Фильтрация венозной крови больных с целью цитологической диагностики злокачественных новообразований

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 616−006. 04:616. 15−07
А.А. Чимитов1, Н.В. Рязанцева2, Г. Ц. Дамбаев2, В.Е. Хитрихеев3, А.П. Перинов1, Т.Д. Ханхашанова1, В.И. Медведев1
ФИЛЬТРАЦИЯ ВЕНОЗНОЙ КРОВИ БОЛЬНЫХ С ЦЕЛЬЮ ЦИТОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ
1Бурятский РОД, Улан-Удэ 2Сибирский ГМУ, Томск 3Бурятский государственный университет, Улан-Удэ
В статье рассматриваются возможности применения в диагностике и оценке лечения злокачественных новообразований гемофильтроцитологического исследования венозной крови больных. Применение оригинального устройства для. микропросеивания, крови, позволяет выделять из крови, больных раковые клетки, что помогает, поставить диагноз при. их первичном, обращении. Гемофильтроцитодиагностика также дает, возможность оценить полноту проведенной радикальной операции, необходимость дополнительной полихимиотерапии. Данный метод может, быть применен, для. динамического наблюдения за больными после специального лечения.
Ключевые слова: гемофильтроцитологическое исследование крови, микропросеивание, калиброванный фильтр, ангиогенез, карцинемия
PATIENTS' VENOUS BLOOD FILTRATION FOR CYTOLOGICAL DIAGNOSTICS OF MALIGNANT NEOPLASMS
A.A. Chimitov1, N.V. Ryazantseva2, G. Ts. Dambaev2, V.E. Khitrikheev3,
A.P. Perinov1, T.D. Khankhashanova1, V.I. Medvedev1
1Buryat Republic Oncologic Dispensary, Ulan-Ude 2 Siberian State Medical University, Tomsk 3Buryat State University, Ulan-Ude
The article studies the potential of application of patients'- venous blood hemofiltrocytoanalysis. An innovative device for blood micro-screening enables specialists to withdraw cancer cells from patients'- blood and diagnose during the very first consultation. Hemofiltrocytodiagnosis is also helpful in cases when efficiency of radical surgery and. the potential need, for additional course of polychemotherapy. The stated, method, can be used, for dynamic patients screening after the course of special treatment.
Key words: blood hemofiltrocytoanalysis, blood micro-screening, calibrated filter, angiogenesis, carcinemia
ВВЕДЕНИЕ
Современные достижения науки и техники существенно расширили возможности распознавания злокачественных новообразований (ЗНО). Тем не менее, несмотря на широкий арсенал вспомогательных методов исследования врач зачастую по-прежнему испытывает существенные затруднения в постановке правильного диагноза, что в конечном итоге отражается на результатах лечения.
Именно на этапах обследования больных в поликлиниках и стационарах общей лечебной сети возникает наибольшее количество ошибок в диагностике, следствием которых является задержка и, нередко невозможность оказания им радикальной помощи. В настоящее время, по данным Московского научно-исследовательского онкологического института им. П. А. Герцена на уровне амбулаторно-поликлинического звена ЛПУ активно выявляют не более 10% всех больных со ЗНО [3].
Другая основная причина запущенности онкологических больных, по мнению специалистов РОНЦ им. Н. Н. Блохина, до половины случаев обусловлена скрытым атипичным течением болезни [4]. Серьезные трудности возникают при
распознавании опухоли, развивающейся на фоне другого патологического процесса. До сих пор, например, значителен удельный вес диагностических ошибок при распознавании рака легкого у больных, страдающих хроническим туберкулезом этого органа.
Показатели несвоевременной диагностики ЗНО, иначе говоря запущенности, в 2008 г. составили при раке трахеи, бронхов, легкого — 35,6%- при раке пищевода — 29,5%- при раке желудка — 42,4%. Один из основных показателей состояния и качества оказания онкологической помощи: процент морфологического подтверждения диагноза ЗНО, к сожалению, в целом по Российской Федерации за 2008 г. имеет прирост всего 0,3% [2]. Морфологическое подтверждение злокачественного характера опухоли является основным этапом диагностического процесса.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Разработать и изучить клиническую значимость гемофильтроцитологического исследования венозной крови — лабораторного метода морфологической диагностики злокачественных новообразований (ЗНО).
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В исследование были включены 87 больных. Из них 46 мужчин и 41 женщина. Возраст обследуемых пациентов составил от 23 до 71 года. Перед исследованием крови осуществляли сборку устройства для микропросеивания венозной крови. Устройство состоит из стеклянного градуированного цилиндра, заключенного в прозрачный пластиковый кожух. На дно стеклянного цилиндра помещается пластмассовая решетка, предназначенная для закрепления на ней с помощью металлического кольца калиброванного фильтра, который выполнен из полимерной пленки с диаметром пор 6 мкм. Внутри стеклянного цилиндра установлен поршень со штоком, в поршне выполнены два разных по диаметру канала, на стыке которых расположен металлический шарик, выполняющий роль клапана для выхода воздуха (регистрационный номер заявки на выдачу патента 2 009 141 746). Через верхнее отверстие в стеклянный цилиндр наливали из пробирки венозную кровь больного, взятую независимо от приема им пищи из локтевой вены в количестве 9 мл, разведенную в 1 мл цитрата натрия. Затем под давлением поршня пропускали всю исследуемую венозную кровь через калиброванный фильтр, при этом происходит задержка раковых клеток в осадке на фильтре. Осадок наносили на предметные стекла, предварительно обезжиренные и охлажденные, для лучшего прилипания клеток и высыхания. Фиксировали мазки-отпечатки 3% спиртовым раствором Лейшмана 2 — 4 минуты. Затем смывали дистиллированной водой и красили азур-эозиновой смесью в соотношении 3:1 в течение 6 — 8 минут. После покраски промывали дистиллированной водой, сушили на воздухе и приступали к просмотру под микроскопом.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
При специальном поиске раковых клеток в циркулирующей крови обнаружить эти клетки до недавнего времени не удавалось. Однако биологические методы обнаружения карцинемии, суть которых заключается в перевивке опухоли кровью или другим биологическим материалом (гомогенатом внутренних органов и пр.) говорят о том, что карцинемия — закономерное явление. В ряде случаев перевиваемость опухоли кровью достигает 100% [1].
Сегодня благодаря успехам нанотехнологий, американскими учеными создан кремневый чип для точной диагностики раковых клеток. Речь идет о так называемой лаборатории на чипе, с помощью которой раковые клетки можно «вылавливать» непосредственно из крови, прокачиваемой с помощью микропомпы сквозь чип. Общий размер чипа — 25×66 мм, при этом активная поверхность 19×51 мм. На площади 970 мм² вытравлено 78 тыс. кремневых круглых столбцов высотой и диаметром 100 микрон. Кремневый круг несет на своей поверхности «газон» зафик-
сированных на ней моноклональных антител против протеиновых молекул адгезии — «слипания» — эпителиальных клеток (ЕрСАМ). Это один из самых стабильных и максимально «проявленных» маркеров раковых клеток опухолей самых разных органов.
Технология, разработанная учеными под руководством Мехмета Тонера с применением силиконового чипа с антителами, позволила многократно усилить чувствительность метода, сделав его пригодным для практического применения. По словам исследователей, им удалось обнаружить циркулирующие опухолевые клетки в 115 из 116 исследованных образцов, каждый из которых содержался в 8 мл пробирке с кровью [5].
Из 63 первично выявленных онкологических больных путем гемофильтроцитодиагностики, подтвержденной общепринятыми методами исследования, у 25 злокачественное новообразование диагностировано в 1 — 11 стадиях, у 27 — в III стадии и у 11 — в IV стадии.
Клиническое наблюдение № 1. Больной И., 59 лет. Заболел в декабре 2007 г., когда впервые появились боль в эпигастрии, общая слабость, похудание до 7 — 8 кг. Обратился к врачу по месту жительства в конце апреля 2008 г. и был направлен в онкодиспансер. При инструментальном обследовании (ФГДС и рентгеноскопия) обнаружена хроническая язва желудка, не исключалась малиг-низация. Гемофильтроцитологическое исследование венозной крови больной помогло установить и верифицировать диагноз: В1. антрального отдела желудка III стадии, что подтвердилось на операции и гистологическим исследованием операционного материала (рис. 1).
В подавляющем большинстве случаев из 27 больных после радикального оперативного вмешательства у 25 обнаружены в периферической крови опухолевые клетки, что потребовало проведения дополнительно полихимиотерапии 21 больному, согласным на комбинированное лечение.
Клиническое наблюдение № 2. Больной Н., 54 года, выполнена 16. 10. 08 операция субтотальная резекция желудка по Б-П по поводу В1. тела желудка III стадии. Гистологические заключение операционного материала — «аденокарцинома». Заживление послеоперационной раны первичным натяжением. На 14 сутки послеоперационного периода больной произведено гемофильтроцито-логическое исследование венозной крови, которое выявило наличие у нее опухолевых клеток (рис. 2). Карцинемия потребовала проведения в послеоперационном периоде 6 курсов полихимиотерапии, после которых при повторном гемофильтроцито-логическом исследовании опухолевых клеток в крови не найдено.
Динамическое наблюдение за 8 больными в течение первого года после проведенной радикальной операции не выявило появление раковых клеток в периферической крови. Проведенные общепринятые методы обследования, включая ин-
Рис. 1. Больной И. Цитологическое исследование филь- Рис. 2. Больная Н. Цитологическое исследование фильтрата венозной крови. Среди эритроцитов 2 опу- трата венозной крови. Шесть опухолевых клеток
холевые клетш. мелких размеров с крупными ядрами, контуры
которых неровные.
Таблица 1
Полученные результаты гемофильтроцитологического исследования венозной крови онкологических больных
Цель исследования Кол-во больных Выявленные положительные результаты
Обнаружить ЗНО у первичных больных 68 63
Определить показания к полихимиотерапии после радикального лечения 27 25
Оценить полноту и качество проведенной полихимиотерапии 21 21
Динамическое наблюдение 8 8
Таблица 2
Выявленные злокачественные новообразования
Нозологические формы новообразований Установленные на основании результатов гистологических исследований Установленные дополнительно к гистологическому исследованию и на основании гемофильтроцитодиагностике
Рак легких 20 18
Рак желудка 17 16
Колоректальный рак 15 13
Рак яичников 16 16
струментальные, также не обнаружили рецидива заболевания.
Характеристика полученных результатов представлена в таблицах 1 и 2.
ВЫВОДЫ
Таким образом, гемофильтроцитодиагностика позволяет успешно:
1. выявлять у больных при их первичном обращении злокачественные новообразования-
2. оценивать необходимость проведения онкобольным после их радикального хирургического лечения адъювантной полихимиотерапии, ее полноту и качество-
3. использовать данный метод при динамическом наблюдении за онкологическими больными.
ЛИТЕРАТУРА
1. Общая онкология. Руководство для врачей / Под редакцией Н. П. Напалкова. — Л., 1989. — 646 с.
2. Состояние онкологической помощи населению России в 2008 году / Ред. В. И. Чиссов,
В. В. Старинский, Г. В. Петрова. — М., 2008. — 190 с.
3. Чиссов В. И. Ошибки в клинической онкологии / В. И. Чиссов, А. Х. Трахтенберг. — М.: Медицина, 2001. — 544 с.
4. Энциклопедия клинической онкологии. Руководство для практикующих врачей / Под редакцией М. И. Давыдова. — М.: РЛС, 2004. — 1536 с.
5. Isolation of rare circulating tumour cells in cancer patients by microchip technology / Sunitha
Nagrath, Lecia V. Sequist, Shyamala Maheswaran, P. 1235−1239 (20 Dec 2007), doi: 10. 1038/nature06385, Daphne W. Bell et al. // Nature. — Vol. 450. — Letters to Editor.
Сведения об авторах
Чимитов Анатолий Агванович — к.м.н., заместитель главного врача по лечебной работе ГУЗ БРОД. ГУЗ Бурятский республиканский онкологический диспансер, 670 047, г. Улан-Удэ, ул. Пирогова, 32, E-mail: rod@burnet. ru, тел. 43−96−26. Рязанцева Наталья Владимировна — д.м.н., профессор, проректор по СР и ИП ГОУ ВПО СибГМУ Сибирский государственный медицинский университет, 634 050, г Томск, ул. Московский тракт, 2, тел. 55−77−47.
Дамбаев Георгий Цыренович — д.м.н., профессор, член-корреспондент РАМН, зав. кафедрой госпитальной хирургии СибГМУ. Сибирский государственный медицинский университет, 634 050, г. Томск, ул. Московский тракт, 2, тел. 41−75−70. Хитрихеев Владимир Евгеньевич — д.м.н., профессор, зав. кафедрой госпитальной хирургии БГУ Бурятский государственный университет, 670 000, г. Улан-Удэ, ул. Смолина, 24а, E-mail: hitriheev@rambler. ru, тел. 89 025 639 936.
Перинов Александр Петрович — к.м.н., главный врач ГУЗ БРОД. ГУЗ Бурятский республиканский онкологический диспансер, 670 047, г. Улан-Удэ, ул. Пирогова, 32, E-mail: rod@burnet. ru, тел. 43−72−40.
Ханхашанова Тамара Дмитриевна — врач клинической лабораторной диагностики (цитолог). ГУЗ Бурятский республиканский онкологический диспансер, 670 047, г. Улан-Удэ, ул. Пирогова, 32, тел. 43−96−26.
Медведев Владимир Игоревич — эксперт-физик, ГУЗ Бурятский республиканский онкологический диспансер, 670 047, г. Улан-Удэ, ул. Пирогова, 32, E-mail: rod@burnet. ru, тел. 41−67−12.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой