Распространение условно-патогенных грибов синантропными тараканами

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Биология


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

МИКРОБИОЛОГИЯ
УДК 582. 28- 595. 772
Ю. А. Чикин, С.В. Лукьянцев
РАСПРОСТРАНЕНИЕ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ СИНАНТРОПНЫМИ ТАРАКАНАМИ
Аннотация. Синантропные тараканы способствуют направленной и достаточно быстрой сукцессии микобиоты- доминирующими становятся виды грибов, известные как продуценты разнообразных биоактивных метаболитов, в том числе микотоксинов. В популяциях синантропных тараканов могут накапливаться микромицеты, потенциально опасные для здоровья человека и животных, а также способные к биодеструкции в условиях книгохранилищ и библиотек.
Ключевые слова: условно-патогенные грибы, синантропные тараканы.
В последние годы внимание исследователей привлекают антропогенные биоценозы, исследование которых имеет фундаментальное значение и даёт информацию, полезную для оптимизации условий жизни человека. В результате антропогенного воздействия на биоценозы происходит перестройка сообществ почвенных грибов: видовое разнообразие уменьшается, снижается доля редких видов, начинают преобладать токсинообразующие виды [1]. В почвах, воздухе и на поверхности растений становятся доминантными активные продуценты микотоксинов: Penicillium chrysogenum Thom, P. vulpinum Seifert & amp- Samson, P. granulatum Bainier. Кроме того, у ряда изолятов грибов рода Penicillium (например, P. chrisogenum), выделенных из городской среды, обнаруживаются ранее не встречавшиеся микотоксины, среди которых есть такие крайне опасные для здоровья человека, как а-циклопиазоновая кислота и клавиновые эргоалкалоиды [2].
Всё больше исследователей обращают внимание на сообщества организмов жилых помещений, в частности домашней пыли. В них представлены только гетеротрофы, значительную часть которых составляют грибы. Наряду с микроорганизмами домашнюю пыль населяют разнообразные членистоногие, находящиеся с грибами в тесных биоценотических отношениях. Например, показано [3], что обитающие в домашней пыли клещи способствуют направленной и достаточно быстрой сукцессии микобиоты — происходит её обеднение, доминирующими становятся аспергиллы (Aspergillus niger Tiegh, A. flavus Link) и пенициллы (P. chrysogenum). Названные виды грибов давно известны в качестве продуцентов разнообразных биоактивных метаболитов, в том числе микотоксинов [4].
Распространёнными и многочисленными сожителями человека являются синантропные тараканы. Традиционно в научной литературе обсуждается их роль в переносе и распространении возбудителей инфекционных и паразитарных заболеваний человека [5, 6]. Например, чёрный таракан (Blatta orientalis) может играть роль переносчика стафилококковой инфекции
(Staphylococcus albus и St. aureus) — известно также, что такие опасные для человека бактерии, как Clostridium, Shigella и Mycobacterium tuberculosis (туберкулёзная палочка), не претерпевают изменений, проходя через пищеварительный тракт тараканов, и не теряют своей патогенности [7, 8]. Синантропные тараканы являются источником аллергенов человека, что оказывает влияние на санитарно-гигиеническую обстановку в жилых помещениях [9, 10].
По пищевой специализации большинство таракановых сапрофаги, для некоторых видов отмечается переход к мицетофагии [11]. Естественно, что именно бактерии и грибы составляют основу микрофлоры кишечника, их споры постоянно выделяются с испражнениями. Кишечник тараканов содержит очень богатую и разнообразную симбиотическую и транзитную микрофлору и микрофауну [12], состав которой существенно зависит от состава и качества доступной для синантропов пищи. В их фекалиях присутствует агрегационный феромон [13]- питаясь, тараканы загрязняют пищевой субстрат испражнениями, привлекающими к источнику пищи других насекомых. Все это способствует горизонтальному переносу микроорганизмов и накоплению их в популяции насекомых. При передаче инфекции несовершенного гриба Metarhizium anisopliae между особями рыжего таракана (Blattella germanica) нимфы пятого возраста, подвергнутые воздействию конидий гриба, заражались и в дальнейшем передавали инфекцию здоровым тараканам- в итоге за 9−11 дней погибало до 50% тараканов [14].
Известный в качестве возбудителя зелёной мускардины широкого круга насекомых (более 200 видов) гриб M. anisopliae не является облигатным эн-томопатогеном, а широко распространён как на растительных остатках, так и в почве [15]. Поэтому есть основания предполагать, что в популяциях синан-тропных тараканов происходит распространение и накопление плесневых грибов, занимающих подобную экологическую нишу. Для ряда видов грибов, относящихся к родам Aspergillus, Penicillium, Fusarium, уже доказана их способность поражать живых насекомых в лабораторных условиях [16], однако сведения о накоплении токсичных и патогенных для человека грибов в популяциях синантропных тараканов носят отрывочный характер [17].
В последние десятилетия отмечается рост заболеваемости дерматомикозами, микотическими риносинуситами, бронхолёгочными заболеваниями и аллергической астмой. В числе причин болезней часто называют распространённые на растительных остатках и в почве плесневые грибы. Особенно подвержены этим заболеваниям люди с ослабленной иммунной системой, а также дети и подростки. Исследование возможностей накопления и распространения вредных для человека плесневых грибов в популяциях синантропных тараканов представляется весьма актуальным.
Материалы и методы исследования
В лабораторных популяциях исследовался состав микромицетов нескольких видов синантропных тараканов (Shelfordella tartara Sauss., Blaberus craniifer Serv., Nauphoeta cinerea Oliv., Blatta orientalis L., Blattella germanica L., Eurycotis floridana Walk., Periplaneta americana L.).
Выделение в культуру и определение грибов из тараканов и их фекалий производилось стандартными методами [18, 19]. Инфекционный материал для выделения грибов готовили разными способами. Для получения накопительных культур энтомофильных грибов остатки погибших тараканов, перемешанные со стерилизованными паром фрагментами хитинового покрова насекомых, выдерживали во влажной камере. Для получения чистых культур грибов применялись как раскладка на поверхность среды свежих трупов и отдельных частей препарированных насекомых (конечности, кишечник, надкрылья и т. п.), так и рассев суспензии, полученной при их растирании. Для оценки состава грибов, переносимых живыми тараканами, был опробован метод подсаживания насекомых в чашки Петри на свежую застывшую агаровую среду (сусло-агар, среда Чапека). Перед подсадкой насекомых отсаживали в отдельные садки, застеленные чистой фильтровальной бумагой. Выделение грибов из фекалий проводилось путём растирания материала в фарфоровой ступке пестиком и приготовления серии разведений в стерильной дистиллированной воде. Для кормления насекомых использовали культуры грибов на сусло-агаре, картофельном агаре и овсяном агаре. Для идентификации грибов применяли посев на агар Чапека и сусло-агар [19, 22].
Для модельных опытов по заражению тараканов грибами при контакте с заплесневелым растительным опадом использовали семена-летучки клёна ясенелистного, которые после увлажнения и автоклавирования засевались культурами грибов в колбах ёмкостью 250 мм³. В опытах были использованы выделенные нами из лабораторных тараканов Nauphoeta cinerea культуры Geotrichum candidum Link, Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bainier, Fusarium sp, а также культуры Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokin и Paecilomyces lilacinus (Thom) Samson, любезно предоставленные Б. А. Борисовым (Москва), Paecilomyces fumosoroseus (Wize) Brown & amp- Smith, (предоставлена В. В. Глуповым, Новосибирск). Объём растительного субстрата в колбе составлял около 150 мм³. После зарастания растительного субстрата мицелием проводилось перетряхивание его в пластиковые контейнеры ёмкостью 250 мм³, куда подсаживали и тараканов по 6 особей в контейнер (3 имаго и 3 личинки последнего возраста).
Результаты и их обсуждение
При наблюдении проводился внешний осмотр насекомых, отмечались отклонения в их окраске и поведении. Наиболее распространённым ранним признаком инфекционного поражения являлось изменение окраски покровов. Грибы обычно выделялись из насекомых, у которых на части покровов присутствовали пятна красноватого оттенка или более тёмные, буроватокоричневые. В культуре E. floridana были отмечены случаи появления плесневого налёта на спинных щитках, тёмные пятна на конечностях, обламывание последних 2−3 члеников конечностей и появление на обломках лапок живых тараканов белого налёта мицелия- после пересева на среду из них вырастали колонии Fusarium sp. и Geotrychum candidum.
Наряду с грибными инфекциями были выявлены и бактериальные поражения. Так, из погибших насекомых, у которых окраска тела становилась ярко-
красной, была выделена бактерия Serratia marcescens, вызывающая септицемию тараканов, а также бактерии рода Pseudomonas, которые были обнаружены не только в больных и погибших тараканах, но и в здоровых насекомых.
Из фекалий живых насекомых, а также из свежих трупов тараканов чаще всего выделялись грибы родов Aspergillus и Penicillium, реже — Scopulariopsis brevicaulis, Trichoderma harzianum Rifai и виды родов Cladosporium Link, Fusarium Link, Chaetomium Kunze, Absidia v. Tiegh., Cunninghamella Matr., Mucor Mich, Rhizopus Ehrenb., значительно реже — Verticillium lateritium Berk., Graphium sp., Geotrichum candidum. Из свежих трупов B. germanica массово выделялся Mucor plumbeus Bonord.- на трупах тараканов B. orientalis обильно спороносил Aspergillus ochraceus Wilhhelm. Условно-патогенный гриб Scopulariopsis brevi-caulis выделялся из трупов B. craniifer, B. orientalis, Sh. tartara, P. americana, но встречался и в фекалиях здоровых P. americana и N. cinerea.
В ходе серии опытов по исследованию микрофлоры фекалий Blatta orientalis выяснилось, что состав выделенных грибов довольно однообразен, но несколько меняется при смене рациона тараканов. Доминируют грибы родов Aspergillus, Penicillium, Cladosporium, Mucor, Trichoderma. Из фекалий рыжего таракана часто выделялся Aspergillus niger v. Tiegh, Trichoderma harzianum. При кормлении тараканов чистыми культурами грибов микобиота фекалий резко изменялась на период до 10 суток. Например, после скармливании тараканам B. orientalis культур Stachybotrys atra Corda и Aspergillus niger пропагулы этих грибов выделялись с фекалиями в течение 2 и 9 суток соответственно.
Общее количество грибных пропагул в 1 г фекалий тараканов Blatta orientalis при обычном режиме питания составляло примерно 8,9−104 КОЕ, а общее количество бактерий — 3,5 •Ю6 КОЕ на 1 г фекалий. Если тараканов в течение трёх дней не кормили, а потом скармливали им недельную культуру гриба Aspergillus niger на сусло-агаре, то количество микроорганизмов в рассевах суспензии фекалий увеличивалось в среднем на порядок. Грибы высевались в количестве 2,3−105 КОЕ, а бактерии — 2,1 •Ю7 КОЕ на 1 г фекалий. В последующем количественный состав микроорганизмов в фекалиях тараканов возвращался к прежним значениям.
В ходе опытов по кормлению чистыми культурами условно-патогенных и токсинообразующих грибов, таких как А. niger и Stachybotrys atra, выяснилось, что тараканы способны активно питаться ими. Возраст культуры грибов не оказывал существенного влияния на интенсивность их поедания тараканами.
После скармливания культуры А. niger пропагулы этого гриба выделялись из фекалий тараканов более 9 дней, причём совместно с А. niger вырастали колонии грибов родов Penicillium, Trichoderma, иногда Mucor. Количество и соотношение пропагул разных родов грибов изменялось. Например, в 1-й день после кормления в фекалиях преобладали пропагулы А. niger (2,7−105 на 1 г), на 4-й день количество пропагул А. niger упало до 3,2−104 на 1 г, но, кроме А. niger, появились колонии Penicillium и Trichoderma. Колонии грибов вырастали в соотношении: 1,0 (А. niger): 2,4 (Penicillium): 1,7 (Trichoderma).
После скармливания тараканам культуры Stachybotrys atra у них в течение 1-го дня наблюдались расстройство пищеварения и учащение дефекации, а затем в течение двух суток после кормления из фекалий выделялись пропагулы только этого гриба. Позднее в микобиоте фекалий стали преобладать грибы родов Rhizopus (на 3-й день), Chaetomium (на 3−5-й день), Acremonium (на 6-й день), Penicillium (на 6−9-е сутки), Aspergillus, Trichoderma (на 10-е сутки).
При постановке аналогичных опытов с использованием других видов тараканов и других грибов обнаружилось, что тараканы активно питаются взятыми для опыта культурами, но проявляют определённую избирательность в поедании грибов. Например, при скармливании тараканам Nauphoeta cinerea выращенных на сусло-агаре культур грибов Stachybotrys atra, Memnoniella echinata (Rivolta) Galloway, Aureobasidium pullulans (de Bary) G. Amaud, Aspergillus ochraceus, Botrytis cinerea Pers., Paecilomyces fumosoroseus обнаружилось следующее: тараканы почти не едят культуры P. fumosoroseus и Stachybotrys atra, из культур M. echinata и A. ochraceus выедают около половины мицеля и спо-роношений, а культуры B. cinerea и A. pullulans съедают полностью. В одном из вариантов опыта, когда для кормления культурой B. cinerea была отобрана самка с оотекой, наблюдалось преждевременное сбрасывание оотеки, из которой впоследствии так и не вышли личинки.
