Локальный уровень цитокинов при различных морфологических вариантах неоваскулярной мембраны у пациентов с влажной формой возрастной макулярной дегенерации

Тип работы:
Реферат
Предмет:
Медицина


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

IVh
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
УДК Б1Б. 7−007−092−018
ЛОКАЛЬНЫЙ УРОВЕНЬ ЦИТОКИНОВ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ВАРИАНТАХ НЕОВАСКУЛЯРНОЙ МЕМБРАНЫ У ПАЦИЕНТОВ С ВЛАЖНОЙ ФОРМОЙ ВОЗРАСТНОЙ МАКУЛЯРНОЙ ДЕГЕНЕРАЦИИ
М. М. Бикбов, Н. Е. Шевчук, Р. Р. Файзрахманов, А. Л. Ярмухаметова, Т. Р. Гильманшин,
ГБУ «Уфимский НИИ глазных болезней АН РБ», г. Уфа
Гильманшин Тимур Риксович — e-mail: vitreoretinal@yandex. ru
Целью исследования явилось определение уровня цитокинов (интерлейкинов — 1р, Б, 18, фактора роста эндотелия сосудов — VEGF и пигментного фактора эпителиального происхождения -PEGF) во влаге передней камеры глаза у пациентов с влажной формой возрастной макулярной дегенерации. В зависимости от морфологических изменений неоваскулярной мембраны пациенты были разделены на группы: 1-я — пациенты с классической неоваскулярной мембраной- 2-я -пациенты со смешанной неоваскулярной мембраной- 3-я — пациенты с активной фиброваскулярной мембраной. Изменение уровня цитокинов (IL-1p, IL-Б, L-18, VEGF) во влаге передней камеры свидетельствует о разной степени активности патологического процесса при различных вариантах расположения неоваскулярной мембраны и развития ее фиброзирования.
Ключевые слова: возрастная макулярная дегенерация, хориоидальная неоваскулярная мембрана, цитокины.
The purpose of the investigation was to determine the level of cytokines (interleukin — 1p, Б, 18, vascular endothelial growth factor and pigment epithelium-derived factor) in aqueous of anterior chamber in patients with the wet form of age-related macular degeneration. Depending on the morphological changes of neovascular membrane patients were divided into three groups: 1st — patients with classic neovascular membrane- 2nd — patients with mixed neovascular membrane, third — patients with active fibrovascular membrane. The changes of interleukin — 1p, Б, 18, VEGF in different morphological variants of neovascularization can reveal the activity of pathological process.
Key words: age-related macular degeneration, choroidal neovascularization, cytokines.
Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) представляет собой хронический дистрофический процесс, поражающий центральную область сетчатки [1]. Недавние исследования выявили, что иммунные реакции и локальное воспаление играют ключевую роль в развитии влажной формы ВМД, хотя существенной является и роль гипоксии [2, 3].
Основная роль в развитии неоваскулярной мембраны принадлежит фактору роста эндотелия сосудов (vascular endothelial growth factor — VEGF) [4]. В связи с этим в лечении влажной формы ВМД широкое распространение получили анти-VEGF препараты [5]. Однако, как было установлено, противовоспалительные препараты, в частности триамцинолон, также способствуют подавлению роста хориоидальной неоваскулярной мембраны (ХНВ), что свидетельствует о более широком участии цитокинов в формировании ХНВ [6, 7].
Цель исследования: определить локальные уровни цитокинов во влаге передней камеры глаза и их динамику в зависимости от морфологических особенностей неоваскулярной мембраны у пациентов с влажной формой возрастной макулярной дегенерации.
Материалы и методы
Для определения содержания цитокинов при влажной форме возрастной макулярной дегенерации были обследованы 22 пациента. В целях дифференциальной диагностики локализации ХНВ всем пациентам проводились
оптическая когерентная томография макулы (ОКТ) (Nidek RetinaScan — 3000) и флуоресцентная ангиография сосудов сетчатки (ФАГ) (FF 450 plus, Carl Zeiss). В зависимости от морфологических особенностей неоваскулярной мембраны пациенты были разделены на 3 группы:
1-я — 8 человек (8 глаз) — пациенты с классической неоваскулярной мембраной-
2-я — 7 человек (7 глаз) — пациенты со смешанной неова-скулярной мембраной-
3-я — 7 человек (7 глаз) — пациенты с активной фиброваскулярной мембраной.
У пациентов первой группы оптически неоднородное образование — неоваскулярная мембрана — располагалась над слоем пигментного эпителия, вокруг данного образования в нейроэпителии визуализировались гипорефлек-тивные полости — кистозный отек сетчатки и/или гипореф-лективное пространство под нейроэпителием — его экссудативная отслойка. На ФАГ выявлялось ранее прокрашивание ХНВ, прогрессивное увеличение и распространение гиперфлюоресценции за пределы первоначальных границ. У пациентов второй группы образование неоднородной эхогенности частично располагалось под и над пигментным эпителием, нейроэпителий вокруг данного образования был также кистозно-отечен и/или определялась его отслойка. На ФАГ выявлялась ранняя гиперфлюоресценция с быстрым распространением за пределы первоначальной границы, в позднюю фазу присоединялась
неравномерная гиперфлюоресценция с незначительной диффузией красителя. У пациентов третьей группы под нейроэпителием располагался гиперрефлективный очаг -фиброваскулярная мембрана, в области патологического очага пигментный эпителий не визуализировался. В слоях сетчатки определялся кистозный отек, свидетельствующий об активности фиброваскулярной мембраны. На ФАГ определялась ранняя гиперфлюоресценция с экстрафа-зальным выходом красителя и распространением его в ходе исследования, что характерно для активной классической неоваскулярной мембраны. Таким образом, дифференциальная диагностика активной фиброваскулярной мембраны от классической неоваскулярной основывалась на данных ОКТ макулы и заключалась в наличии гипер-рефлективного очага под нейроэпителием и в отсутствии пигментного эпителия в данной области.
Забор влаги передней камеры производился во время интравитреальных инъекций инсулиновым шприцем 30 G через прокол роговицы в паралимбальной области. Определение содержания цитокинов во влаге передней камеры больных проводили твердофазным «сэндвич"-вариантом иммуноферментного анализа с использованием тест-систем «Вектор-Бест» (г. Новосибирск) для интерлейкинов (IL)-ip, 6, 18, VEGF и eBioscience (США) для пигментного фактора эпителиального происхождения (Pigment Epithelium-Derived Factor — PEDF).
Учет результатов проводили с использованием автоматического фотометра «Multiscan» при длине волны 450 нм. Результаты выражали в пг/мл. Нормальный уровень исследуемых цитокинов во влаге передней камеры составляет для интерлейкина-1р — 1,94 пг/мл- для интерлейкина-6 — 4,5 пг/мл- для интерлейкина-18 — 364 пг/ мл- VEGF — 60 пг/мл, PEDF — 3,08 пг/мл [8].
Статистическая обработка результатов осуществлялась при помощи программ Microsoft Excel 97, Statistica 6.0. Использовался критерий Манна-Уитни. Критический уровень значимости при проверке гипотез p& lt-0,05.
Результаты исследования
При анализе иммунологического профиля влаги передней камеры установлена зависимость изменений цитоки-нового профиля от типа неоваскуляризации. При условии перехода неоваскуляризации из одного типа в другой, а также при изменении положения относительно интерфейса пигментного эпителия данный момент является важным для проведения дифференциальной диагностики и прогнозирования морфологических изменений ХНВ.
Уровень IL-1p во влаге передней камеры при классической неоваскулярной мембране (1-я группа) составил в среднем 1,422± 0,435 пг/мл (рис. 1).
При появлении зоны ликеджа под слоем пигментного слоя и формировании смешанной ХНВ (2-я группа) концентрация IL-1p во влаге передней камеры увеличивалась, составив в среднем 2,667+0,789 пг/мл (р1−2& lt-0,05). Подобное увеличение уровня цитокинов объясняется активацией иммунного ответа, а также повышением уровня воспалительной реакции на местном уровне. При дальнейшем течении патологического процесса на морфологическом уровне происходит развитие фиброзной ткани в макулярной области с появлением атрофических участков и угасанием воспалительной реакции, что проявляется
снижением уровня !_-1р у пациентов 3-й группы до 1,327+0,706 пг/мл.
