Биохимические свойства и лизогенность бактерий yersinia enterocolitica

Тип работы:
Контрольная
Предмет:
Биология


Узнать стоимость

Детальная информация о работе

Выдержка из работы

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ

«ЧЕЧЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ»

КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА

на тему: БИОХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И ЛИЗОГЕННОСТЬ БАКТЕРИЙ YERSINIA ENTEROCOLITICA

Амирова Лидия Ахмадовна

Грозный — 2014 г.

Оглавление

Введение

1. Обзор литературы

2. Материал и методы

3. Биологическая характеристика культур Yersinia enterocolitica

Выводы

Литература

Введение

Инфекционные заболевания, связанные с различными медицинскими вмешательствами и манипуляциями, возникли тогда, когда появились люди, занимавшиеся лечением, а инфекционные заболевания в стационарах — с тех пор, как стали формироваться принципы госпитального лечения и лечебные учреждения. Сейчас можно только предполагать, какой урон наносила в госпитальных условиях ятрогенные инфекции, гнойно-септические инфекции — ГСИ (ятрогенного характера и возникшие независимо от медиков) и обычные («классические») инфекционные заболевания в древности, в средние века, в добактериологическу эпоху. По-видимому, проблема была весьма серьезной.

Достаточно сослаться на слова Н. И. Пирогова (Пирогов Н.И., 1944): «Если я оглянусь на кладбище, где схоронены зараженные в госпиталях, то не знаю, чему больше удивляться: стоицизму ли хирургов, или доверию, которым продолжали пользоваться госпитали у правительства и общества. Можно ли ожидать истинного прогресса, пока врачи и правительства не выступят на новый путь и не примутся общими силами уничтожать источники госпитальных миазм?»

Сниженная резистентность организма госпитализированных больных ведет к тому, что в лечебных учреждениях возможно возникновение заболеваний, вызванных не только патогенными микроорганизмами, но и теми, которые в обычной жизни не представляют опасность.

Термин «условно-патогенные микроорганизмы» сам по себе весьма условен, поскольку четкие границы, отличающие указанных возбудителей от безусловно-патогенных, вряд ли можно провести.

А.Ф. Фролов и соавторы (1986) считают, что условно-патогенные это те микроорганизмы, для которых болезнь человека не является необходимым условием их существования в природе.

Кишечные инфекции, как и любые другие инфекционные заболевания, могут получить распространение в стационарах. Этому способствуют повышенная восприимчивость госпитализированных больных и условия тесного общения в больницах. К возбудителям внутрибольничных кишечных инфекций оказались причастными и представители рода Yersinia.

Род Yersinia включает 11 видов, из которых в патологии человека основное значение имеют 3 вида: возбудитель чумы Yersinia pestis и энтеропатогенные иерсинии, возбудитель псевдотуберкулеза Yersinia pseudotubercolosis и возбудитель кишечного иерсиниоза Yersinia enterocolitica.

Род назван в честь А. Иерсена, который в 1894 году совместно с С. Китасато открыл возбудителя чумы. Подразделение внутри рода на виды производится на основании биохимических свойств и подвижности (под ред А. А. Воробьева, 2004).

Кишечный иерсиниоз — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением толстой и тонкой кишки с явлением энтероколита и развитием мезентерального лимфаденита с возможным вовлечением в патологический процесс различных органов и систем. Возбудитель кишечного иерсиниоза — Yersinia enterocolitica (под редакц. В. В. Зверева, М. Н. Бойченко, 2012).

Острые кишечные инфекции (ОКИ) — это группа инфекционных заболеваний человека, вызываемых патогенными (шигеллы, сальмонеллы и др.) и условно-патогенными бактериями (протей, клебсиеллы, иерсинии, клостридии и др.), вирусами (рота-, астро-, калици-, группы Норфолка и др.) и простейшими (амеба хистолитика, криптоспоридии, балантидия коли и др.), характеризующихся поражением желудочно-кишечного тракта с развитием симптомов токсикоза и дегидратации (обезвоживания, эксикоза).

Острые кишечные инфекции (ОКИ) до настоящего времени занимали ведущее место в инфекционной патологии детского возраста, уступая по заболеваемости только гриппу и острым респираторным инфекциям.

По данным Всемирной Организации здравоохранения в нашей стране ежегодно фиксируется не менее 500 тыс. острых кишечных инфекций у детей. Главным защитным звеном желудочно-кишечного тракта, которое стоит на пути проникновения болезнетворных микробов, является кишечный слизистый барьер, одним из основных компонентов которого является секреторный иммуноглобулин А, выработка которого у детей снижена. Кроме того, у детей, в отличие от взрослых, слабее другие защитные системы желудочно-кишечного тракта: у них вырабатывается меньше соляной кислоты в желудке и меньше секреция поджелудочной железы, желчи, которые также препятствуют внедрению болезнетворных микробов.

У детей в отличие от взрослых чаще отмечаются тяжелые формы кишечных инфекций, так как у них быстрее наступает обезвоживание, в результате потери воды с рвотой и жидким стулом, а клетки детей, как известно, на 90% состоят из воды и солей. Следует отметить, что при возникновении любой инфекционной патологии, в том числе и кишечных инфекций, имеет значение не только количество и болезнетворность микробов, попавших в желудочно-кишечный тракт малыша, но и исходное состояние здоровья ребенка.

Цель нашей работы была изучить биохимические особенности и лизогенность у культур йерсиний выделенных в лечебных учреждениях Чеченской Республики.

1. Обзор литературы

Представители рода Yersinia прямые палочки, иногда приобретающие сферическую форму, диаметром 0,5−0,8 и длиной 1−3 мкм. Грамотрицательные. Неподвижные при 37 °C, но при температуре ниже 30 °C подвижные за счет перетрихиальных жгутиков; исключение составляют некоторые штаммы Yersinia ruckeri и вид Yersinia pestis, представители которого всегда неподвижные. Факультативные анаэробы. Хемоорганотрофы, обладающие и дыхательным и бродильными типами метаболизма. Оптимальная температура 28−30 °С. Катаболизируют D-галактозу и другие углеводы с образованием кислоты и небольшого количества газа или газ не образуют. Оксидазоотрицательные; каталазоположительные; по образованию индола виды различаются. Прорба с метиловым красным обычно положительная. Реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная; на среде Симмонса с цитратом при 37 °C не растут, а при 25−28 °С результаты варьируют. По лизиндекарбоксилазе и аргининдигидролазе, как правило отрицательные; по карбоксилазе положительные, за исключением Yersinia pestis, Yersinia pseudotubercolosis и Yersinia rohdei. Сероводород не образуют. Мочевину обычно гидролизуют, за исключением Yersinia bercovieri, Yersinia pestis и Yersinia ruckeri. Небольшое число штаммов растет в присутствии KCN; малонат не используют. В

осстанавливают нитрат. Сбраживаемые всеми или большинством видов углеводы включают L-арабинозу, мальтозу, D-маннитол, D-маннозу, и трегалозу. Встречаются в разнообразных местах обитания, включая человека, животных особенно грызунов и птиц, почву, воду, молочные и другие пищевые продукты. Yersinia pestis — возбудитель чумы, болезни главным образом диких грызунов. Переносчиками Yersinia pestis, распространяющими возбудителей среди диких грызунов служат блохи, в которых бактерии размножаются, закупоривая пищевод и глотку. Блохи отрыгивают бактерий при очередном кровососании и при этом могут передавать возбудитель, если не находят другого хозяина человеку. В результате укуса инфекционных блох у человека развивается типичная бубонная форма чумы и может возникнуть вторичная пневмония. При воздушно-капельной передаче инфекции может распространяться первично легочная чума.

Вид Yersinia pseudotubercolosis патогенен для многих видов животных и иногда для человека; его представители вызывают мезентеральный лмфоаденит, хроническое желудочно-кишечное расстройство и тяжелую септицемию. Представители Yersinia enterocolitica вызывают сходные заболевания у животных и человека. Бактерии Yersinia ruckeri вызывают болезнь «красный рот» у рыб. Другие виды в отдельных случаях вызывают оппортунистические инфекции у человека или непатогенны.

Yersinia aldovae, Yersinia bercovieri, Yersinia mollaretii и Yersinia rohdei не приведены в «Bergey's Manual of Systematic Bacteriology». Вид Yersinia aldovae описан в 1984 году (Bercovier et al., Int. J. Syst. Bacteriol. 34: 166−172). Ранее этот вид был известен как группа Х2 внутри вида Yersinia enterocolitica. Виды Yersinia bercovieri и Yersinia mollaretii описаны в 1988 году (Wauters et al., Int. J. Syst. Bacteriol. 38: 424−429). Вид Yersinia bercovieri ранее носил название Yersinia enterocolitica биогруппа 3 В, а Yersinia mollaretii — Yersinia enterocolitica биогруппа 3А. Вид Yersinia rohdei описан в 1987 году (Aleksic et al., Int. J. Syst. Bacteriol. 37: 327−332). (Определитель бактерий Берджи Т. 2.)

Иерсиниоз широко распространен во многих странах, в различных климатических зонах. Причиной заболевания являются полиморфные грамотрицательные палочки семейства Enterobacteriaceae — Yersinia enterocolitica и Yersinia pseudotuberculosis. Основной резервуар возбудителя — мелкие грызуны, свиньи и другие домашние и дикие животные. Они обсеменяют почву, воду, продукты. В организм человека иерсинии иерсинии попадают алиментарным, фекально-оральным путем, при внедрении бактерий непосредственно в кожу, иногда при переливании крови. Обладая наибольшей тропностью к органам, богатым лимфоидными элементами и фиксированными макрофагами (лимфатические узлы, печень селезенка), могут там длительно персиситировать, вызывая повторные волны заболевания или обусловливая переход процесса в хронический. Факторами передачи Y. еnterocolitica чаще всего бывают зараженные мясные продукты, молоко, овощи, вода; Y. pseudotuberculosis — овощные и молочные продукты, не прошедшие термическую обработку. Употребление воды из инфицированных открытых водоемов может явиться причиной заражения обеими инфекциями. Иерсинии способны длительно существовать при температуре +4−8 оС и размножаться в пищевых продуктах. Некоторые штаммы бактерий способны выдерживать температурные режимы пастеризации, но при кипячении все штаммы иерсиний погибают через несколько секунд. Они также чувствительны к действию обычных дезинфицирующих средств. Для иерсиниозов характерен сезонный подъем заболеваемости: в ноябре отмечается пик заражения Y. enterocolitica, в марте-мае — инфицирования Y. pseudotuberculosis. В некоторых регионах наблюдается два сезонных подъема заболеваемости — осенью и весной. Иерсиниозы встречаются преимущественно в виде спорадических случаев, но могут отмечаться и эпидемические вспышки. Заболеванию подвержены люди всех возрастов; мужчины предрасположены к нему несколько больше, чем женщины. Иерсиниоз характеризуется первичным поражением кишечника, склонностью к генерализованному течению и системным проявлением (Максимов О.Г. и др., 2006; Учайкин В. Ф., 2008).

Бактерии названы в честь французского бактериолога А. Иерсена, выделившего чистую культуру возбудителя чумы. Род Yersinia включает подвижные и неподвижные споронеобразующие палочки (иногда коккобациллы) размером 1−3×0,5−0,8 мкм. Окрашиваются они биполярно, что может служить дифференциальным признаком при выявлении Yersinia pestis. Дифференцирующий признак возбудителя чумы — отсутствие подвижности и наличие капсулы, остальные виды образуют лишь капсульное вещество. У человека Yersinia pestis вызывает чуму, Yersinia pseudotubercolosis и Yersinia enterocolitica — гастроэнтериты, брыжеечный лимфаденит, хроническую диарею и тяжелые септицемии (под редакц. В. И. Покровского, 2001).

Yersinia pestis — возбудитель чумы. Род Yersinia не относится к таксономической группе Enterobacteriaceae, но близок к ней по своему факультативно-анаэробному образу жизни и по типу брожения. Природным резервуаром этого возбудителя эпидемий служат дикие грызуны, главным образом крысы. Бактерии передаются человеку инфицированными блохами и другими эктопаразитами; в результате развивается бубонная или легочная чума. Быстрое размножение бактерий в организме и интенсивная выработка ими токсина могут приводить к скорой смерти (Шлегель Г., 1987).