В опытах по контактному заражению тараканов грибами от заплесневелого растительного опада было установлено, что во всех случаях насекомые не избегали контакта с мицелием условно-патогенных грибов, даже активно зарывались в заражённый грибами субстрат. Внешние признаки заражения тараканов появлялись в опытах с грибами Metarhizium anisopliae, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces fumosoroseus через 1−2 дня после подсаживания насекомых в контейнеры с заражённым субстратом. При заражении M. anisopliae из 6 взятых в эксперимент насекомых на 5-й день опыта погибло 2, а на 7-й день -ещё 2. При заражении P. lilacinus на 5-й день опыта погиб один таракан. В остальных случаях наблюдалось постепенное снижение двигательной активности насекомых, на надкрыльях у многих из них были отмечены участки с изменённой пигментацией и мицелиальным налётом, но в течение эксперимента (3 месяца) насекомые оставались живы.
Какой-либо специфичности переноса определённых грибов тем или иным видом тараканов нами не обнаружено. Большинство грибов, выявленных нами в культурах тараканов, при определённых условиях способны, судя по литературным данным, существенно вредить здоровью людей с ослабленной иммунной системой [4, 22, 23].
Большинство грибов, выявленных нами в популяциях синантропных тараканов, обладают сильной целлюлозолитической активностью и являются основными деструкторами бумаги [21]. Они способны заселять различные отделочные материалы жилых и хозяйственных помещений (обои и т. п.) даже при незначительном их увлажнении, в результате протечек сантехники и нарушения гидроизоляции помещений. Поведенческие особенности синантропных тараканов (склонность к агрегации и активный поиск влажных местообитаний) обусловливают возможность переноса этими насекомыми спор условнопатогенных грибов. Вероятно, присутствие в жилых помещениях тараканов
может быть дополнительным фактором риска развития у людей микогенной аллергии и микотоксикозов и т. д. (см. таблицу). Исследование переноса грибов тараканами и другими беспозвоночными может иметь значение и для профилактики распространения грибов-биодеструкторов (например, в условиях книгохранилищ и библиотек).
Грибы, выявленные в культурах тараканов, потенциально опасные для здоровья человека
Род (вид) грибов Вызываемые у человека заболевания
Absidia Инвазивные инфекции
Acremonium Онихомикоз, язва роговицы глаза, менингит, эндофтальмит, эндокардит
Aspergillus niger Отит, лёгочные инфекции
Aspergillus ochraceus Алиментарная нефропатия
Aureobasidium pullulans Перитонит, кератит, лёгочные инфекции
Chaetomium globosum Онихомикоз, перитонит, кожные инфекции
Cladosporium Кожные, лёгочные и диссеминированные инфекции, синуситы
Cunninghamella Пневмония, диссеминированные инфекции
Fusarium Кератит, перитонит, кожные и диссеминированные инфекции, алиментарная токсическая алейкия
Geotrichum candidum Бронхиальные и лёгочные инфекции
Penicillium purpurogenum Лёгочные инфекции
Rhizopus Пневмония, синуситы
Scopulariopsis brevicaulis Онихомикоз, кожные инфекции
Stachybotrys atra Дерматиты, легочные и желудочные кровотечения, лейкопения
Trichoderma harzianum Заболевания лёгких, лейкоз, почечная недостаточность
Verticillium lateritium Кератит, поражение роговицы, бронхиальные и лёгочные инфекции
Степень влияния приведенных в таблице грибов на популяцию тараканов существенно зависит от количества инфекций и условий обитания насекомых. При оптимальных условиях содержания даже целенаправленное контактное заражение выборки энтомофильными грибами не вызывает быстрой гибели всех инфицированных тараканов. Часть заражённых насекомых способна переносить грибы как на поверхности тела в виде мицелия и спор, так и в содержимом кишечника, способствуя накоплению инфекции в новых местообитаниях.
