Спосіб отримання гаммо-глобулінів подрібненням плаценти

Відомий спосіб отримання гамма-глобуліну, що включає подрібнення плаценти, її электроплазмолиз шляхом пропускання через звужується зазор між парними електродами після попереднього заморожування повітрям або без нього, відділення рідкої фази від твердої і виділення цільового продукту з рідкої фази.

Спосіб одержання полягає в тому, що планцету подрібнюють, в процесі перемішування просочують скрапленим газом при температурі вище 0 oc і тиску вище атмосферного, скидають тиск до атмосферного, піддаютьэлектроплазмолизу шляхом пропускання через звужується зазор між парними електродами, на які накладають протифазні ультразвукові коливання, спрямовані вздовж осі, що проходить від центрів електродів і найбільш вузькому зазору між ними, а потім відокремлюють рідку фазу від твердої і виділяють цільовий продукт з рідкої фази. Спосіб забезпечує підвищення виходу гамма-глобуліну.

Недоліком цього способу є низький вихід цільового продукту внаслідок неповного руйнування клітинної структури плаценти і часткового руйнування цільового продукту в процесі электроплазмолиза при утворенні шунтуючих перемичок між повітряними включеннями в сировині.

Спосіб реалізується наступним чином.

Плаценту подрібнюють, наприклад, на вовчку після чого просочують скрапленим газом, переважно вибраного з ряду, що включає інертні гази, азот, закис азоту, двоокис вуглецю, граничні і неграничні вуглеводні, що містять до чотирьох атомів вуглецю в молекулі, і їх суміші. Ці гази практично не взаємодіють з білками і не викликають хімічних змін у них. Просочення здійснюють при температурі вище 0 oc для виключення заморожування плаценти і тиску вище атмосферного, яке забезпечує рідкий фазовий стан газу або газової суміші при температурі просочення. В умовах перемішування просочення подрібненої плаценти скрапленим газом відбувається за 10 — 15 хв. Потім скидають тиск до атмосферного. Це призводить до миттєвого закипання впитанного плацентою скрапленого газу з вибуховим збільшенням внутрішньоклітинного тиску. В результаті відбувається розрив до 90% клітинних оболонок плаценти, уцілілих в процесі механічного подрібнення на вовчку, що значно (майже в 2 рази) перевищує кількість клітинних оболонок, що руйнуються при обробці подрібненої плаценти заморожуванням з подальшою дефростацией, як це передбачено способом-прототипом. Оброблену таким чином плаценту піддають электроплазмолизу. Для цього її пропускають через звужується зазор між парними електродами, колеблемыми в протифазі з улектрозвуковой частотою в напрямку осі, що проходить від центрів електродів до найбільш вузькогоділянки зазору між ними. У процесі проходження через вузький зазор між електродами відбувається ущільнення подрібненої маси плаценти, витискання з неї найбільш великих газових бульбашок.

Дрібні бульбашки при відсутності коливань електродів, як це передбачено способом-прототипом, залишаються в масі плаценти і утворюють порожнини з високим електричним опором, перемички сировини між якими є шунтирующими, тобто проводять електричний струм високої потужності. В результаті відбувається локальний перегрів плаценти в місцях утворення шунтуючих перемичок, що супроводжується термодеструкцией білкових речовин, у тому числі глобулярных.

При накладенні на електроди ультразвукових механічних коливань відбувається коагуляція дрібних газових бульбашок і їх видалення з маси сировини. В результаті вся подрібнена плацента піддається однаковому впливу електричного струму в процесі плазмолізу, а хімічний склад білків залишається незмінним. Крім того, ультразвукове вплив, так само як і електричне руйнує вцілілі клітинні оболонки в подрібненої плаценті, тому після электроплазмолиза в полі ультразвукових механічних коливань плацента не має взагалі уцілілих клітинних оболонок, у той час як при реалізації способу-прототипу при найкращих результатах залишається не менше 8% клітин з поруйнованими оболонками.

Після электроплазмолиза плаценту направляють на відділення рідкої фази від твердої, наприклад центрифугуванням і подальшим пресуванням шламу. Вихід рідкої фази на стадії її відділення в порівнянні зі способом-прототипом в кращому варіанті його здійснення збільшено на 6%, концентрація білка вище на 1 — 3%. З рідкої фази цільовий продукт виділяють відомими прийомами, наприклад спиртовим осадженням. Вихід гамма-глобуліну в порівнянні зі способом-прототипом в його найкращому варіанті збільшено на 8,5% [4].