки артерии. Животные были разделены на следующие группы: 1 группа — инфаркт миокарда, 2 группа — инфаркт миокарда с интрамиокардиальным введением забуфе-ренного физиологического раствора (ЗФР) в 6 точках левого желудочка по 50 мкл/точка ниже места перевязки артерии, 3 группа — инфаркт миокарда с интра-миокардиальным введением КМ-ММСК в 5 точках левого желудочка по 80 000 клеток/точка ниже места перевязки артерии, 4 группа — инфаркт миокарда инфаркт миокарда с интрамиокардиальным введением кондиционной среды от КМ-ММСК в 5 точках левого желудочка по 50 мкл/точка ниже места перевязки артерии, по 4 животного в каждой группе. О развитие инфаркта миокарда также судили по данным ЭКГ, которые регистрировали электрокардиографом ЭК1Т-1/3−07 „Аксион“ со скоростью ленты 50 мм/ сек и вольтажом 20мВ/мм в трех стандартных и трех усиленных отведениях. ММСК от линии крыс Wistar (п=5) получали из клеток костного мозга бедренных костей. Ядросодержащие клетки КМ ресуспенди-ровали в среде DMEM (Биолот, СПб) и пропускали через фильтр (размер пор 80 мкм) для удаления клеточного дебриса, подсчитывали количество жизнеспособных клеток. Для получения КМ-ММСК ядросодержащие клетки КМ инкубировали в пластиковых флаконах (ТРР, Швейцария) в среде DMEM (Биолот, СПб), дополненной 100 мкг/мл гентамицина сульфата (Дальхимфарм, Россия), 2 мМ L-глютамина (1С^ США) и 15% FCS (фетальная телячья сыворотка- Нус1опе, США) при 37 °C в атмосфере 5% СО2. Через
48 часов неприкрепленные к пластику клетки удаляли, а прилипающую фракцию клеток культивировали до получения конфлюэнтного монослоя. Снятие КМ-ММСК при пассировании осуществляли с использованием 0,25% раствора трипсина/0,02% раствора ЭДТА. В экспериментах использовали КМ-ММСК от 2−4 пассажа. Кондиционную среду от КМ-ММСК собирали начина с 7 суток культивирования, разливали по аликвотам и хранили при — 70° С. Статистическую обработку данных проводили с использованием программы Statistica 6. 0, меры центральной тенденции и рассеяния описаны медианой (Ме), нижним (Lq) и верхним (Щ) квартилями- достоверность различия рассчитывалась по и-критерию Манна-Уитни, и принималась при значениях р & lt- 0,05 [1].
Результаты исследования и их обсуждение
Так как некротизированный миокард не участвует в возбуждении, поэтому на ЭКГ, зарегистрированных в отведениях с положительным электродом над зоной некроза, выявляется, прежде всего, нарушение процесса деполяризации желудочков — изменения комплекса QRS, характер которых зависит от глубины и локализации поражения миокарда. Как видно из таблицы 1, статистически значимые изменения в комплексе QRSI выявляются спустя 7 суток после индукции ИМ и сохраняются на 30 сутки эксперимента.
Таблица 1
Изменение значений комплекса QRS при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс
линии Wistar в динамике (в мм)
Значение комплекса до индукции инфаркта миокарда 16,0 (11,0 — 18,0)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
11,5 (6,0−14,0) 11,0 (9,0−12,0) 6,5 (5,0−16,0) 9,0 (7,5−11,0)* 8,5 (5,0−10,0)*
Значение комплекса ОКД1 до индукции инфаркта миокарда 18,0 (16,0 — 19,0)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
11,5 (9,0−13,5)* 11,0 (11,0−12,0)* 12,5 (11,0−16,0)* 12,0 (8,5−14,0)* 14,0 (8,5−18,0)
Значение комплекса до индукции инфаркта миокарда 4,0 (2,0 — 8,5)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
4,0 (1,0−8,0) 2,5 (-0,5−5,0) 5,0 (-2,0−6,5) 3,0 (2,0−4,0) 6,0 (0,5−8,0)
Значение комплекса до индукции инфаркта миокарда -16,0 (- 18,0 — -13,5)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
4,5 (-2,0−7,5) 4,0 (-1,0−8,0) -2,0 (-2,5−11,0) 4,0 (1,5−7,5) 2,5 (-5,5 — 6,5)
Значение комплекса рН5аЛ, т до индукции инфаркта миокарда 8,0 (2,5 — 11,0)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
4,5 (-2,0−7,5) 4,0 (-1,0−8,0) -2,0 (-2,5−11,0) 4,0 (1,5−7,5) 2,5 (-5,5−6,5)
Значение комплекса до индукции инфаркта миокарда 12,0 (10,5 — 12,0)
Значение комплекса после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
7,0 (6,5 — 10,5)* 6,5 (6,0 — 8,0)* 9,5 (4,5 — 10,5)* 7,0 (4,5 — 10,0)* 9,5 (6,0 — 15,0)
Примечание. * - достоверность различия со значением до индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05.