Рассматривая значение микрофлоры фекалий тараканов для распространения условно-патогенных грибов, следует заметить, что перенос разнообразных микроорганизмов с фекалиями животных — явление распространённое. В литературе отмечена тенденция накопления потенциально опасных зоо- и фитопатогенных видов грибов в переработанных беспозвоночными растительных субстратах [20]. Переносчиками условно-патогенной для человека микрофлоры могут являться и синантропные тараканы, поскольку споры
многих микроорганизмов при прохождении через их кишечник не теряют жизнеспособности.
Литература
1. Марфенина О. Е., Мирчинк Т. Г. Микроскопические грибы при антропогенном воздействии на почву // Почвоведение. 1988. № 9. С. 107−112.
2. Козловский А. Г., Винокурова Н. Г., Желифонова В. П. и др. Токсинообразующая способность грибов рода Penicillium, выделенных из антропогенно нарушенных экосистем // Современные проблемы микологии, альгологии и фитопатологии. М., 1998. С. 227−229.
3. Чекунова Л. Н. и др. Микромицеты домашней пыли и их взаимоотношения с синантропными клещами сем. Pyroglyphidae // Современные проблемы микологии, альгологии и фитопатологии. М., 1998. С. 293−294.
4. СпесивцеваН.А. Микозы и микотоксикозы животных. М.: Наука, 1960. 456 с.
5. Павловский Е. Н. Руководство по паразитологии человека. Москва- Ленинград: Наука, 1948. С. 619−625.
6. Бей-Биенко Г. Е. Насекомые таракановые // Фауна СССР. Москва- Ленинград: Наука, 1950. № 40. 343 с.
7. Артюхина И. Н., Евдокимова М. П. Длительность сохранения и выделения шигелл Флекснера и Зоне рыжим тараканом (Blattella germanica L.) при индивидуальном дозированном кормлении // Медицинская паразитология. 1973. № 5. С. 602−606.
8. Штейнхауз Э. Микробиология насекомых. М.: Иностранная литература, 1950. 768 с.
9. Дремова В. П., Алешо Н. А. Синантропные тараканы: Биология, экология, контроль численности. М.: ПРИНТ, 2003. 271 с.
10. Robinson W.H. Urban Entomology. London, 1996. 430 p.
11. Вишнякова В. Н. Отряд Blattidea. Таракановые // Историческое развитие класса насекомых. М., 1980. С. 136−145.
12. Tejera E. Les Blattes envisagees comme agents de dissemination des germes pathogenes // Comp. Rend. Soc. Biol. 1926. № 95. P. 1382−1384.
13. Жуковская М. И. Исследование агрегационного ферромона американского таракана: Автореф. дис. … канд. биол. наук. СПб., 1992. 19 с.
14. Kaaken W., Reid B.L., Bennett G.W. Horizontal Transmission of the Entomopathogenic Fungus Metarhizium-Anisopliae (Imperfect Fungi, Hyphomycetes) and Hydramethylnon Among German Cockroaches (Dictyoptera, Blattellidae) // Journal of entomological science. 1996. Vol. 31, № 4. P. 378−390.
15. Кириленко Т. С. Микромицеты почв под посевами ячменя и овса // Микромицеты почв. Киев: Наукова думка, 1984. 264 с.
16. Гомоюнова Н. П., Кальвиш Т. К. Биология и грибные болезни куколок Oedemagena tarandi L. и Cephemia trompe Madeer в условиях Чукотки // Изв. АН СССР. Сер. биол. наук. 1971. Т. 10, № 2. С. 93−102.
17. ЖужиковД.П. Чем опасны тараканы. М.: Колос, 2005. 94 с.
18. Билай В. И. Методы экспериментальной микологии. Киев: Наукова думка, 1973. 240 с.
19. Коваль Э. З. Определитель энтомофильных грибов СССР. Киев: Наукова думка, 1974. 260 с.
20. Ищенко И. А., Марфенина О. Е., Василенко А. Н. Сукцессии микроскопических грибов при переработке субстратов дождевыми червями // Микология и фитопатология. 1994. Т. 28, вып. 6. С. 61−70.
21. НюкшаЮ.П. Биологическое повреждение бумаги и книг. СПб.: РОСНО, 1994. 233 с.
22. Саттон Д., Фотергилл А., Ринальди М. Определитель патогенных и условнопатогенных грибов (Guid to clinicallysignificant fungi) / Пер. с англ. М.: Мир, 2001. 486 с.
23. Микотоксины. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. Женева, 1982. Вып. 11. 146 с.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой