Ранозаживляющая активность геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

УДК 616−001. 4−092. 9:582. 998
РАНОЗАЖИВЛЯЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ ГЕЛЯ НА ОСНОВЕ ГУСТОГО ЭКСТРАКТА ТРАВЫ ПРОЗАННИКА КРАПЧАТОГО Бубенчикова В. Н., Малютина А. Ю., Новикова Л. С., Григорьян А. Ю., Затолокина М. А., Жиляева Л. В.
ГБОУ ВПО «Курский государственный медицинский университет», Курск, e-mail: nastya. kgmu@mail. ru
Одной из важных проблем медицины на протяжении многих лет остается разработка эффективных методов лечения инфицированных раневых процессов. Заживление раны — сложный биологический процесс, в комплексной терапии которого актуальным направлением является разработка ранозаживляющих средств, обладающих широким спектром фармакологического действия и оказывающих влияние на разные звенья раневого процесса. Для решения этой проблемы нами предлагается гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого (Achyrophorus maculatus L.). Цель настоящего исследования состояла в изучении ранозаживляющей активности фитогеля густого экстракта травы прозанника крапчатого. В статье представлены результаты по изучению его ранозаживляющей активности посредством планиметрических, микробиологических и гистологических исследований. Полученные результаты позволяют рекомендовать гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого в качестве местного противовоспалительного и ранозаживляющего средства.
Ключевые слова: Achyrophorus maculatus L., Asteraceae, ранозаживляющая активность, густой экстракт
WOUND-HEALING ACTIVITY OF A GEL WITH THE ACHYROPHORUS MACULATUS L. DENSE EXTRACT Bubenchikova V.N., Malyutina A.Y., Novikova L.S., Grigoryan A.Y., Zatolokina M.A., Zhilyaeva L.V.
Kursk State Medical University, Kursk, e-mail: nastya. kgmu@mail. ru
The development of effective treatments for infected wound healing process is one of the important problems of medicine for many years. Wound healing is a complex of biological process in the treatment of which actual direction is the development of wound-healing drugs that have a wide range of pharmacological actions and influence the different links of wound healing. We propose a gel with the Achyrophorus maculatus L. dense extract to solve this problem. The aim of this investigation was to examine the wound-healing activity of fitogel with the Achyrophorus maculatus L. dense extract. The article presents the results of a study of its wound healing activity by planimetric, microbiological and histological research. The obtained results allow us to recommend a gel with the Achyrophorus maculatus L. dense extract as a topical anti-inflammatory and wound-healing drug.
Keywords: Achyrophorus maculatus L., Asteraceae, wound-healing activity, dense extract
Современная медицина предлагает большое количество методов для терапии раневых процессов различной этиологии, преимущественно обусловленных микрофлорой и развитием воспалительной реакции. Разработано и предложено множество антимикробных препаратов, однако явление резистентности у микроорганизмов к используемым лекарственным препаратам, снижение общей и местной иммунологической активности требуют совершенствования уже имеющихся и поиска новых методов лечения и препаратов, способных оказывать комплексное антибактериальное, противовоспалительное и репаративное воздействие [1, 2].
Незаменимой лекарственной формой в лечении раневых повреждений остаются мази, кремы и гели, интерес к которым в последние годы сильно возрос в связи с новой тенденцией включения в их состав фитопрепаратов разной степени очищенно-сти. Препараты растительного происхождения проявляют себя в качестве основных
действующих компонентов. Они оказываю мягкое действие и малую токсичность на фоне высокой эффективности, где комплекс биологически активных веществ оказывает разностороннее и взаимодополняющее действие. Это дает возможность использовать их длительно и без возникновения побочных явлений [10].
В народной медицине трава прозанника крапчатого (АсЬугорЬош шасцМш Ь.) широко известна как противовоспалительное, антисептическое и ранозаживляющее средство, на чем основано его использование при лечении кожных заболеваний. С этой целью свежие измельченные листья прикладывают к гнойным ранам для их очищения и заживления [12].