Статистически значимое уменьшение ширины комплекса QRSП выявляются через 30 минут после индукции ИМ и сохраняются до 7 суток наблюдения. Нами не выявлено статистически значимых изменений комплекса QRSПI на всех сроках эксперимента. Что касается изменения комплекса QRS в усиленных отведениях, то в аУЯ на ранних сроках наблюдения отмечено статистически значимое уменьшение ширины комплекса QRS. Не выявлено статистически значимых изменений ширины комплекса QRS в отведение аУЬ. В тоже время, в отведение аУБ выявлено статистически значимое уменьшение ширины комплекса QRS с момента индукции ИМ по 7 сутки включительно.
Таким образом, по изменению комплекса QRS на различные сроки наблюдения
видно, что после перевязки коронарной артерии у крыс линии Wistar развиваются некротические процессы в миокарде, которые с учетом локализации и возможной глубины были зарегистрированы на ЭКГ.
Известно, что основными признаками ишемии миокарда у человека по данным ЭКГ является изменения полярности, амплитуды и формы зубца Т, а также положения сегмента ЯЗ-Т, которые зависят от локализации зоны ишемии миокарда по отношению к полюсам регистрируемого отведения. Через 30 минут после индукции ИМ в I стандартном отведение выявлено статистически значимое увеличение высоты зубца Т, которое при последующих измерениях начиная со 2 суток и до конца эксперимента сменилось статистически значимым снижением высоты зуба Т ниже изолинии (табл. 2).
Таблица 2
Изменение значений зубца Т при экспериментальном инфаркте миокарда у крыс линии Wistar в динамике (в мм)
Значение зубца Т1 до индукции инфаркта миокарда 1,5 (1,0 — 3,0)
Значение зубца Т1 после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
3,0 (3,0 — б, 5)* 3,5 (1,5 — 5,0) -2,5 (-3,0 — -1,5)* -1,5 (-3,0 — 3,5)* -1,0 (-2,0 — -0,5)*
Значение зубца Тп до индукции инфаркта миокарда 4,0 (3,5 — 5,0)
Значение зубца Тп после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
5,5 (3,0 — 7,0)$, Л 3,0 (2,0 — 4,0)$ -1,0 (-2,0 — 3,0)* 2,0 (1,5 — 14,0)* 3,0 (1,5 — 4,0)*
Значение зубца Тш до индукции инфаркта миокарда 2,5 (2,0 — 3,0)
Значение зубца Тт после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
2,0 (1,5 — 3,0) 1,5 (1,0 — 2,5)*, Л,& amp- 2,5 (1,0 — 3,0) 3,0 (2,0 — 4,0) 3,5 (2,0 — 5,0)
Значение зубца ТоУВ до индукции инфаркта миокарда -3,0 (-3,5 — -2,5)
Значение зубца ТоУ1) после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
-5,0 (-б, 0 — -2,5)$, Л,& amp- -3,0 (-4,5 — 1,5) 1,5 (-2,5 — 2,5)* -0,5 (-2,0 — 1,5)* -0,5 (-1,5 — 0,5)*
Значение зубца ТоУТ до индукции инфаркта миокарда -0,5 (-1,5 — 0,5)
Значение зубца ТоУТ после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
1,5 (0,5 — 3,0)*,$, ЛД 2,0 (1,0 — 4,0)*,$, ЛД -2,5 (-3,0 — -1,5) -3,0 (-5 — -1,0)* -3,0 (-3,0 — -2,0)*
Значение зубца ТоУ» до индукции инфаркта миокарда 3,5 (3,0 — 3,5)
Значение зубца Т, после индукции инфаркта миокарда
через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
3,5 (3,0 — 5,0)#,$ 2,5 (1,5 — 3,0)* 1,0 (0,5 — 2,0)*Л,& amp- 3,0 (2,5 — 3,5) 3,0 (1,5 — 4,0)
Примечание. * - достоверность различия со значением до индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05- # - достоверность различия со значением через 2 часа после индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05- $ - достоверность различия со значением через 48 часов после индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05- Л — достоверность различия со значением через 168 часов после индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05 ' & amp- - достоверность различия со значением через 720 часов после индукции инфаркта миокарда р& lt- 0,05.
По данным мониторинга зубца Т во II стандартном отведение также выявлены статистически значимые изменения высоты и направленности его по отношению к изолинии на всех точках эксперимента. Что же касается изменений значений зубца Т в III отведение, то нами выявлено статисти-
чески значимое снижение высоты только через 2 часа после индукции ИМ, а в остальных точках эксперимента не выявлено статистически значимых различий. В aУR зубец Т на ранних сроках мониторинга за развитием ИМ выявил статистически значимое снижение ниже изолинии, которое на поздних точках
эксперимента сменяется тенденцией к повышению зубца Т над изолинией. Статистически значимое снижение от изолинии зубца Т выявлено через 30 минут от индукции ИМ у крыс в отведение аУЪ, которое меняется ее возвышением над изолинией через 2 часа и на поздних сроках опять отмечено снижение ниже изолинии. Также показано статистически значимое снижение зубца Т в отведение аУБ через 30 минут от момента индукции ИМ с последующим постепенным подъемом его над изолинией в ранние сроки эксперимента.
Таким образом, на основании изменения высоты и направленности зубца Т можно судить о формирование зоны некроза
миокарда, которое зависит от локализации и глубины ишемии миокарда.
Далее нами проведен анализ изменений ИМ с учетом типа проводимой терапии. Как видно из табл. 3, статистически значимые различия по ширине желудочкового комплекса QRS выявлены статистически значимые различия на различные сроки эксперимента и между различными группами животных с учетом вида проводимой терапии. В большинстве своем эти различия выявлены для групп, получавших терапию интрамиокардиальным введением либо КМ-ММСК, либо кондиционной среды от КМ-ММСК, как в стандартных, так и в усиленных отведениях.
Таблица 3
Эффективность терапии клеточным продуктом экспериментального инфаркта миокарда у крыс линии Wistar по данным комплекса QRS (в мм)
Параметры через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
QRSI
ИМ 11,5 (8,0 — 15,0) 11,0 (10,0 — 12,0) 10,5 (6,0 — 15,0) 9,5 (8,0 — 11,0)Л 10,0 (10,0 — 10,0)#, Л
ИМ+ЗФР 6,0 (-2,0 — 14,0) 6,25 (-1,0 — 13,5) 10,5 (5,0 — 16,0)Л 8,75 (7,5 — 10,0)Л 7,0 (5,5 — 8,5)Л
ИМ+ КМ-ММСК 9,5 (6,0 — 13,0) 10,0 (9,0 — 11,0) 13,25 (11,0 — 13,0)Л 13,25 (9,0 — 17,5)Л 8,5 (3,0 — 14,0)
ИМ+КС 11,5 (11,5 — 11,5) 11,0 (11,0 — 11,0) -1,5 (-1,5 --1,5) 3,0 (3,0 — 3,0) 5,0 (5,0 — 5,0)
QRSп
ИМ 9,5 (8,0 — 11,0)$, Л 13,25 (11,0 — 15,5) 15,75 (12,5 — 19,0)Л 12,25 (10,5 — 14,0)Л 16,25 (13,0 — 19,5)Л
ИМ+ЗФР 10,25 (9,0 — 11,5)Л 11,25 (10,5 — 12,0) 13,75 (11,5 — 16,0)Л 12,5 (12,0 — 13,0)Л 16,0 (14,0 — 18,0)Л
ИМ+ КМ-ММСК 12,5 (11,5 — 13,5)Л 11,25 (11,0 — 11,5) 12,0 (11,0 — 13,0)Л 14,0 (8,5 — 19,5)Л 12,75 (8,5 — 17,0)Л
ИМ+КС 15,0 (15,0 — 15,0) 11,0 (11,0 — 11,0) 2,5 (2,5 — 3,5) 5,0 (5,0 — 5,0) 4,5 (4,5 — 4,5)
QRSm
ИМ -3,0 (-10,0 — 4,0)Л -1,5 (-1,5 — 4,5) 4,0 (2,0 — 6,0) -0,25 (-4,5 — 4,0) 5,5 (5,0 — 6,0)#,$
ИМ+ЗФР 6,5 (1,0 — 12,0) 6,25 (-0,5 — 13,0) 5,5 (-2,0 — 13,0) 5,0 (2,0 — 8,0) 12,0 (8,0 — 16,0)$
ИМ+ КМ-ММСК 6,0 (4,0 — 8,0) 3,75 (2,5 — 5,0)Л -0,25 (-7,0 — 6,5) 3,25 (3,0 — 3,5)Л 3,75 (0,5 — 7,0)Л
ИМ+КС 0,5 (0,5 — 0,5) -0,5 (-0,5 — -0,5) 5,0 (5,0 — 5,0) 2,0 (2,0 — 2,0) -1,0 (-1,0 — -1,0)
QRSaVR
ИМ -10,0 (-10,5 — -9,5)$, Л -11,75 (-13,0 — -10,5) -11,75 (-15,0 — -8,5)Л -11,75 (-14,0 — -9,5)Л -12,5 (-14,5 — -10,5)#, Л
ИМ+ЗФР -9,25 (-11,5 — -7,0)Л -8,5 (-12,5 — -4,5) -11,25 (-14,0 — -8,5)Л -9,5 (-10,0 — -9,0)Л -9,5 (-9,5 — -9,5)Л
ИМ+ КМ-ММСК -12,5 (-13,0 — -11,5)Л -0,25 (-11,5 — 11,0) -3,75 (-17,5 — 10,0) -14,25 (-19,5 — -9,0)Л -13,25 (-19,5 — -7,0)Л
ИМ+КС 13,5 (13,5 — 13,5) -10,5 (-10,5 — -10,5) 0,5 (0,5 — 0,5) -3,0 (-3,0 — -3,0) -5,0 (-5,0 — -5,0)
QRSaV,.
ИМ 6,0 (-2,0 — 14,0) 7,5 (4,0 — 11,0)$ 4,0 (-2,0 — 10,0) 5,5 (1,0 — 10,0) 4,5 (2,5 — 6,5)#
ИМ+ЗФР 0,25 (-7,0 — 7,5) 0,0 (-8,0 — 8,0) 2,75 (-5,5 — 11,0) 4,5 (1,5 — 7,5) -5,5 (-5,5 — -5,5)$, Л
ИМ+ КМ-ММСК 3,25 (-0,5 — 7,0) 1,25 (-1,0 — 3,5)Л 4,25 (-2,5 — 11,0) 5,0 (4,0 — 6,0)Л 2,75 (-2,5 — 8,0)
ИМ+КС 4,5 (4,5 — 4,5) 8,0 (8,0 — 8,0) -2,0 (-2,0 — -2,0) 1,5 (1,5 — 1,5) 4,5 (4,5 — 4,5)
QRSaW
ИМ 4,25 (0,5 — 8,0)Л 7,0 (6,5 — 7,5)Л 10,25 (10,0 — 10,5)$, Л 7,0 (7,0 — 7,0)#, Л 12,0 (9,5 — 14,5)#,$, Л
ИМ+ЗФР 9,5 (6,5 — 12,5) 8,75 (5,5 — 12,0) 10,75 (8,0 — 13,5)Л 9,25 (8,5 — 10,0)Л 15,0 (15,0 — 15,0)$, Л
ИМ+ КМ-ММСК 7,0 (7,0 — 7,0)Л 7,0 (6,0 — 8,0) 7,0 (4,5 — 9,5)Л 9,25 (4,0 — 14,5) 7,0 (6,0 — 8,0)Л
ИМ+КС 10,5- 10,5 — 10,5 6,0- 6,0 — 6,0 4,0- 4,0 — 4,0 4,5- 4,5 — 4,5 3,0- 3,0 — 3,0
Обозначения: ИМ — инфаркт миокарда, ЗФР — забуференный физиологический раствор, КМ-ММСК — костномозговые мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, КС — кондиционная среда от КМ-ММСК.
Примечание. # - достоверность различий значений с группой, получившей лечение ЗФР р & lt- 0,05- $ - достоверность различий значений с группой, получившей лечение КМ-ММСК р & lt- 0,05- л — достоверность различий значений с группой, получившей лечение КС от КМ-ММСК р & lt- 0,05.
Также нами выявлены статистически личные сроки наблюдения по данным из-значимые различия между группами жи- менения зубца Т, как в стандартных, так и в вотных с учетом типа терапии ИМ на раз- усиленных отведениях (табл. 4).
Таблица 4
Эффективность терапии клеточным продуктом экспериментального инфаркта миокарда у крыс линии Wistar по данным зубца Т (в мм)
Параметры через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 1б8 ч через 720 ч
Tt
MM 4,0 (3,0 — 5,0)Л 3,0 (2,5 — 3,5)л -1,75 (-2,0 — -1,5)$, л -2,5 (-3,5 — -1,5) -1,5 (-2,5 — -0,5)
HM+ЗФР 4,25 (3,5 — 7,0)л 2,25 (-0,5 — 5,0)л 0,25 (-2,5 — 3,0)л 1,25 (-3,5 — 1,0) -0,25 (-1,0 — 0,5)л
hm+ rm- MMCR 3,0 (3,0 — 3,0)л 3,0 (1,5 — 4,5)л -2,75 (-3,0 — -2,5)л -0,25 (-1,5 — 1,0)л -1,0 (-1,5 — -0,5)л
HM+КС 11,0 (11,0 — 11,0) 8,0 (8,0 — 8,0) -4,5 (-4,5 — -4,5) -2,0 (-2,0 — -2,0) -2,0 (-2,0 — -2,0)
T
EM 4,0 (2,5 — 5,5)л 2,5 (2,0 — 3,0)л 1,25 (-1,0 — 3,5) 2,0 (1,5 — 2,5) 4,0 (4,0 — 4,0)л
HM+ЗФР 5,25 (3,5 — 7,0)л 3,0 (2,0 — 4,0)л 0,75 (-1,5 — 3,0) 3,5 (3,5 — 3,5)#,$, л 3,25 (3,0 — 3,5)#, л
hm+ rm- MMCR 4,5 (3,0 — 6,0)л 2,75 (2,5 — 3,0)л -0,75 (-2,0 — 0,5) 0,5 (-1,0 — 2,0) 0,5 (-1,0 — 2,0)*,#
km+кс 11,5 (11,5 — 11,5) б, 0 (б, 0 — б, 0) -2,0 (-2,0 — -2,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 1,5 (1,5 — 1,5)
T ttt
KM 1,75 (1,5 — 2,0) 2,5 (1,0 — 1,5) 2,5 (1,0 — 4,0)л 3,5 (3,0 — 4,0) 5,5 (5,0 — 6,0)л
KM+ЗФР 1,25 (-0,5 — 3,0) 0,25 (-2,0 — 2,5) 1,0 (-0,5 — 2,5)л 3,75 (2,0 — 5,5) 4,0 (3,5 — 4,5)*,$, л
rm+ rm- MMCR 3,25- (1,5 — 5,0) 2,25 (1,0 — 3,5) 2,25 (1,5 — 3,0) 2,0 (1,5 — 2,5)*, л 2,0 (2,0 — 2,0)*
RM+КС 2,0 (2,0 — 2,0) 1,5 (1,5 — 1,5) 3,0 (3,0 — 3,0) 4,0 (4,0 — 4,0) 3,5 (3,5 — 3,5)
T
RM -3,5 (-5,0 — -2,0)л -2,5 (-3,0 — -2,0)л -0,25 (-2,5 — 2,0)л 0,5 (-0,5 — 1,5) -1,0 (-1,5 — -0,5)л
RM+ЗФР -4,5 (-б, 0 — -3,0)л -1,5 (-4,5 — 1,5)л -0,75 (-3,5 — 1,5)л -1,25 (-2,0 — -0,5) -1,75 (-2,0 — -1,5)$, л
nM+ rm- MMCR -3,75 (-5,0 — -2,5)л 0,25 (-3,0 — 3,5)л 1,75 (1,0 — 2,5)л -0,25 (-2,0 — 1,5) 0,25 (-0,5 — 1,0)
nM+КС -11,5 (-11,5 — -11,5) -7,0 (-7,0 — -7,0) 3,5 (3,5 — 3,5) -0,5 (-0,5 — -0,5) 0,5 (0,5 — 0,5)
T
nM 2,25 (1,5 — 3,0)$, л 2,0 (2,0 — 2,0)л -2,25 (-3,0 — -1,5) -3,25 (-3,5 — -3,0) -4,0 (-5,0 — -3,0)
nM+ЗФР 1,0 (-1,0 — 3,0)л 1,5 (-1,0 — 4,0)л -0,25 (-2,5 — 2,0)л -2,75 (-5,0 — -0,5)$ -2,75 (-3,0 — -2,5)$
nM+ rm- MMCR 0,5 (0,5 — 0,5)л 2,0 (1,0 — 3,0)л -2,5 (-3,0 — -2,0) -1,25 (-1,5 — -1,0)*, л -2,0 (-2,0 — -2,0)*, л
nM+КС 5,5 (5,5 — 5,5) 5,5 (5,5 — 5,5) -3,0 (-3,0 — -3,0) -3,0 (-3,0 — -3,0) -3,0 (-3,0 — -3,0)
T
nM 3,25 (3,0 — 3,5)л 2,0 (1,5 — 2,5)л 2,25 (0,5 — 4,0) 3,0 (2,5 — 3,5) 4,5 (4,0 — 5,0)л
nM+ЗФР 3,5 (3,5 — 3,5)л 1,25 (1,0 — 1,5)$, л 1,0 (0,5 — 1,5) 4,0 (3,0 — 5,0) 3,5 (3,0 — 4,0)$
nM+ MM-MMCR 4,0 (3,0 — 5,0)л 2,75 (2,5 — 3,0)л 0,5 (-1,0 — 2,0) 1,75 (1,0 — 2,5)л 1,5 (1,5 — 1,5)*, л
nM+КС б, 0 (б, 0 — б, 0) 3,5 (3,5 — 3,5) 1,0 (1,0 — 1,0) 3,0 (3,0 — 3,0) 3,0 (3,0 — 3,0)
Обозначения: ИМ — инфаркт миокарда, ЗФР — забуференный физиологический раствор, КМ-ММСК — костномозговые мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, КС — кондиционная среда от КМ-ММСК.
Примечание. * - достоверность различий значений с группой ИМ р & lt- 0,05- # - достоверность различий значений с группой, получившей лечение ЗФР р & lt- 0,05- $ - достоверность различий значений с группой, получившей лечение КМ-ММСК р & lt- 0,05- л — достоверность различий значений с группой, получившей лечение КС от КМ-ММСК р & lt- 0,05.
Таким образом, на основание выявленных изменений желудочкового комплекса QRS и зубца Т с учетом проводимой терапии можно отметить, что интрамиокарди-альное введение КМ-ММСК или же кондиционной среды от КМ-ММСК способствует уменьшению выраженность некротических процессов в области ишемии миокарда.
Известно, что при инфаркте миокарда возрастает нагрузка на предсердия, которые берут на себя некоторую функцию желудочков, направленную на сохранение цирку-
ляции крови. Результатом такой компенсаторной деятельности предсердий является ремоделирование сердечной деятельности и гипертрофии предсердий.
Как видно из табл. 5, на фоне терапии ИМ интрамиокардиальным введением КМ-ММСК или же кондиционной среды от КМ-ММСК отмечено статистически значимое снижение высоты зубца Р, как в стандартных, так и в усиленных отведениях по сравнению с другими группами животных.
Таблица 5
Эффективность терапии клеточным продуктом экспериментального инфаркта миокарда у крыс линии Wistar по данным зубца Р (в мм)
Параметры через 30 мин через 2 ч через 48 ч через 168 ч через 720 ч
Р,
ИМ 4,0 (3,0 — 5,0)Л 3,0 (2,5 — 3,5)Л -1,75 (-2,0 --1,5)$, Л -2,5 (-3,5 — -1,5) -1,5 (-2,5 — -0,5)
ИМ+ЗФР 4,25 (3,5 — 7,0)Л 2,25 (-0,5 — 5,0)Л 0,25 (-2,5 — 3,0)Л 1,25 (-3,5 — 1,0) -0,25 (-1,0 — 0,5)Л
ИМ+ КМ-ММСК 3,0 (3,0 — 3,0)Л 3,0 (1,5 — 4,5)Л -2,75 (-3,0 — -2,5)Л -0,25 (-1,5 — 1,0)Л -1,0 (-1,5 — -0,5)Л
ИМ+КС 11,0 (11,0 — 11,0) 8,0 (8,0 — 8,0) -4,5 (-4,5 — -4,5) -2,0 (-2,0 — -2,0) -2,0 (-2,0 — -2,0)
Р,
ИМ 2,0 (2,0 — 2,0)$, Л 2,0 (1,5 — 2,5)Л 1,25 (0,5 — 2,0) 1,25 (1,0 — 1,5)#,$, Л 1,0 (1,0 — 1,0)#,$
ИМ+ЗФР 2,5 (2,5 — 2,5)$, Л 1,5 (1,5 — 1,5)Л 1,75 (1,5 — 2,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 2,75 (2,5 — 3,0)$, Л
ИМ+ КМ-ММСК 1,25 (0,5 — 2,0) 1,5 (1,5 — 1,5)Л 1,5 (1,0 — 2,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 1,5 (1,0 — 2,0)
ИМ+КС 0,5 (0,5 — 0,5) 3,0 (3,0 — 3,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 2,0 (2,0 — 2,0)
Р, п
ИМ 1,0 (1,0 — 1,0)Л 0,75 (0,5 — 1,0)Л -0,5 (-1,5 — 0,5)# 0,25 (-0,5 — 1,0) 0,0 (-0,5 — 0,5)#,$
ИМ+ЗФР 1,0 (0,5 — 1,5)Л 1,25 (0,5 — 2,0) 1,0 (1,0 — 1,0)Л 1,75 (1,5 — 2,0) 2,75 (2,5 — 3,0)$, Л
ИМ+ КМ-ММСК 0,5 (-0,5 — 1,5)Л 1,25 (1,0 — 1,5)Л 1,0 (0,5 — 1,5) 1,5 (1,0 — 2,0) 1,0 (0,5 — 1,5)
ИМ+КС -1,0 (-1,0 — -1,0) 2,0 (2,0 — 2,0) 0,5 (0,5 — 0,5) 1,0 (1,0 — 1,0) 1,0 (1,0 — 1,0)
Р
ИМ -1,75 (-2,0 — -1,5)$, Л -1,25 (-1,5 — -1,0)Л -1,0 (-1,0 — -1,0)# -1,5 (-1,5 — -1,5)Л -0,5 (-0,5 — -0,5)#,$
ИМ+ЗФР -1,5 (-1,5 — -1,5)$, Л -0,75 (-1,0 — -0,5)Л -1,24 (-1,5 — -1,0)Л -1,5 (-1,5 — -1,5)Л -1,5 (-2,0 — -1,0)
ИМ+ КМ-ММСК -1,25 (-2,0 — -0,5) -1,25 (-1,5 — -1,0)Л -1,0 (1,5 — -1,0)Л -1,75 (-2,0 — -1,5)Л -1,25 (-2,0 — -0,5)
ИМ+КС -0,5 (-0,5 — -0,5) -2,0 (-2,0 — -2,0) -2,0 (-2,0 — -2,0) -1,0 (-1,0 — -1,0) -1,0 (-1,0 — -1,0)
РаУГ.
ИМ 0,5 (0,5 — 0,5) 0,5 (0,5 -0,5) 1,0 (0,5 — 1,5)# 0,5 (0,5 — 0,5) 0,75 (0,5 — 1,0)#,$
ИМ+ЗФР 0,5 (0,5 — 0,5) 0,0 (-0,5 — 0,5) -0,5 (-0,5 — -0,5)$, Л -0,5 (-0,5 — -0,5) -1,5 (-2,0 — -1,0)$, Л
ИМ+ КМ-ММСК -0,5 (-0,5 — -0,5) 0,0 (-0,5 — 0,5) 0,5 (0,5 — 0,5) -0,25 (-1,0 — 0,5) -0,5 (-0,5 — -0,5)Л
ИМ+КС 1,5 (1,5 — 1,5) 0,5 (0,5 — 0,5) 1,0 (1,0 — 1,0) 0,5 (0,5 — 0,5) 0,5 (0,5 — 0,5)
Ра™
ИМ 1,75 (1,5 — 2,0)$, Л 1,25 (1,0 — 1,5)Л 1,0 (0,5 — 1,5) 1,25 (0,5 — 2,0)# 0,5 (0,5 — 0,5)#,$, Л
ИМ+ЗФР 1,5 (1,5 — 1,5)$, Л 1,5 (1,0 — 2,0) 1,5 (1,5 — 1,5)Л 1,75 (1,5 — 2,0)Л 2,5 (2,0 — 3,0)л
ИМ+ КМ-ММСК -0,5 (-0,5 — -0,5)Л 0,75 (0,5 — 1,0)Л 1,0 (0,5 — 1,5) 1,75 (1,5 — 2,0) 1,5 (1,0 — 2,0)
ИМ+КС -1,5 (-1,5 — -1,5) 2,0 (2,0 — 2,0) 1,0 (1,0 — 1,0) 1,5 (1,5 — 1,5) 1,5 (1,5 — 1,5)
Обозначения: ИМ — инфаркт миокарда, ЗФР — забуференный физиологический раствор, КМ-ММСК — костномозговые мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, КС — кондиционная среда от КМ-ММСК.
Примечание. # - достоверность различий значений с группой, получившей лечение ЗФР р & lt- 0,05- $ - достоверность различий значений с группой, получившей лечение КМ-ММСК р & lt- 0,05- л — достоверность различий значений с группой, получившей лечение КС от КМ-ММСК р & lt- 0,05.
Следовательно, терапия КМ-ММСК или же кондиционной средой от КМ-ММСК уменьшает нагрузку на предсердия в ходе ремоделирования сердечной деятельности.
Выявленный нами клинический эффект интрамиокардиального введения КМ-ММСК не противоречит имеющимся литературным данным, в которых также отмечается улучшение функционирования сердца после индукции ИМ и терапии стволовыми клетками [7]. В основе улучшения сократительной способности поврежденного миокарда авторы рассматривают не-оангиогенез в области клеточной трансплантации, обусловленные продукцией ростовых факторов ММСК с одной стороны, а с другой стороны, их способностью дифференцироваться в эндотелиальные клетки, перициты, гладкомышечные клетки и кардиомиоциты. Авторы полагают, что превалирующим является паракринный эффект ММСК. Существенное значение в достижение клинической эффективности клеточной терапии при ИМ является сроки интрамиокардиальной трансплантации стволовых клеток, в том числе и ММСК. Так, в работе авторов [6] показано, что наиболее благоприятным моментом является сохранность локального микроокружения, способствующего приживлению в большинстве своем введенных в зону ишемии стволовых клеток. Клиническая эффективность интрамиокардиальной трансплантации стволовых клеток зависит и от типа вводимых клеток. Так, в работе авторов [4] показано, что трансплантация CD 133+кле-ток (предшественники эндотелиальных прогениторных клеток) больным с острым ИМ не смотря на отсутствие видимых изменений по данным эхокардиографии, все же отмечено локальное улучшение сократительной способности стенки левого желудочка спустя 6 месяцев после трансплантации клеток, что является обнадеживающим
фактом для применения такого вида терапии у больных с ИМ.
Заключение
Таким образом, исходя из вышеизложенного, очевиден факт, что применение КМ-ММСК и КМ от КМ-ММСК приводит к нормализации биоэлектрической активности миокарда при моделировании острого инфаркта миокарда и сопровождается тенденцией к нормализации параметров ЭКГ к исходным значениям до индукции инфаркта миокарда у экспериментальных животных. экспериментальные данные указывают на клиническую эффективность не только КМ-ММСК, но и КС от данных клеток, что может быть использовано для клеточной терапии не только хронической сердечной недостаточности, но и при остром инфаркте миокарда в ранних сроках его развития.
Список литературы
1. Гланц С. Медико-биологическая статистика. — М: Практика. — 1999. — 459 с.
2. Джиджихия К. М., Каде А. Х., Занин С. А. и др. Получение модели крупноочагового инфаркта миокарда в остром эксперименте на крысах // Фундаментальные исследования. — 2012. — № 4. — С. 270−273.
3. Михайличенко В. Ю., Коноплянко В. А. Электрофизио-логическая функция сердца после некоторых вариантов клеточной кардиомиопластики при инфаркте миокарда в эксперименте // Новоутворення. — 2010. — № 2. — С. 106−110.
4. Ahmadi H., Moshkani Farahani M., Kouhkan A. et al. Five-year follow-up of the local autologous transplantation of CD133+ enriched bone marrow cells in patients with myocardial infarction // Arch. Iran Med. — 2012. — Vol. 15. — P. 32 — 35.
5. Cook M.M., Kollar K., Brooke G.P. et al. Cellular therapy for repair of cardiac damage after acute myocardial infarction // Int. J. Cell Biology. — 2009. doi: 10. 1155/2009/906 507.
6. Jiang C., Gui C., He A., Hu X. et al. Optimal time for mesenchymal stem cell transplantation in rats with myocardial infarction // J. Zhejiang Univ. Sci. B. — 2008. — Vol. 9. -P. 630−637.
7. Liang J., Huang W., Y.X. et al. Suicide gene reveals the myocardial neovascularization role of mesenchymal stem cells over expressing CXCR4 (MSCCXCR4) // PLoS ONE. -2012. doi: 10. 1371/journal. pone. 46 158.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой