Миграционная активність лейкоцитів за умов норми і за дифузних захворюваннях сполучної тканини

Миграционная активність лейкоцитів за умов норми і при дифузних захворюваннях сполучної тканини.

А.В.Пизов — кандидат біології, асистент кафедри методик викладання природничо-математичних предметів у початковій школі Ярославського державного педагогічного університету им. К. Д. Ушинского; В. Н. Левин — доктора медичних наук, професор, завкафедрою МБОС Ярославського державного педагогічного університету им. К. Д. Ушинского.

В останні роки увагу переважно фахівців дедалі більше приваблює вивчення функціональних властивостей таких клітин крові як лейкоцити, до яких належать гранулоциты, моноцити і лімфоцити. Лейкоцити відіграють провідну роль розвитку запалення (З. Rosales et al., 1995). Запалення то, можливо гострим чи хронічним, однак у процесі розвитку запальної реакції, зазвичай, спостерігаються ознаки обох форм воспаления.

Несмотря те що, що роль лейкоцитів у позиційному захисті організму відома ще з часів робіт І. І. Мечникова в 1892 року, а кожен вид лейкоцитів має свої характерні особливості і свій унікальну роль захисту, деталі механізми виконання лейкоцитами, своїх функцій поки вивчені неповно.

Ценность будь-який фагоцитарної реакції у її швидкості, випереджальної розвиток мікробного чи іншого ушкодження. Переміщення лейкоцитів у просторі належить до найхарактерніших ознак білих клітин крові. У лейкоцитів досить добре виражені обидві основні форми клітинного руху — ненаправленная, чи випадкова міграція, спрямована, чи хемотаксис.

В літературі зустрічаються роботи про цілеспрямоване русі фагоцитів — хемотаксисе (N.D.Tan et al., 1995). Першими були роботи P. S. Boyden (1962), показав здатність лейкоцитів до активної міграції. Активне переміщення в просторі притаманно більшості клітин білої крові, проте найбільш притаманно нейтрофилов (А.Н.Маянский і співавт., 1989; R.A.Erger et al., 1995).

Двигательная активність лейкоцитів змінюється що за різних захворюваннях. Так, виявлено значне наростання міграційної здібності білих клітин крові в хворих в гострої фазі запалення, а при таких станах, як агранулоцитоз, зазначено зниження рухової активності. Порушення хемотаксиса відбувається за ряді уроджених захворювань фагоцитарної системи: синдромі Чедиака-Хигаси, синдромі Швахмана-Диамонд, хвороби накопичення глікогену, дефіциті специфічних гранул нейтрофилов; і навіть вторинних (придбаних) иммунодефицитных станах, та розвитку при опікової хвороби, діабеті, злоякісних захворюваннях, у хворих на хронічними вірусними (СНІД, грип, герпес та інших.) і грибковими инфекциями.

Изучение міграційної здібності білих клітин крові сприяє розширенню знань про активних властивості лейкоцитів б і відбиває їх функціональні можливості при які протікають в організмі патологічних процессах.

Материал і нові методи исследования

Объектом дослідження служила кров зі ліктьовий вени, узята у 36 хворих на дифузійною захворюванням сполучної тканини. Усі хворі - жінки віком від 30 до 44 років. Середній вік на даний момент обстеження становив 37 лет.

Оценка ступеня активності хвороби (загострення — ремісія) у пацієнтів ВКВ проводилася відповідно до критеріїв В. А. Насоновой (1972; «Ревматичні хвороби», 1997) в відповідність до виразністю клінічних і рівнем лабораторних показателей.

Контрольную групу склали 10 практично здорових осіб, порівняних підлогою і возрасту.

Миграционную активність лейкоцитів оцінювали у тісті міграції на скляних платівках під агаром (Т.Ф. Соколова і співавт., 1983; T.E.Clausen, 1971; R.D.Nelson et al., 1975).

Суспензию клітин вносили на два лунки агарового гелю (із розрахунку 7−10×105 клітин на кожну лунку), котрий попередньо готували так: 15 мг агарозы додавали в стерильну воду (5 мл), кип’ятили протягом 20 хвилин на водяний лазні, прохолоджували до 45 З. П’ять мілілітрів живильне середовище № 199, попередньо нагрітої до 45 З, змішували з агарозным гелем і отриману агаровую середу заливали на скляні платівки. Після застигання агару у ньому пробійником робили 3 однакові лунки діаметром 2,5 мм глибиною — 2,0−2,5 мм: дві, контрольну і досвідчену, для суспензії лейкоцитів, третю — для хематтрактанта. Після цього скляні платівки поміщали у вологу камеру, де клітини культивували протягом 18 годин при 37 З в атмосферному повітрі з п’ятьма% змістом СО2. Потім препарати фіксували 1,5 години 2,5% розчином глутарового альдегіду. Після цього агар видаляли, клітини фарбували азур II-эозином. Робили микрофото і визначали площа міграції лейкоцитів. У ролі хематтрактанта використовували аутологичную сироватку крові, малий фрагмент сироваткового комплементу якої (С5а) є сильним хемотаксическим чинником для лейкоцитов.

Определяли такі величини: А — площа міграції лейкоцитів у контрольній лунці (спонтанна рухової активності); Б — площа переміщення білих клітин крові в досвідченої лунці (стимулированная міграція). Крім цього, вираховували такі показники: Б-А — хемотаксическая різниця.

Результаты та його обсуждение

Как було зазначено вище, здатність білих клітин крові до міграції відіграє в запальних реакціях організму рахунок надходження лейкоцитів на осередок запалення. Порушення цієї процесу знижує резистентність до інфекції і сприяє її распространению.

В ході дослідження визначали площа спонтанної і викликане міграції лейкоцитів у практично здорових осіб і в хворих ДЗСТ у періоди загострення і ремісії основного патологічного процесса.

В групі практично здорових осіб середній розмір спонтанної міграції лейкоцитів становила 4,4 0,3 мм² і коливалася від 2,3 до 5,5 мм², середня площа викликане міграції становила 4,4 0,2 мм².

Площадь спонтанної міграції лейкоцитів при ДЗСТ у період загострення загалом була дорівнює 6,5 2,2 мм², варіюючи від 3,3 до 28,8 мм². У 90,9% випадків площа міграції становила 8,4 мм². Площа викликане міграції лейкоцитів в хворих ДЗСТ становила 5,9 1,6 мм². Максимальна площа у своїй відповідала 21,5 мм², мінімальна — 1,7 мм². Найчастіше (81,8%) площа викликане міграції займала 5,7 мм².

При ДЗСТ відзначалася більш інтенсивна спонтанна міграційна здатність лейкоцитів (p.