Подобные изменения выявлены и при исследовании концентрации 11_-6. В 1-й группе уровень данного цитокина составил в среднем 2,346+0,756 пг/мл. При просачивании влаги под ПЭС (2-я группа) концентрация интерлейкина была значительно выше, составляя в среднем 4,674+1,87 пг/мл (р1−2& lt-0,05). Исход заболевания сопровождался формированием рубцовой ткани (3-я группа), при этом концентрация 1_-6 имела значения в среднем 1,79+0,872 пг/мл. Учитывая тот факт, что 1_-6 является одним из основных провоспалительных цитокинов, концентрация которого отражает уровень воспалительной активности, можно говорить о повышении воспалительной реакции при формировании смешанной неоваскулярной мембраны и снижении воспалительной активности при переходе ХНВ в стадию фиброзирования. Дополнительным подтверждением подобной тенденции является синергизм функциональной активности цитокиновой пары — !_-1р и 1_-6.
?IL-1 Р
Классическая
мембрана
Смешанная мембрана
Фиброваскулярная активная мембрана
РИС. 1.
Уровень К-1 р, К-6, PEDF во влаге передней камеры пациентов с различными типами неоваскуляризации.
Концентрация !_-18 во влаге передней камеры при формировании классической ХНВ (1-я группа) составила в среднем 373,313+93,452 пг/мл (рис. 2). При дальнейшей динамике морфологических изменений ХНВ уровень данного цитокина оставался неизменным. Во 2-й и 3-й группах его концентрация составила 320,874+47,251 пг/мл и 337,483+ 45,233 пг/мл соответственно. Несмотря на то, что !_-18 относится к одному семейству с !_-1р, динамика их концентрации изменялась разнонаправленно, что демонстрирует отсутствие синергетической активности данных цитокинов.
? IL-18 IVEGF
1


Ш
г X
Классическая
мембрана
Смешанная
мембрана
Фиброваскулярная активная мембрана
РИС. 2.
Уровень К-18, VEGF во влаге передней камеры пациентов с различными типами неоваскуляризации.
IVh
МЕДИЦИНСКИЙ
АЛЬМАНАХ
ТАБЛИЦА.
Содержание цитокинов во влаге передней камеры глаза при различных морфологических вариантах неоваскулярной мембраны (M±SD)
Основным патогенетическим звеном развития неоваску-ляризации при ВМД является повышение активности УЕвР и снижение активности РЕЭР ростовых факторов, действие которых является антагонистически направленным. При формировании классической ХНВ (1-я группа) концентрация УЕвР по влаге передней камеры составила в среднем 722,141+48,479 пг/мл. Подобные высокие значения демонстрируют активность процесса, протекающего в центральном отделе сетчатки. Сложные каскадные реакции на основе хемотаксиса и линейного сцепления УЕвР с аффинными рецепторами обеспечивают запуск развития неова-скуляризации и формирования порочного круга патогенеза, результат которого — переход ХНВ на новый уровень из хориокапиллярного слоя в ретинальный интерфейс. При формировании смешанной ХНВ концентрация УЕвР во влаге передней камеры была меньше, составляя в среднем 353,37+20,819 пг/мл (р1−2& lt-0,05). Подобное снижение концентрации может быть обусловлено двумя основными моментами: снижением активности процессов, протекающих в макулярной зоне- экранированием процесса за счет появления скрытого компонента воспалительной активности и появлении роста ХНВ под интерфейс ПЭС, где концентрация УЕвР значительно повышается.
Фиброваскулярный компонент мембраны развивался на фоне низкого значения концентрации УЕвР в передней камере глаза (3-я группа) — в среднем 120,216+24,074 пг/ мл (р1−2, р1−3& lt-0,05), что обусловлено исходом развития ХНВ с образованием рубцовой ткани. При появлении процессов фиброзирования неоваскуляризация снижается.
При классической неоваскулярной мембране (1-я группа) локальный уровень РЕЭР составлял в среднем 0,756+0,313 пг/мл, при развитии смешанного варианта
(2-я группа) — 0,549+0,114 пг/мл, при развитии фиброзирования (3-я группа) — 0,531+0,082 пг/мл. Статистическая достоверность динамики этого фактора отсутствовала. Несмотря на антагонистическое действие PEDF и VEGF при влажной форме ВМД, корреляционной взаимосвязи уровня данных факторов во влаге передней камеры не выявлено.
Таким образом, в качестве основных иммунологических показателей дифференциальной диагностики развития ХНВ могут быть следующие цитокины: IL-1p, IL-6, VEGF (таблица).
Выводы
Изменение уровня цитокинов (IL-1p, IL-6, L-18, VEGF) во влаге передней камере свидетельствует о разной степени активности патологического процесса при различных вариантах расположения неоваскулярной мембраны и развития ее фиброзирования.
ш
ЛИТЕРАТУРА
1. Лысенко В. С. Макулярная дегенерация, связанная с возрастом. Наследственные и врожденные заболевания сетчатки и зрительного нерва / под ред. А. М. Шамшиновой. М.: Медицина, 2001. С. 229−256.
Lysenko V.S. Makuljarnaja degeneracija, svjazannaja s vozrastom. Nasledstvennye i vrozhdennye zabolevanija setchatki i zritel'-nogo nerva / pod red. A.M. Shamshinovoj. M.: Medicina, 2001. S. 229−256.
2. Anderson D.H., et al. A role for local inflammation in the formation of drusenin the aging eye. Am. J. Ophthalmol. 2002. № 134. P. 411−431.
3. Das A., McGuire P.G. Retinal and choroidal angiogenesis: pathophysiology and strategies for inhibition. Prog. Retin. Eye Res. 2003. № 22. P. 721−748.
4. Ferrara N. Role of vascular endothelial growth factor in regulation of physiological angiogenesis. Am. J. Phesiol. Cell Physiol. 2001. № 280. P. 1358−1366.
5. Байбородов Я. В., Быков И. Ю. Первый опыт интравитреального введения луцентиса (ранибизумаба) при влажной форме возрастной макулодистро-фии. Вестн. офтальмологии. 2009. № 5. С. 31−33.
Bajborodov Ja.V., Bykov I. Ju. Pervyj opyt intravitreal'-nogo vvedenija lucentisa (ranibizumaba) pri vlazhnoj forme vozrastnoj makulodistrofii. Vestn. oftal'-mologii. 2009. № 5. S. 31−33.
6. В00г P.M., Bakri S.J., Singh R.J. Intraocular concentration and pharmacokinetics of triamcinolone acetonide after a single intravitreal injection. Ophthalmologу. 2003. № 110. P. 681−686.
7. Гильманшин Т. Р. Интравитреальное введение кеналога в витреорети-нальной хирургии: автореф. дис. … канд. мед. наук. Москва, 2008. 22 с.
Gil'-manshin T.R. Intravitreal'-noe vvedenie kenaloga v vitreoretinal'-noj hirurgii: avtoref. dis. … kand. med. nauk. Moskva, 2008. 22 s.
8. Young Joo Shin, Woo Ho Nam, Soo Eun Park, et al. Aqueous humor concentrations of vascular endothelial growth factor and pigment epithelium-derived factor in high myopic patients. Mol Vis. 2012. № 18. P. 2265−2270.
Тип ХНВ Уровни цитокинов, пг/мл
IL-1P IL-6 VEGF
Классическая 1,422±0,435 2,346±0,756 722,141±48,479
Смешанная 2,667±0,789* 4,674±1,87* 353,37±20,819*
Активная фиброваскулярная 1,327±0,706 1,79±0,872 120,216± 24,074*#
Примечание: *- р& lt-0,05 к 1-й группе (классическая неоваскулярная мембрана), #- р1−3& lt-0,05 ко 2-й группе (смешанная неоваскулярная мембрана).

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой