Пролиферативная активность неоплазмы при прогрессировации рака яичников

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МЕДИЦИНА___________
УДК 618. 11−006. 6−037−07
И. И. Антонеева, С. Б. Петров
ПРОЛИФЕРАТИВНАЯ АКТИВНОСТЬ НЕОПЛАЗМЫ ПРИ ПРОГРЕССИРОВАНИИ РАКА ЯИЧНИКОВ
Пролиферативную активность неоплазмы в динамике развития опухоли оценивали на гистологических препаратах операционно-биопсийного материала первичной опухоли 83 больных раком яичников, находящихся на I-IV клинических стадиях заболевания по FIGO. Определяли митотический индекс, экспрессию Ki-67 и PCNA. Полученные результаты оценивали с помощью непараметрических статистических методов- значимость различий между группами оценивали по Н-критерию Крускала-Уоллиса- силу связи между признаками — ранговой корреляцией Спирмена.
Способность опухоли выживать и прогрессивно расти в условиях макроорганизма во многом определяется активностью ее элементов. Нарушение механизмов пролиферации — одна из главных особенностей опухолевых клеток. Уровень пролиферативной активности определяет агрессивность и злокачественность опухолевого процесса [1].
Целью работы была оценка пролиферативной активности раковых клеток яичников в процессе развития опухоли.
1. Материалы исследования
Материалом исследования послужили гистологические препараты операционно-биопсийного материала первичной опухоли 83 больных раком яичников (РЯ). По стадиям заболевания (FIGO, 1976) больные распределились следующим образом: I стадия была у 4 больных (4,8%), II — у 6 (7,2%),
III — у 40 (48,2%), IV — у 33 (39,8%). В зависимости от гистологической структуры опухоли в исследуемой группе 29 (35%) были отнесены к серозному гистотипу, 23 (28%) — к муцинозному, 16 (19%) — к эндометриоидно-му, 13 (16%) — к мезонефроидному и 2 (2%) — к неклассифицируемому. В ткани опухоли митотический режим опухолевых клеток анализировали в гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином. Митотическую активность (индекс) определяли путем подсчета 1000 опухолевых клеток при увеличении микрообъекта в 900 раз. В иммуногистохимической оценке пролиферативной активности первичного РЯ использовали моноклональные антитела (АТ) к антигену ядер пролиферирующих клеток PCNA и к негистонному белку Ki-67, который определяется в ядрах клеток во время поздней G-фазы, S, G2 и M, но не в Go-фазе клеточного цикла. Использовали коммерческие антитела фирм Novocastra и Dako. Пролифера-
тивная активность опухоли оценивалась как процент Ki-67 положительных клеток от общего числа опухолевых клеток. Для оценки индекса пролиферации по PCNA высчитывали процент клеток, в ядрах которых выявлялась экспрессия PCNA, на 300 раковых клеток.
Полученные в ходе исследования результаты оценивали с помощью непараметрических статистических методов. Для определения значимости различий между несколькими группами использовали H-критерий Крускала-Уоллиса. Силу связи между признаками устанавливали ранговой корреляцией Спирмена.
2. Результаты исследования
Данные литературы относительно уровня экспрессии Ki-67 при РЯ достаточно разноречивы: от 5,7% [2] до 85−95% [3, 4] и даже 98% [5]. При этом установлено, что индекс Ki-67 неодинаков при разных гистологических формах РЯ и коррелирует со степенью дифференцировки опухоли при серозном РЯ [6].
В результате проведенных исследований было установлено, что на I клинической стадии заболевания количество Ki-67+ клеток невелико и составляет порядка 5,4 ± 0,63% (таблица 1). Расположение этих клеток не имеет выраженных закономерностей. Ki-67+ клетки располагаются разрозненно и, как правило, единичны. Однако имеется устойчивая тенденция к увеличению таких клеток в мелких железах (рис. 1, 2). В группе раковых опухолей яичников II стадии указанные тенденции сохранялись.
Таблица1
Средние (Ki-67 М), минимальные (Ki-67 min) и максимальные (Ki-67 max) значения индекса пролиферации Ki-67(M ± SD) у больных РЯ на различных клинических стадиях заболевания (М ± m).
Стадия заболевания (по FIGO) Индекс Ki-67 (M±SD)
Ki-67 М Ki-67 min Ki-67 max
I n = 4 5,4 ± 0,63 4,0 ± 0,82 6,8 ± 0,96
II n = 6 10,2 ± 0,66* 7,8 ± 1,17 12,5 ± 1,05*
III n = 40 47,0 ± 4,12* 35,8 ± 6,62* 58,2 ± 5,54*
IV n = 33 45,5 ± 4,12* 32,9 ± 5,43 57,8 ± 7,07
* Данные, статистически достоверно отличающиеся от таковых на предыдущей клинической стадии, р = 0,0001.
При прогрессировании неоплазмы (III стадия) обнаруживается тенденция к усилению экспрессии К1−67 (см. таблицу 1, рис. 3).
Исследование раковых опухолей яичников IV стадии показало сохранение высокой пролиферативной активности: экспрессия К1−67 в ряде случаев достигала 58% (рис. 4).
Проведенная иммуногистохимическая оценка пролиферативной активности неоплазмы при РЯ выявила, что реакция на антиген ядер пролиферирующих клеток РСКЛ обнаруживается в виде диффузной и (или) зернистой окраски ядер раковых клеток [7], в тканевых образцах РСКЛ наиболее интенсивно выявляется в папиллярных новообразованиях, в мелких железах и участках инвазивного роста. На I и II клинических стадиях заболевания уровень РСКЛ демонстрирует значительные колебания — от 18 до 32% (рис. 5).
Рис. 1 Единичные клетки КІ-67+ в недифференцированном РЯ
Рис. 2 КІ-67+ в клетках мелких желез эндометриоидного РЯ
Рис. 3 Более высокий уровень К1−67+ в зонах пролиферации клеток в крупных железах на фоне низкой пролиферативной активности клеток крупных железах эндометриоидного РЯ
і -. А & quot-«» & quot-7'-'- '- & quot-
• • * *" т • ' ~ ^ - а • ^ ^. • *, ^ «Чі ^* Л ' ^ 4 ^*4 ^
* •* Г & quot- ' ч '-**¦ Ч& gt- Л Ч 1 ^ •- ^ ч
& gt-г- Ж ~V. ^ ^ ЧЧ.
^ ^ «Чч4'- ¦ ^ -& gt- ^ '-
• • А _ Чь & lt-Г ч& gt-4 ч& gt- V ^ - V х
: ш ж! — _. -. «^ -
* 9 0 _ * 4 ьЯ^*^4% & gt-. ^
*& quot-й, ~ ^ + А ' ДР «* «Щ 1#* о
-?V# *4 & quot- 1*11* {4 * У* а Чм4и/^* ^ ^ ч. ^ -Очч ч 4^ Ж ^. л О 1
. 1, — • /І» Л & quot-, ?§ 9
Р *1 *Тїі2Гі эдС *9 -_-
к ^ В. р ® і, ЧВ. ^ щ/ - _ ^ «9 Ш^Ш 1 */,& quot- '-
— ^ % Д 9f Г ^ лт — *^а #? і • К

' ^ ^ 1 м '-ТІ ¦. р у*
1 ^ Л» **1 & gt-ф ?У 1
1 ^ 1* Л фт 1 Г, А ,.
щГ х4
Рис. 4 Высокая активность КІ-67+ в зонах инвазии РЯ в строму
' I г.
• I V -.1 '-Л*
х10
Рис. 5 Высокая интенсивность PCNA в папиллярных отделах эндометриоидного РЯ
В отдельных случаях вообще не обнаружилось PCNA-положительных клеток. При прогрессировании новообразования (Ш-1У стадии) количество PCNA-положительных клеток значительно возрастает (таблица 2), достигая в ряде случаев 100% (рис. 6).
Таблица 2
Уровень экспрессии PCNA и митотический индекс клеток раковых опухолей яичников на различных клинических стадиях заболевания (М ± т)
Стадия/Показатель I стадия п = 4 II стадия п = 6 III стадия п = 40 IV стадия п = 33
РС^, % 22,8 ± 4,03 27,0 ± 5,76* 69,9 ± 12,99* 82,8 ± 11,48
МИ, %% 4,0 ± 1,82 6,2 ± 3,19* 9,9 ± 3,06* 11,0 ± 2,64*
* Данные, статистически достоверно отличающиеся от таковых на предыдущих стадиях (р = 0,0001 для данных по PCNA- р = 0,0002 для данных МИ).
Для изучения митотического режима оценивался митотический индекс (МИ). Сведения о митотической активности первичных раковых опухолей яичников в зависимости от стадии заболевания представлены в таблице 2.
Рис. 6 100% активность PCNA в железах РЯ
Морфометрическая оценка пролиферативной активности показала, что в исследованных опухолях скорости деления раковых клеток крайне неравномерны. Имеющаяся уже на начальных стадиях тенденция к высокому темпу деления сохраняется в процессе прогрессирования неоплазмы. Митотический индекс, составляющий на I клинической стадии 4,0 ± 1,82%с, к IV клинической стадии достигает 11,0 ± 2,64%с. Согласно данным литературы, при РЯ между высоким МИ и сроком наступления рецидива существует прямая и сильная корреляционная связь [8]. Предполагается, что при высокой митотической активности велика доля патологических митозов, в результате которых образуются нежизнеспособные клетки.
Заключение
Таким образом, установлено, что пролиферативная активность клеток овариального рака неодинакова на различных клинических стадиях заболевания. В группе раков яичников на III клинической стадии показатели экспрессии PCNA и К1−67 достоверно и существенно (р = 0,0001) превышали таковые в группе на !-П клинических стадиях и продолжали возрастать на
IV клинической стадии заболевания.
Морфометрические исследования пролиферативной активности также показали достоверное увеличение темпов деления раковых клеток при прогрессировании опухолевого процесса (р = 0,0002).
Корреляции иммуногистохимических маркеров пролиферации с количеством митозов раковых клеток не могут быть признаны достоверными.
На основании вышеизложенного можно предположить, что при прогрессировании РЯ проявляются клоны с высокой пролиферативной активностью. Определение экспрессии PCNA, Ki-67 и МИ раковых клеток может быть использовано в диагностических и прогностических целях при оценке стадии заболевания и определении эффективности лечения или лекарственной резистентности при РЯ.
Список литературы
1. Schwarting, R. Little miser markers and Ki-67 / R. Schwarting // Lab. Invest. -1993. — № 68. — Р. 597−599.
2. Harlozinca, A. Expression of p53 protein and Ki-67 reactivity in ovarian neoplasms. Correlation with histopathology / A. Harlozinca, J. Bar, P. Sedlaczek [et al.] // Am. J. Clin. Pathol. — 1996. — № 105. — Р. 334−340.
3. Kiykawa, T. Alteration of p53 in ovarian cancer its occurrence and maintenance it tumor progression / T. Kiykawa // Int. J. Gynecol. Pathol. — 1994. — № 13. — Р. 311−318.
4. Sakay, K. Comparison of p53, Ki-67 and CD44v6 expression between primary and matched metastatic lesions in ovarian cancer / K. Sakay, T. Kaku, T. Kamura [et al.] // Gynecol. Oncol. — 1999. — № 72. — Р. 360−366.
5. Reitmaier, M. Comparative studies on the biological significance of the marker for proliferation Ki-67-Antigen and PSNA in primary ovarian carcinoma / M. Reitmaier, C. Rudlowski, S. Biesterfeld [et al.] // Zentralbl Gynacol. — 2000. — № 122. — Р. 361−367.
6. Полушкина, И. Н. Биомолекулярные маркеры как факторы прогноза при серозном раке яичников III-IV стадии: автореф. дис. … к.м.н. / И. Н. Полушкина. -М., 2002.
7. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / под ред. С. В. Петрова, Н. Т. Райхлина. — Казань, 2004.
8. Новичкова, Е. В. Зависимость прогноза рака яичников от экспрессии рецепторов к половым гормонам и пролиферативной активности опухолевых клеток / Е. В. Новичкова, А. А. Вотинцев // Архив патологии. — 2006. — № 2. — С. 10−13.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой