Методи визначення січовини

Визначення сечовини використовується для діагностики, визначення прогнозу і тяжкості перебігу захворювання, а також для контролю за лікуванням.

Визначення сечовини в клініко-діагностичних лабораторіях проводиться різними методами, проте всі їх різноманіття можна розділити на три основні групи.

• 1. Газометричні;
• 2. Прямі фотометричні;
• 3. Ферментативні (уреазні).

Газометричні методи визначення сечовиниГазометричні методи визначення сечовини засновані на окисленні сечовини гіпобромітом натрію в лужному середовищі. При цьому сечовина піддається окисленню. У результаті реакції утворюються азот, вуглекислий газ, броміт натрію і вода. Вуглекислота поглинається розчином, а обсяг газоподібного азоту вимірюється за допомогою спеціального апарату. Найбільш зручно для практичних цілей проводити визначення сечовини в апараті Бородіна.

Недоліком цієї реакції є її низькі специфічність і точність, оскільки гіпоброміт натрію реагує не тільки з сечовиною, але і з іншими сполуками, що містять аміногрупи. Методи цієї групи неточні, погано відтворювані і незручні при серійній роботі, чутливість їх низька. Крім того, бром характеризується високою токсичністю.

У зв’язку з перерахованими вище недоліками газометричні методи визначення сечовини в даний час практично не застосовуються в клініко-діагностичних лабораторіях.

Фотометричні методи визначення сечовини засновані на реакції сечовини з різними речовинами з утворенням забарвлених сполук.

Серед фотометричних методів визначення сечовини найбільш поширеними є методи, засновані на реакції сечовини з діацетілмонооксимом (діацетилмонооксимна реакція, реакція Ферона), що протікає в два етапи.

На першому етапі діацетилмонооксим розщеплюється до диацетила і гідроксиламіну. На другому етапі діацетил в кислому середовищі вступає в реакцію конденсації з сечовиною з утворенням забарвленого комплексу. Величину його поглинання реєструють при 550 нм, або за його здатності до флюоресценції при 415 нм.

Основний недолік цього методу? світлочутливість комплексу і швидке зниження його забарвлення. Іншим недоліком є токсичність реактивів для проведення даної реакції .

Однак, незважаючи на наявні недоліки, методи цієї групи відрізняються гарною відтворюваністю, високою чутливістю, великою специфічністю.

Ферментативні методи визначення сечовини набули найбільшого поширення в сучасній клініко-лабораторній практиці. Ці методи визначення сечовини називаються також уреазні, так як в них в якості реактиву використовується фермент уреаза. Для уреази сечовина є єдиним фізіологічним субстратом, тому уреазні методи високоспецифічні .

Існує багато ферментативних методів визначення сечовини, але всі складаються з двох етапів. Перший етап? спільний для всіх уреазних методів. Суть його полягає в тому, що під дією уреази відбувається гідроліз сечовини до аміаку. На другому етапі визначається концентрація аміаку, що утворився у першому етапі. Залежно від використовуваних способів реєстрації концентрації аміаку, ферментативні (уреазні) методи визначення сечовини можна розділити на такі групи:

• · колориметричні по кінцевій точці;
• · методи з використанням сполучених ферментативних реакцій;
• · потенціометричні;
• · методи з використанням технології «сухої хімії». ;
• · ферментативні колориметричні методи визначення сечовини по кінцевій точці

У середньому за добу із сечею у людей виділяється 25−35 г сечовини, у коней? 75−150, корів? 60−100, собак? 3−10 г.

Зменшення виділення у складі сечі спостерігається при хворобах печінки, розвитку ацидозу в організмі.

Збільшення виявляють при захворюваннях, які супроводжуються посиленим розпадом білків тканин (злоякісні пухлини, гіпертиреоз).