Профиль иммуноферментов воспаления у больных хроническим панкреатитом

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость новой

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 612. 017:577
ПРОФИЛЬ ИММУНОФЕРМЕНТОВ ВОСПАЛЕНИЯ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ПАНКРЕАТИТОМ
Мингазова С. К.
Башкирский государственный медицинский университет, Уфа, e-mail: s_mingazova@mail. ru
Цель — изучить цитокиновую регуляцию по уровню моноцитарно-макрофагальных факторов крови при хроническом панкреатите. Обследованы пациенты хроническим панкреатитом (n = 78) и здоровые лица (n = 20) группы сравнения. Использованы общеклинические методы обследования и определение уровня цитокинов методом иммуноферментного анализа. У больных часто рецидивирующим панкреатитом высоко значимо возрастают провоспалительные цитокины (IL-1 р и TNF-a), уровни моноцитарно-хемотаксического фактора (МСР-1) и гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (G-CSF) как проявление воспаления с его персистенцией. При часто рецидивирующем течении хронического панкреатита высокий уровень MCH-1 и G-CSF характеризовались наличием корреляции с экзогенными нарушениями, болевым синдромом. Выявленные нарушения цитокинового статуса с нарастанием моноцитарно-макрофагальных факторов свидетельствуют о наличии иммунного воспаления, определяет большую степень персистирования воспаления у больных часто рецидивирующим хроническим панкреатитом и становятся маркерами ранней диагностики патологии поджелудочной железы.
Ключевые слова: хронический панкреатит, моноцитарно-макрофагальные факторы МСР-1 и G-CSF
PROFILE OF IMMUNOENZYMES OF AN INFLAMMATION AT PATIENTS WITH CHRONIC PANCREATITIS.
Mingazova S.K.
Bashkir state medical university, Ufa, e-mail: s_mingazova@mail. ru
Aim: To study a cytokines regulation on level monocytes/macrophages blood factors at chronic pancreatitis. Material and methods. Patients by chronic pancreatitis (n = 78) and healthy faces (n = 20) of group of comparison are surveyed. All clinical methods of inspection and definition of level of cytokines by a method of an enzyme immunoassay are used. At patients with often relapsing рancreatitis pro-inflammatory cytokines (IL-1p and TNF-a), levels of monocyte chemotactic a factor (MCP-1) and a granulocyte colony stimulating factor (G-CSF) as inflammation manifestation with its persistence highly significantly increase. At often relapsing course of chronic pancreatitis a high level of MCP-1 and G-CSF were characterized by correlation existence with exogenous violations, a pain syndrome. Identified violations cytokine status with the increase of monocytes/macrophages factors indicates the presence of immune inflammation, define a greater degree of persistence of inflammation in patients with chronic pancreatitis often recurrent and become markers of early diagnosis of pancreatic pathology.
Keywords: chronic pancreatitis, monocytes/macrophages MCP-1 and G-CSF factors
Хронический панкреатит относится к числу наиболее сложных заболеваний пищеварительной системы, что объясняется многообразием этиологических факторов, сложностью патогенеза, трудностями диагностики и недостаточной эффективностью лечения [2].
Хронический панкреатит (ХП) характеризуется персистирующим хроническим воспалением с преобладанием в инфильтратах мононуклеарных клеток, развитием участков фиброза и прогрессирующими признаками экзо- и эндокринной недостаточности [1].
В настоящее время широко изучается роль медиаторов воспаления в повреждении поджелудочной железы, выделена роль нарушений иммунного и цитокинового статуса при заболеваниях внутренних органов. В связи с этим определение факторов моно-цитарно-макрофагального воздействия, обладающих мощными хемотаксическими и активирующими свойствами, позволит уточнить течение и прогноз ХП.
Целью настоящего исследования явилось изучение цитокиновой регуляции
по уровню моноцитарно-макрофагальных факторов крови (МСР-1 и С-С8Б) при хроническом панкреатите.
Материалы и методы исследования
В исследование было включено 78 больных хроническим панкреатитом, проходивших лечение в гастроэнтерологическом отделении РКБ. Пациенты не имели других заболеваний пищеварения, почечных и значимых сопутствующих заболеваний, а также сахарного диабета. Пациенты были разделены на две группы в зависимости от частоты обострения. Группу сравнения составили 20 практически здоровых доноров, сопоставимых по возрасту и полу. Все пациенты подписывали информированное согласие на обследование. Больные, соответствующие критериям отбора, имели заболевание в период обострения.