Y. enterocolitica обладает способностью к сапрофитному существованию в природе: его популяция в воде, почве, растениях поддерживается свободноживущими инфузориями. Животные (крупный рогатый скот) заражаются иерсиниями, употребляя зараженную воду и корма. Источником инфекции для человека является вода, сельскохозяйственные животные и птицы, инфицированные растения, очень редко человек. Механизм заражения — фекально-оральный, пути заражения — пищевой (молоко, овощи, фрукты), водный (под редакц. В. В. Зверева и М. Н. Бойченко, 2012).

2. Материал и методы

Бактерии. В работе использовано 50 штаммов, идентифицированных как Yersinia enterocolitica.

Большинство штаммов выделено из клинического материала в бактериологической лаборатории Клинической больницы скорой медицинской помощи г Грозный.

Выделенные из клинического материала штаммы протея наиболее часто обнаруживались в моче и в раневом отделяемом.

Питательные среды и условия культивирования.

Бактерии и фаги культивировались на простых и сложных питательных средах, приготовленных из концентратов Дагестанского НПО «Питательные среды» (Махачкала). Питательные среды готовились в строгом соответствии с прописью. Необходимые химические компоненты добавлялись согласно действующим инструктивно-методическим рекомендациям и ГОСТам.

Инкубация посевов осуществлялась в термостате при температуре 37 °C в течение 18−24 часов.

Методы изучения бактерий.

А) морфология бактерий изучалась методом световой микроскопии после окраски препаратов по методу Грама;

Б) идентификация выделенных культур и изучение их биохимических свойств проводилась с помощью систем индикаторных бумажных (СИБ) производства Горьковского НИИ эпидемиологии и микробиологии в соответствии с наставлением по применению и методическими рекомендациями по идентификации бактерий рода Yersinia.

В) выявление лизогенных штаммов йерсиний проводили путем перекрестного испытания культур на чашках с 1,5% питательным агаром (Габрилович И.М., 1970, 1973). Газоны штаммов, исследуемых в качестве индикаторных, готовили двухслойным методом из суточных бульонных культур. Штаммы, исследуемые как «лизогенные», выращивались в питательном бульоне 8−12 часов, центрифугировались при 4000g в течение 10−15 минут, и надосадочные жидкости наносились петлей на газоны индикаторных культур.

Учитывая, что культуры Yersinia enterocolitica часто обладают антилизоцимной активностью, можно было предположить, что выделяемый бактериями антилизоцимный фактор может препятствовать проявлению лизиса у фагов, которые часто обладают лизоцимом, играющим роль в процессе взаимодействия фаг-клетка (Зуев В.А., 1969). Исходя из этого мы испытали на лизогенность культуры Yersinia enterocolitica на среде с добавлением лизоцима (5 мкг/мл). Были проделаны параллельно два опыта с лизоцимом и без него, в которых в качестве лизогенных испытаны 50 культур, а в качестве индикаторных 30.

3. Биологическая характеристика культур Yersinia enterocolitica

Изучение биохимических свойств культур Yersinia enterocolitica проводилась с помощью систем индикаторных бумажных (СИБ). Результаты проведенных нами исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1. Биохимические свойства Yersinia enterocolitica

свойство

Число штаммов

В %%

Образование индола

41

82

Утилизация цитрата

0

0

Образование сероводорода

0

0

Гидролиз мочевины

38

76

Продукция фенилаланиндезаминаза

0

0

Продукция лизиндекарбоксилаза

0

0

Продукция аргининдигидролаза

50

100

Гидролиз желатины

0

0

Утилизация малоната

0

0

Утилизация D-глюкозы

50

100

Утилизация D-адонитола

0

0

Утилиззация L-арабинозы

50

100

Утилизация глицерола

50

100

Утилизация дульцитола

0

0

Утилизация инозитола

16

32

Утилизация D-ксилозы

22

44

Утилизация лактозы

0

0

Утилизация мальтозы

43

86

Утилизация D-маннитола

50

100

Утилизация D-маннозы

50

100

Утилизация L-рамнозы

0

0

Утилизация рафинозы

0

0

Утилизация салицина

32

64

Утилизация сахарозы

50

100

Утилизация D-сорбитола

50

100

Утилизация трегалозы

50

100

Утилизация целлобиозы

17

34

Утилизация ацетата

21

42

Восстановление нитрата

50

100

Образование каталазы

50

100

Все исследованных 50 штаммов (100%) Yersinia enterocolitica продуцировали аргининдигидролазу. 82% из этих культур образовывали индол при расщеплении белков, 76% этих иерсиний производили гидролиз мочевины.