Цель данного исследования состояла в изучении ранозаживляющей активности фитогеля густого экстракта травы прозан-ника крапчатого.
Материалы и методы исследований
Объектом наших исследований явилась трава прозанника крапчатого, заготовленная на территории
Курской области в 2012 году в период массового цветения растений, из которых готовили фитогель.
При создании фитогеля большое внимание уделялось подбору компонентов основы, в которую вводились лекарственные вещества. Отсутствие токсичности, соответствие нормам микробиологической чистоты, физиологическая инертность, устойчивость определило наш выбор в пользу 5% натрий карбокси-метилцеллюлозы (№КМЦ). Обладая адсорбционными свойствами, как и другие водорастворимые эфиры целлюлозы, №КМЦ поглощает различного рода выделения поврежденной кожи и создает защитную пленку на ее поверхности [6, 7, 14].
Фитопрепарат готовили из расчета 5%о геля №КМЦ, в который вводили в различных концентрациях густой экстракт травы прозанника крапчатого.
Установление оптимальной концентрации геля с густым экстрактом исследуемого растения и определение спектра его антимикробной активности осуществляли в опытах in vitro методом диффузии в агар на плотных питательных средах с использованием тест-штаммов микроорганизмов. Чувствительность определяли по отношению к грамположительным (Staphylococcus aureus ATCC 6538-P), грамотрица-тельным (Escherichia coli ATCC 25 922, Proteus vulgaris NCTC 4636 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027) микроорганизмам, спорообразующей культуры Bacillus cereus ATCC 10 702. Фунгицидную активность изучали относительно дрожжеподобного гриба рода кандида (Candida albicans ATCC 885−653) [8].
Культуры предварительно выращивали на мя-сопептонном агаре в течение 24−48 ч. Смыв тест-штаммов микроорганизмов производили стерильным изотоническим раствором натрия хлорида и разводили согласно стандарту мутности Государственного контрольного института медицинских и биологических препаратов им. Л. А. Тарасевича до необходимой концентрации 1 млрд микробных тел в 1 мл.
Расплавленные питательные среды охлаждали до (40 ± 1)°С, засевали их со ответствующей тест-культурой и разливали по 10 мл в чашки Петри, установленные на горизонтальной плоскости, затем подсушивали в термостате в течение 30 мин при (37 ± 1) °С. На поверхность засеянной среды помещали на равном расстоянии от края чашки и друг от друга стерильные цилиндры одного размера и массы. В каждый цилиндр вносили по 0,1 г исследуемого образца лекарственного препарата. Выдерживали чашки в течение 1 ч при комнатной температуре для устранения колебаний во времени между внесением экспериментального образца и началом термоста-тирования. Затем чашки инкубировали в термостате при (36 ± 1) °С в течение 18 ч. По истечении срока инкубации измеряли зоны ингибирования роста тест-штаммов (мм) [4].
Изучение ранозаживляющей активности проводилось в экспериментах in vivo на 54 белых крысах-самцах линии Wistar, в соответствии с Конвенцией по защите животных, используемых в эксперименте и других научных целях, принятой Советом Европы в 1986 г. Для исследования отбирали животных массой 180,0 ± 20,0 г без внешних признаков заболевания, прошедших карантин в виварии ГБОУ ВПО КГМУ. Все животные содержались в одинаковых условиях на стандартном пищевом рационе.
Животным под наркозом моделировалась инфицированная рана, для чего на выбритом от шерсти участке спины без соблюдения стерильных условий
иссекали кожу с подкожной клетчаткой размером 15×15 мм. Для стандартизации условий лечения, предупреждения деформации раны, а также для предупреждения высыхания, загрязнения раневой поверхности и укусов другими животными над раной подшивали к коже «Устройство для защиты ран» [9, 11].
В соответствии с поставленной целью и задачами эксперимента животные были разделены на 3 серии по 18 в каждой, из которых контрольной была серия без лечения. В контрольной серии животным производилась только ежедневная обработка раны 3% раствором перекиси водорода. В серии сравнения (5% №КМЦ) ежедневно производилась обработка раны 3% раствором перекиси водорода и наложение марлевой салфетки с 5% гелем натрий карбоксиме-тилцеллюлозы. В серии — 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого (15% гель) ежедневно производилась обработка раны 3% раствором перекиси водорода и наложение марлевой салфетки с 15% гелем на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого. Перевязки экспериментальным животным во всех сериях производили один раз в день, ежедневно в течение 10 суток.
Планиметрические исследования. Для объективной оценки скорости заживления раны по изменению ее площади использовали метод Л. Н. Поповой [4]. Площадь ран определяли следующим образом: на рану накладывали прозрачную пленку, на которую черным маркером наносили ее контур (данную процедуру выполняли поочередно всем исследуемым животным). Определив площадь ран у экспериментальных животных в каждой серии, вычисляли среднюю площадь (M ± m), процент уменьшения площади ран от исходного размера (т.е. процент заживления раны) и скорость заживления ран (т.е. процент уменьшения площади за сутки).
Микробиологическое исследование включало количественное определение микроорганизмов в динамике в 1 г ткани инфильтрата по следующей методике. После выведения животного из эксперимента в стерильных условиях осуществляли забор участка инфильтрата раны массой 0,1−0,5 г, взвешивали и вычисляли коэффициент пересчета на 1 г ткани (К). Затем участок инфильтрата раны растирали в стерильной ступке и суспензировали в изотоническом растворе натрия хлорида из расчета 1: 10. Далее делали десятикратные разведения суспензии в изотоническом растворе натрия хлорида до 10−3, а при необходимости и более. Из каждого разведения производили посев 0,1 мл суспензии в чашки Петри с плотной питательной средой (агар). Посевы инкубировали в термостате при температуре (37 ± 1) °С в течение 20 ч, затем 1 сут выдерживали при комнатной температуре. После этого производили подсчет колоний, выросших на чашке, и делали соответствующий пересчет на 1 г ткани. Подсчет колоний производили на тех чашках, где колонии росли изолированно и количество их не превышало 300 [4].
Гистологическое изучение раневых биоптатов производили на третьи, седьмые и десятые сутки от начала лечения. Животных выводили из эксперимента путем передозировки эфирного наркоза. Забор материала осуществляли путем иссечения участка мягких тканей дна и прилежащего края раны. Взятый материал сразу фиксировали в 10% растворе ней трального формалина с последующей проводкой по восходящим спиртам и заливкой в парафин по стандартной методике. Затем изготавливали гистологиче-
¦ FUNDAMENTAL RESEARCH № 8, 2013 ¦
ские срезы толщиной 5−7 мкм. и окрашивали гематоксилином и эозином [5, 13].
Полученные данные обрабатывали статистически посредством электронных таблиц «Microsoft Excel» и «Биостатистика»: вычисляли средние арифметические, стандартное отклонение. Нормальность распределения признаков определяли по критерию Шапиро-Уилка. Обработку результатов проводили с использованием непараметрических критериев для множественных выборок Крускала-Уоллиса и Ньюме-на-Кейлса. При уровне значимости p & lt- 0,05 выявленные различия считались статистически значимыми [3].
Результаты исследования и их обсуждение
Анализ результатов, полученных при микробиологическом исследовании, пока-
В сериях 2 и 3 по сравнению с контрольной достоверное различие по проценту уменьшения площади ран отмечается с первых по седьмые сутки, на десятые сутки достоверных различий не выявлено в серии 2. Между сериями 2 и 3 достоверное различие по проценту уменьшения площади ран отмечается только на десятые сутки.