Помимо стандартного клинического обследования с оценкой клинических симптомов определяли уровни глюкозы, амилазы крови и мочи, проводился анализ кала на стеаторею и креаторею.
Содержание в крови основных провоспалитель-ных цитокинов (интерлейкины 1р (1Ь-1Р), фактор некроза опухоли -а (ЮТ-а)), уровни иммунофермен-тов, регулирующих функциональное состояние клеток фагоцитарного звена иммунитета (МСР-1) и гра-нулоцитарного колониестимулирующего фактора
с локальным ответом на действие инфекции (О-СБЕ) в сыворотке крови у больных ХП определялось методом ИФА с использованием коммерческих тест-наборов (производство «Вектор Бест» Новосибирская область). Количественное определение проводилось на анализаторе ЛССБСБ 2 (Веск1ап-СоиИег), где применяли трехфазный иммуноферментный метод с использованием тест-систем Гамма-Интерферон-ИФА-Бест
Статистический анализ результатов исследования выполнен с использованием аналитического пакета БХЛПБПСЛ 7.0 и программы Ме^ак Б^ИзИса 10. 2. 00. Для проверки нормального распределения изучаемых признаков применяли тест Колмогорова-Смирнова. При сравнении исследуемых групп по количественным признакам, отличающимся от нормального, использовался ранговый анализ вариаций по Крускалу-Уоллису, парное сравнение групп проводилось с использованием непараметри-
Уровень IL-1P был в 8 раз выше у больных 1 группы, показатель был высоко значим по отношению к группе сравнения и составил 97,6 ± 5,3 пг/мл (в группе сравнения 11,6 ± 4,5 пг/мл, р & lt- 0,001), во 2 группе он также был значим (47,6 ± 4,06 пг/мл, р & lt- 0,01), также высоко значимо увеличивалась экспрессия TNF-a (81,2 ± 5,61 и 53,5 ± 4,34 пг/мл соответственно, р & lt- 0,01). Значимо увеличивалось содержание IFN-y в сыворотке крови по сравнению с группой сравнения (74,76 ± 4,90 и 61,0 ± 5,62 пг/мл соответственно, р & lt- 0,05). Однако отмечены значимые различия в данных провоспалительных цитокинов между группами. Так, уровень IL-1P в 1 группе был в 2 раза выше данных 2 группы (97,6 ± 5,3 и 47,6 ± 4,06 пг/мл, р & lt- 0,05), а экспрессия TNF-a в 1 группе на 52,8% выше 2 группы (р & lt- 0,05).
Высокие показатели провоспалитель-ных цитокинов у больных с часто рецидивирующим ХП определяли высокую активность заболевания и, вероятно, определяли персистирующее течение. Это подтверждалось наличием прямой корреляционной связи IL-1P с болевым синдромом (r = 0,56- р = 0,002), уровнем АСТ (r = 0,42- р = 0,036).
ческого теста для проверки достоверности различий изучаемых признаков -С-тест Манна-Уитни с поправкой Банферони. Для выявления корреляционных взаимосвязей использовался метод ранговых корреляций Спирмена (Реброва О.Ю., 2002).
Результаты исследования и их обсуждение
Среди включенных в исследование пациентов ХП 44 пациента отнесены к часто рецидивирующей форме ХП и 34 пациента к редко рецидивирующей форме ХП. Груп -пы были сопоставимы по основным клини-ко-морфологическим показателям.
Исследования цитокинов 1Ь-1р и ТОТ-а превышали данные сравнения (табл. 1).
У больных с редко рецидивирующим ХП в период обострения также наблюдалось повышение провоспалительных цито-кинов, что определяло их как маркеры воспаления в период обострения.
В дальнейшем было изучено содержание в крови состояние клеток фагоцитарного звена (МСР-1), определяющего моноцитарно-макрофагальные нарушения. Установлен достаточно большой разброс показателей в группе больных ХП от 52,56 до 487,0 пг/мл, где верхний квартиль — Q] составил 148,20 пг/мл, а нижний квартиль — 271,50 п/мл. При сопоставлении результатов активации МСР-1 в группе больных ХП отмечено значимое увеличение уровня фермента в обеих группах (рис. 1).
Наибольшие показатели содержания МСР-1 отмечались в 1-й группе больных ХП (218,43 ± 16,87 пг/мл) по сравнению с группой сравнения (143,82 ± 48,09 пг/мл, р = 0,002). У больных 2-й группы наблюдались низкие показатели МСР-1 и были близки к сравниваемым величинам, но оказались значимо пониженными с 1-й группой часто рецидивирующим ХП (р = 0,036). Следовательно, в 1-й группе больных отмечено значимое повышение уровня МСР-1 -одного из мощных хемотаксических
Таблица 1
Содержание цитокинов в сыворотке крови больных хроническим панкреатитом
Формы заболевания IL-1P, пг/мл TNF-a, пг/мл IFN-y, пг/мл
Часто рецидивирующая форма п = 44 97,6 ± 5,3 81,2 ± 5,61 * 74,76 ± 4,90
Редко рецидивирующая форма п = 34 ** 47,6 ± 4,06 ** 53,5 ± 4,34 * 61,0 ± 5,62
Группа сравнения п = 20 11,6 ± 4,5 7,58 ± 3,53 32,5 ± 5,31
Примечания: статистическая значимость различий с данными группы сравнения: * - р & lt- 0,05- ** - р & lt- 0,01- • - между группами р & lt- 0,05.
и активирующих факторов моноцитов/макрофагов характеризует реакцию иммунного ответа на инфекционное и аутоиммунное воспаление, что согласуется с данными других
исследований. Различия в группах обследования уровня МСР-1 позволяют предполагать наличие аутоиммунного воспаления у больных с часто рецидивирующим течением.
Содержаниев сывороткекровиМСР-1
группа 1 группа 2 группа
сравнения больных ХП больных ХП
Рис. 1. Содержание МСР-1 в сыворотке крови у больных хроническим панкреатитом в зависимости от формы заболевания. Примечание. Различия с группой сравнения статистически значимы * - р & lt- 0,05
При обследовании гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (С-С8Б) было получено повышение его уровня в сыворотке крови у больных 1-й груп-
пы ХП до 24,54 ± 2,97 пг/мл (в группе сравнения-7,13 ± 3,48 пг/мл, р = 0,02), во 2-й группе данные были незначимы (рис. 2).
Содержаниев cbiBopoTKeKpoBMG-CSF
пг/мл
25
20
15
10
5
0





группа 1 группа 2 группа
сравнения больных ХП больных ХП
Рис. 2. Содержание О-СБЕ в сыворотке крови у больных хроническим панкреатитом. Примечание. Значимость различий с группой сравнения * - р & lt- 0,05
Значимое нарастание 0-С8Б у больных часто рецидивирующим ХП в 3 раза по отношению группы сравнения и в 2 раза — со 2-й группой ХП, вероятно, направлено на
усиление иммунного воспаления, что подтверждается сильными корреляционными связями 0-С8Б с амилазой крови (г = 0,59- р = 0,032) и 1Ь-1Р (г = 0,63- р = 0,01).
Итак, высокий уровень G-CSF коррелировал с изменениями экскреторной функции ХП, провоспалительным цитокином IL-1?, что позволяет рассматривать данный фактор как возможный акселератор перси-стенции реакции воспаления, определяет его иммуно-регулирующее действие воспалительного процесса, а во 2-й группе снижение МСР-1, возможно, связано с понижением реакции нейтрофилов, развития ишемии и фиброза. Пониженный уровень МСР-1, слабая связь с основными показателями воспаления: TNF (r = 0,28- р = 0,64) позволяют рассматривать его как возможный триггер запуска воспаления и его про-грессирования.
Заключение
Установленные нами нарушения цито-кинового звена иммунитета, соответствующие степени воспаления и его персистен-ции в железе, свидетельствуют о прямой связи фактора воспаления МСР-1 и G-CSF с течением хронического панкреатита. Общность участия воспалительных факторов в прогрессировании заболевания характеризуется нарастанием показателей, свидетельствующих о наличии воспаления — IL-1?, TNF-a, INF-y.
При часто рецидивирующем течении ХП высокий уровень МСР-1 и G-CSF характеризовались наличием корреляции с экзогенными нарушениями, болевым синдромом. Исследования иммуноферментов моноцитарно-макрофагальных факторов имеет определенное значение в ранней диагностике проявления ХП.
Значимое увеличение уровня моноци-тарно-макрофагального фактора МСР-1 как фактора иммунного воспаления и увеличение гранулоцитарного колоние стимулирующего фактора (G-CSF) как маркера воспаления определяет большую степень персистирования воспаления у больных часто рецидивирующим хроническим панкреатитом.
Список литературы
1. Буеверов А. О. Медиаторы воспаления и поражение поджелудочной железы // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — М., 1999. -№ 4. — С. 15−18.
2. Губергриц Н. Б., Христич Т. Н. Клиническая панкреа-тология. — Донецк: ООО «Лебедь», 2000. — 416 с.
3. Губергриц Н. Б., Нехода Л. А., Линевская К. Ю. и др. Биохимическая диагностика хронического рецидивирующего панкреатита // Клиническая лабораторная диагностика. -1999. — № 8. — С. 3−10.
4. Жуков Н. А., Жукова Е. Н., Афанасьева С. Н. Клинические формы хронического рецидивирующего панкреатита и их патогенетические особенности // Акт. проблемы терапии на рубеже веков: сб. научн. тр. — Омск, 2001. — С. 54−58.
5. Ивашкин В. Т. Современные проблемы клинической панкреатологии // Вестник РАМН. — 1993. — № 4. — С. 29−34.
6. Кучерявый Ю. А. Значение цитокиновой сети в развитии типовых патологических процессов и нарушения обмена цитокинов при заболеваниях поджелудочной железы // Актуальные вопросы клинической транспортной медицины. — 2003. — Т 11. — С. 398−414.
7. Маев И. В., Казюлин А. Н., Дичева Д. Т., Кучерявый Ю. А. Хронический панкреатит: Учебное пособие. — М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 2003. — 80 с.
8. Маев И. В., Кучерявый Ю. А., Казюлин А. В., Пирого-ва А. И. Интерлейкины в патогенезе острого и хронического воспаления поджелудочной железы // Актуальные вопросы клинической транспортной медицины. — 2003. — Т. 9. -С. 168−183.
References
1. Bueverov A.O. Mediatory vospalenija i porazhenie podzheludochnoj zhelezy // Rossijskij zhurnal gastrojenterolo-gii, gepatologii, koloproktologii. M., 1999. no. 4. pp. 15−18.
2. Gubergric N.B., Hristich T.N. Klinicheskaja pankre-atologija / Doneck OOO «Lebed& gt-» 2000. 416 р.
3. Gubergric N.B., Nehoda L.A., Linevskaja K. Ju. i dr. Biohimicheskaja diagnostika hronicheskogo recidivirujushhego pankreatita //Klinicheskaja laboratornaja diagnostika. 1999. no. 8. pp. 3−10.
4. Zhukov N.A., Zhukova E.N., Afanaseva S.N. Klin-icheskie formy hronicheskogo recidivirujushhego pankreatita i ih patogeneticheskie osobennosti //Akt. problemy terapii na ru-bezhe vekov: Sb. nauchn. tr. Omsk, 2001. pp. 54−58.
5. Ivashkin V.T. Sovremennye problemy klinicheskoj pan-kreatologii // Vestnik RAMN, — 1993. no. 4. pp. 29−34.
6. Kucherjavyj Ju.A. Znachenie citokinovoj seti v razvitii tipovyh patologicheskih processov i narushenija obmena citokinov pri zabolevanijah podzheludochnoj zhelezy // Aktual& gt-nye voprosy klinicheskoj transportnoj mediciny. 2003. T 11 pp. 398−414.
7. Maev I.V., Kazjulin A.N., Dicheva D.T., Kucherjavyj Ju.A. Hronicheskij pankreatit: Uchebnoe posobie. M.: VUNMC MZ RF, 2003. 80 p.
8. Maev I.V., Kucherjavyj Ju.A., Kazjulin A.V., Pirogo-va A.I. Interlejkiny v patogeneze ostrogo i hronicheskogo vo-spalenija podzheludochnoj zhelezy // Aktual& gt-nye voprosy klinicheskoj transportnoj mediciny. 2003. T.9. pp. 168−183.
Рецензенты:
Мингазетдинова Л. Н., д.м.н., профессор, кафедра терапии и клинической фармакологии ИПО БГМУ, г. Уфа-
Фаизова Л. П., д.м.н., профессор, кафедра терапии и общеврачебной практики с курсом гериатрии ИПО БГМУ, г. Уфа.
Работа поступила в редакцию 26. 03. 2014.

Показать Свернуть
Заполнить форму текущей работой