По отношению к углеводам исследованные культуры Yersinia enterocolitica демонстрировали высокую активность. Так все 50 штаммов Yersinia enterocolitica утилизировали D-глюкозу, L-арабинозу, глицерол, D-маннитол, D-маннозу, сахарозу, D-сорбитол, трегалозу. Углеводы мальтоза, дульцит, лактоза и рафиноза испытанные штаммы йерсиний неутилизировали.

Испытанные культуры йерсиний не утилизировали цитран, не подвергали гидролизу желатину, не продуцировали сероводород. Данные штаммы йерсиний не секретируют фенилаланиндезаминазу, лизиндекарбоксилазу.

100% испытанных культур иерсиний восстанавливали нитраты и продуцировали каталазу. 43 штамма (86%) Yersinia enterocolitica утилизировали мальтозу, 64% культур утилизировали салицин, 44% культур расщепляли D-ксилозу, 32% штаммов расщепляли инозитол, 34% культур утилизировали целлобиозу, 42% культур расщепляли ацетат.

Таким образом, как видно из таблицы 1 исследованные культуры Yersinia enterocolitica обладают высокой биохимической активностью.

На лизогенность нами испытано 50 культур Yersinia enterocolitica (Таблица 2, 3). Все штаммы испытывались как лизогенные и 30 штаммов как индикаторные. При перекрестном испытании признаки лизогении отмечены у 7 культур (5/8, 7/10, 13/5 [13/15], 29/22, 33/27, 36/18 [36/19, 36/20], 44/28). Штамм № 5 проявлял литическую активность по отношению к штамму 8, 7 — по отношению к 10, 13 — по отношению к штаммам 5 и 15, 29 был лизогенным по отношению к штамму 22, 33 — к 27, 36 был лизогенным в отношении штаммов 18, 19, 20 и 44 штамм лизировал штамм № 28 (таблица 2.).

Учитывая, что культуры Yersinia enterocolitica часто обладают антилизоцимной активностью, можно было предположить, что выделяемый бактериями антилизоцимный фактор может препятствовать проявлению лизиса у фагов, которые часто обладают лизоцимом, играющим роль в процессе взаимодействия фаг-клетка (Зуев В.А., 1969). Исходя из этого мы испытали на лизогенность культуры Yersinia enterocolitica на среде с добавлением лизоцима (5 мкг/мл). Были проделаны параллельно два опыта с лизоцимом и без него, в которых в качестве лизогенных испытаны 50 культур, а в качестве индикаторных 30.

Таблица 2. Перекрестное испытание Yersinia enterocolitica на лизогенность в обычных условиях.

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

2

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

3

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

4

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

5

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

6

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

7

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

8

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

9

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

10

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

11

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

12

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

13

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

14

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

15

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

16

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

17

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

18

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

19

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

20

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

21

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

22

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

23

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

24

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

25

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

26

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

27

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

28

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

29

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

30

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

31

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

32

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

33

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

34

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

35

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

36

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

+

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

37

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

38

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

39

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

40

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

41

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

42

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

43

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

44

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

45

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

46

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

47

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

48

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

49

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

50

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Таблица 3. Перекрестное испытание Yersinia enterocolitica на лизогенность в присутствии лизоцима

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

1

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

2

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

3

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

4

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

5

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

6

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

7

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

8

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

9

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

10

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

11

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

12

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

13

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

14

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

15

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

16

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

17

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

18

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

19

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

20

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

21

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

22

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

23

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

24

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

25

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

26

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

27

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

28

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

29

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

30

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

31

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

32

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

33

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

34

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

35

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

36

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

+

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

37

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

38

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

39

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

40

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

41

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

42

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

43

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

44

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

+

-

-

45

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

46

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

47

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

48

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

49

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

50

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Как видно из таблицы 3, признаки лизогении обнаружены в большем числе случаев при добавлении в среду лизоцима (таблица 3). Так после добавления в среду лизоцима количество лизогенных культур увеличилось на 4 штамма — 17 штамм проявлял лизогенность по отношению к 28 культуре, 22 штамм был лизогенным в отношении к 27 культуре, 34 штамм лизировал 2 культуру, 40 штамм был лизогенным в отношении к 11 культуре.

биологический химический бактерия лизогенность

Выводы

1. Все исследованных 50 штаммов (100%) Yersinia enterocolitica продуцировали аргининдигидролазу, не секретируют фенилаланиндезаминазу, лизиндекарбоксилазу. 82% из этих культур образовывали индол, 76% культур производили гидролиз мочевины, продуцировали каталазу. Не утилизировали цитран, не подвергали гидролизу желатину, не продуцировали сероводород. 100% испытанных культур восстанавливали нитраты, 42% культур расщепляли ацетат.

2. По отношению к углеводам исследованные культуры Yersinia enterocolitica демонстрировали высокую активность. Так все 50 штаммов Yersinia enterocolitica утилизировали D-глюкозу, L-арабинозу, глицерол, D-маннитол, D-маннозу, сахарозу, D-сорбитол, трегалозу. Углеводы мальтоза, дульцит, лактоза и рафиноза испытанные штаммы йерсиний неутилизировали, 43 штамма (86%) Yersinia enterocolitica утилизировали мальтозу, 64% культур утилизировали салицин, 44% культур расщепляли D-ксилозу, 32% штаммов расщепляли инозитол, 34% культур утилизировали целлобиозу.

3. При перекрестном испытании в обычных условиях признаки лизогении отмечены у 7 культур (5/8, 7/10, 13/5 [13/15], 29/22, 33/27, 36/18 [36/19, 36/20], 44/28).

4. После добавления в среду лизоцима количество лизогенных культур увеличилось на 4 штамма — 17 штамм проявлял лизогенность по отношению к 28 культуре, 22 штамм был лизогенным в отношении к 27 культуре, 34 штамм лизировал 2 культуру, 40 штамм был лизогенным в отношении к 11 культуре.

Список литературы

1. Габрилович И. М. Лизогения. — Минск. — 1970.

2. Габрилович И. М., Батурицкая Н. В. Исследование литического фермента фагов Klebsiella, образующегося в бактериальной клетке // Вестник Белорусского госуниверситета. — сер. II. — № 2. — С. 42−44.

3. Гольдфарб Д. М. Бактериофагия. — М., 1961.

4. Гольдфарб Д. М., Зуев В. А. Литический фермент, обнаруживаемый на твердых питательных средах //Вопр. Вирусол. — 1963. — № 6. — С. 662−667.

5. Зуев В. А. Литическая активность бактериальных вирусов. — М., 1969.

6. Зуев В. А., Желтвай В. В. использование признака лизинообразования (е-признак) при внутривидовой дифференциации фагов // Ж. Микробиол. — 1965. — № 9. — С. 42−44.

7. Инструкция по применению дисков для определения чувствительности к антибиотикам. — М., 1986.

8. Максимова О. Г. Заболевания органов пищеварения у детей //О.Г. Максимова, И.И. Петрухина/ Издатель: Феникс, Москва, 2006

9. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология //А.А. Воробьев ред. М., 2004. 690с.

10. Медицинская микробиология //В.И. Покровский редакц. ГГОЭТАР-МЕД. М., 2001. 765с.

11. Микробиология //В.В. Зверев, М. Н. Бойченко редакц. ГОЭТАР-МЕДИА, М., 2012. 607с.

12. Основы бактериофагии. //Габрилович И.М. ред. — Минск. 1973.

13. Определитель бактерий Берджи//под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса М., Мир. 1997 Т. 1, 2.

14. Пирпогов Н. И. Начала общей военно-полевой хирургии. М. -Л., 1944

15. Учайкин В. Ф. Иерсиниозы у детей //В.Ф. Учайкин, А. В. Гордеец, С.Н. Бениова/ ГЭОТАР-Медиа, Москва, 2008 г.

16. Фролов А. Ф., Новые принципы и критерии оценки патогенных и условно-патогенных микроорганизмов//А.Ф. Фролов, А. М. Зарицкий, Ю.М. Фельдман/Журнал. Микробиол. 1986. № 9. С. 93−97.

17. Шлегель Г. Общая микробиология // Г. Шлегель М., Мир. 1987. 566с.

ПоказатьСвернуть
Заполнить форму текущей работой