Процент уменьшения площади ран в сериях 2 и 3 близок по значениям в первые и третьи сутки. На седьмые процент уменьшения площади ран в серии 3 на
зал, что наиболее выраженной антимикробной активностью обладает гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого в количестве 15%. За исключением Proteus vulgaris, проявившего умеренную чувствительность к фитопрепарату, все остальные штаммы показали высокую чувствительность.
Из анализа данных по изменению площади ран (табл. 1) следует, что исходные экспериментальные раны у всех животных были сопоставимы по своей площади. С течением времени во всех сериях происходило постепенное уменьшение площади ран в сравнении с предыдущим сроком наблюдения.
2,84% превысил таковой в серии 2 и на 11,82% - в серии 1.
К десятым суткам от начала лечения в контрольной серии площадь ран уменьшилась на 229,46 мм², в серии 2 — на 235,04 мм², в серии 3 — на 239,1б мм2.
Динамика изменения скорости заживления ран в экспериментальных сериях представлена в табл. 2. Из анализа полученных результатов следует, что скорость заживления ран в сериях 2 и 3 по сравнению с контролем достоверно выше на первые-третьи сутки.
Таблица 1
Динамика изменения площади ран у экспериментальных животных в процессе лечения (М ± т)
Серии Показатель Исходная площадь 1 сут 3 сут 7 сут 10 сут
n = 18 n = 18 n = 18 n = 12 n = 6
Серия 1 (контрольная) 8 раны (мм2) ПУП* (%) 250,79 і 0,56 250,46 і 0,43 0,13 і 0,17 196,17 і 3,82 21,77 і 1,55 72,17 і 2,29 71,32 і 0,94 21,33 і 1,86 91,51 і 0,76
Серия 2 (5 у штц) 8 раны (мм2) ПУП (%) 250,04 і 0,36 248,38 і 0,32і 0,66 і 0,15і 172,39 і 5,20і 30,67 і 2,05і 49,00 і 4,44і 80,30 і 1,78і 15,00 і 3,02і 93,98 і 1,21
Серия 3 (15% гель) 8 раны (мм2) ПУП (%) 248,83 і 0,60 246,58 і 0,62і 0,90 і 0,23і 171,28 і 4,32і 30,51 і 1,76і 41,67 і 3,27і 83,14 і 1,33і 9,67 і 1,89і, 2 96,12 і 0,76і, 2
Примечание. ПУП — процент уменьшения площади ран. 1р & lt- 0,05 (сравнивались между собой серия 2 и 3 с серией 1) — 2р & lt- 0,05 (сравнивались между собой серия 3 с серией 2).
Таблица 2
Заживление ран у экспериментальных животных в процессе лечения (М ± т)
Серии Скорость заживления (%/сут)
1−3 сут 3−7 сут 7−10 сут
n = 18 n = 12 n = 6
Серия і (контрольная) 10,80 і 0,79 12,24 і 0,51 6,43 і 0,34
Серия 2 (5% NaMM,) 14,98 і 0,99і 12,95 і 0,74 4,58 і 0,70
Серия 3 (15% гель) 14,89 і 0,86і 13,30 і 0,53 4,28 і 0,82
Примечание. 1р & lt- 0,05 (сравнивались между собой серия 2 и 3 с серией 1).
Таким образом, полученные данные тивности 15% геля на основе густого экс-
планиметрического исследования под- тракта травы прозанника крапчатого. Он
тверждают наличие ранозаживляющей ак- способствует уменьшению площади ран
к десятым суткам более чем на 96%, тогда как 5% КаКМЦ показывает уменьшение площади на 93,98%. Высокая скорость заживления ран в первые семь суток наблю-
дения свидетельствует об активности фитопрепарата в фазу экссудации.
Результаты микробиологического исследования ран представлены в табл. 3.
Таблица 3
Динамика определения микробной обсемененности ран (M і m)
Серии (КОЕ в і г ткани)
і сут 3 сут 7 сут 10 сут
n = 6 (в каждом исследовании)
Серия і (контрольная) 4,9 і і, 1 108 3,7 і і, 1 108 2,2 і 0,85і08 1,5 і 0,33і08
Серия 2 (5 У NaMM,) 4,8 і 0,82і08 3,8 і 0,72−108 1,9 і 0,16і08 4,5 і і, 00 1 07(1)
Серия 3 (15% гель) 4,8 і 0,9іі08 9,5 і 0,95і07(12) 4,2 і 0,і8 107(12) 10,0 і 0,0і106(12)
Примечание. 1р & lt- 0,05 (сравнивались между собой серия 2 и 3 с серией 1) — 2р & lt- 0,05 (сравнивались между собой серия 3 с серией 2).
Во всех сериях микробная обсемененность ран на первые сутки составляла в среднем 4,83 і 0,92 108 КОЕ/г. В контрольной серии микробная обсемененность ран остается на высоком уровне на всех сроках наблюдения. В серии 2 она достоверно меньше, чем в контрольной, только на десятые сутки и составляет 4,5 і 1,107 КОЕ/г, что в 3,25 раза меньше.
В серии 3 микробная обсемененность ран достоверно меньше относительно контрольной серии и серии 2 на всех сроках наблюдения. К десятым суткам микробная обсеме-ненность достигла 10,0 і 0,1 106 КОЕ/г, что в 14,65 и 4,5 раза меньше данных, показанных серией 1 и 2 соответственно.
Таким образом, анализ полученных результатов свидетельствует, что использование при лечении инфицированных ран геля на основе густого экстракта травы прозан-ника крапчатого в концентрации 15 У способствует скорейшему уменьшению микробной обсемененности ран по сравнению с использованием 5% водного геля NaКMЦ и способствует более быстрому заживлению раневой поверхности.
Полученные результаты морфологического исследования показали, что 15 У гель на основе густого экстракта травы прозан-ника крапчатого обладает хорошо выраженным стимулирующим эффектом на пролиферативную и функциональную активность клеток грануляционной ткани, который прямо пропорционален сроку эксперимента.
Несмотря на практически полное восстановление эпидермиса, произрастающего от краев раневой поверхности, на отдельных участках частично сохранился струп, в контрольной серии и серии с использованием основы в качестве 5% раствора NaКMЦ. По визуальной оценке в грануляционной ткани на стандартной единице площади среза наблюдается более высокое содержание клеточных элементов, чем в группе с исполь-
зованием 15% геля, что говорит о меньшей степени зрелости этой ткани.
Реактивные изменения дермы, а именно ее клеточная плотность в группах контрольной серии и серии с использованием 5% раствора №КМЦ была значительно выше уже на начальных сроках эксперимента в сравнении с группой с использованием 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого, что свидетельствует о более затяжном характере воспалительного процесса, следовательно, и о более длительном заживлении раны.
Относительно большее количество клеток фибробластического ряда у животных с использованием 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого, чем в контрольной серии и серии 5% раствора NaКМЦ также свидетельствует о повышенной регенераторной активности в этой группе.
Выявленное максимальное количество макрофагов в группах с использованием 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого также свидетельствует об ускорении процессов регенерации, так как макрофаги при репаративных и патологических процессах не только модулируют пролиферативную и синтетическую функции фибробластов, но и путем паракринной стимуляции активизируют миграцию и пролиферацию эндотелиоци-тов, процессы ангиогенеза.
Таким образом, использование 15% геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого уменьшает воспалительные изменения, активизирует макро-фагальную реакцию, восстанавливает нарушенные межклеточные взаимодействия, усиливает ангиогенез, пролиферацию
и дифференцировку фибробластов, синтез и секрецию коллагена, процессы фибрилло-генеза, созревание и ремоделирование грануляционной ткани и ее эпителизацию.
В FUNDAMENTAL RESEARCH № 8, 2013 В
Выводы
1. Установлена оптимальная концентрация геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого, оказывающая антибактериальное и стимулирующее действие при заживлении ран, на основании чего определен состав фитопрепарата для терапии раневого процесса.
2. Согласно результатам планиметрического исследования, 15 У гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого способствует уменьшению площади ран к десятым суткам более чем на 96 У, тогда как основа — 5% раствор NaКMЦ показывает уменьшение площади на 93,98 У.
3. Высокую чувствительность к 15 У гелю на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого показали тест-штаммы Staphylococcus aureus ATCC 6538-P. Escherichia coli ATCC 25 922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 Bacillus cereus ATCC 10 702 и Candida albicans ATCC 885−653. В отношении микроорганизмов Proteus vulgaris NCTC 4636 был отмечен умеренный рост, определяющий умеренную чувствительность к исследуемому фитопрепарату.
4. В опытах in vivo 15 У гель на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого оказывал выраженное бактерицидное действие на клетки, что способствует скорейшему уменьшению микробной обсе-мененности и более быстрому заживлению раневой поверхности. На десятые сутки наблюдения у крыс, получавших лечение 15 У гелем на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого, микробная обсеме-ненность ран снижалась в 14,65 раз по сравнению с контролем без лечения.
5. Исследование морфологической картины репаративной регенерации тканей после моделирования инфицированной раны в контрольной группе и группе, получавшей
5% гель NaКMЦ, позволяет сделать вывод
06 эффективности применения 15 У геля на основе густого экстракта травы прозанника крапчатого в качестве противовоспалительного и ранозаживляющего средства.
Список литературы
1. Бабушкина И. В. Наночастицы металлов в лечении экспериментальных гнойных ран // Саратовский научно-медицинский журнал. — 2011. — Т. 7, № 2. — С. 530−533.
2. Бочарова И. Г, Автина Н. В., Честникова С. Э. К вопросу о разработке лекарственных форм для лечения воспалительных процессов верхнечелюстных пазух и экспериментальном обосновании их применения // Курский научно-практический вестник «Человек и его здоровье». -2005. — № 3. — С. 11−15.
3. Герасимов А. Н. Ыедицинская статистика: учебное пособие для студентов медицинских вузов. — M.: ЫНА, 2007 — 475 с.
4. Иммобилизированные формы антисептиков для лечения гнойных ран в эксперименте / А. Ю. Григорьян, А. И. Бежин, Т. А. Панкрушева и др. // Человек и его здоровье. — 2011. — № 4. — С. 24−33.
5. Гистологическая характеристика течения раневого процесса при лечении экспериментальных гнойных ран препаратами на основе энтеросгеля / А. Ю. Григорьян, А. В. Иванов, А. И. Бежин и др. // ЭНИ Забайкальский медицинский вестник. — 2011. — № 2. — С. 132−145.
6. Дементьева Д. И. Определение растворимости в воде натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы: методические рекомендации по выполнению лабораторной работы по дисциплине «Полимерные материалы народно-хозяйственного назначения» для студентов специальности 240 702 «Химическая технология полимерных композиций, порохов и твердых ракетных топлив» / Д. И. Дементьева, Р.Г. Мамашев- Алт. гос. техн. ун-т, БТИ. — Бийск: Изд-во Алт. гос. техн. унта, 2011. — 22 с.
7. Разработка состава, технологии и изучение вагинальных суппозиториев для лечения неспецифических кольпитов / М. А. Захарова, Л. Н. Ерофеева, Н. Д. Афонина и др. // Человек и его здоровье. — 2009. — № 2. — С. 134−142.
8. Кхалед А. З. Изучение микробиологической активности различных экстрактов из некоторых видов рода Rumex L. / А. З. Кхалед, О. П. Стрилец // Провизор. — 2002. -Вып. 7. — С. 34−35.
9. Применение раневых покрытий биатравм и ресорб для лечения гнойных ран / В. А. Лазаренко, А. И. Бежин, А. В. Чердаков и др. // Человек и его здоровье. — 2010. — № 2. — С. 5−14.
10. Фармакологические исследования и технология фитогелей для коррекции последствий сахарного диабета / М. А. Огай, Э. Ф. Степанова, Л. П. Ларионов, А. Ю. Петров // Вестник ВГУ. Серия: Химия. Биология. Фармация. — 2009. -№ 2. — С. 171−173.
11. Патент Р Ф № 2 009 149 571/22, 10. 06. 2010.
12. Растительные ресурсы СССР: цветковые растения, их химический состав, использование- семейство Asteraceae (Compositae). — СПб.: Изд-во «Наука», 1993. — С. 16.
13. Судебно-медицинская гистология. Руководство для врачей. (Издание второе, переработанное и дополненное) / А. В. Пермяков, В. И. Витер, Н. И. Неволин. — Ижевск-Екате-ринбург- Экспертиза, 2003. — 214 с.
14. Тихонов А. И., Ярных Т. Г. Технология лекарств: учеб. для фармац. вузов и фак.: Пер. с укр. / под ред. А. И. Тихонова. — Х.: Изд-во НФАУ- Золотые страницы, 2002. — 704 с.
References
1. Babushkina I.V. Saratov Journal of Medical Scientific. 2011, vol. 7, no. 2, pp. 530−533.
2. Bocharova I.G., Avtina N. V, Chestnikova S. Je. Kursk Scientific Practical Journal «Man and his health», 2005, no. 3, pp. 11−15.
3. Gerasimov A.N. Medical statistics: A manual for medical students. M., МИА, 2007. 475 p.
4. Grigoryan A. Yu., Bezhin A. I, Pankrusheva T.A. et al. Kursk Scientific Practical Journal «Man and his health», 2011, no. 4, pp. 24−33.
5. Grigoryan A. Yu., Ivanov A.V., Bezhin A.I. et al. Medical Journal of Trans-Baikal, 2011, no. 2, pp. 132−145.
6. Dementeva D.I. Determination of the water solubility of sodium carboxymethyl cellulose: guidelines. Bijsk, Publisher of Altai State Technical University, 2011. 22 p.
7. Zaharova M.A., Erofeeva L.N., Afonina N.D. et al. Kursk Scientific Practical Journal «Man and his health», 2009, no. 2, pp. 134−142.
8. Khaled, A.Z. Pharmacist, 2002, is. 7, pp. 34−35.
9. Lazarenko VA., Bezhin A.I., Cherdakov A. V et al. Kursk Scientific Practical Journal «Man and his health», 2010, no. 2, pp. 5−14.
10. Ogaj M.A., Stepanova Je.F., Larionov L.P., Petrov A. Yu. Bulletin of VSU. Series: Chemistry. Biology. Pharmacy, 2009, no. 2, pp. 171−173.
11. RF Patent № 2 009 149 571/22, 10. 06. 2010.
12. Plant Resources of the USSR: flowering plants, their chemical composition, the use, the Asteraceae (Compositae) family. St. Petersburg, «Nauka» Press, 1993. рр. 16.
13. Forensic medical histology. A guide for doctors. (Second edition, revised and enlarged) / A.V. Permyakov, V.I. Viter, N.I. Nevolin. Izhevsk-Yekaterinburg, Examination, 2003. 214 p.
14. Tihonov A.I., Yarnyh T.G. Drugs Technology: Textbook for pharmaceutical universities and faculties: Trans. from Ukrainian. / Ed. A. Tikhonov. Kharkov: Publisher KPAU, Golden Pages, 2002. 704 p.
Рецензенты:
Хабаров А. А., д. фарм.н., профессор кафедры общей химии, ГБОУ ВПО «КГМУ», г. Курск-
Сипливая Л. Е., д.б.н., профессор, заведующая кафедрой фармацевтической, токсикологической и аналитической химии, ГБОУ ВПО «КГМУ», г. Курск.
Работа поступила в редакцию 07. 06. 2013.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой